| 中文摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-15页 |
| 1.1 磷对生物体的重要性 | 第10页 |
| 1.2 酵母磷信号通路 | 第10-11页 |
| 1.3 植物中磷信号通路 | 第11-13页 |
| 1.4 水稻中PHO80同源基因 | 第13-14页 |
| 1.5 目的和意义 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-34页 |
| 2.1 植物材料和生长环境 | 第15-16页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第15页 |
| 2.1.2 水稻培养与生长环境 | 第15-16页 |
| 2.2 低磷对水稻地上部细胞大小影响的观察 | 第16页 |
| 2.2.1 低磷处理 | 第16页 |
| 2.2.2 显微镜观察细胞大小 | 第16页 |
| 2.3 CYCP家族对低磷胁迫的响应 | 第16-19页 |
| 2.3.1 低磷胁迫处理 | 第16页 |
| 2.3.2 植物总RNA的提取 | 第16-17页 |
| 2.3.3 逆转录RNA | 第17-18页 |
| 2.3.4 半定量PCR | 第18页 |
| 2.3.5 荧光定量PCR | 第18-19页 |
| 2.4 OSCYCP4;2 的组织特异性表达 | 第19-26页 |
| 2.4.1 报告基因GUS融合载体的构建 | 第19-24页 |
| 2.4.1.1 PCR扩增目的基因 | 第19-20页 |
| 2.4.1.2 切胶回收 | 第20-21页 |
| 2.4.1.3 酶切 | 第21页 |
| 2.4.1.4 连接反应 | 第21页 |
| 2.4.1.5 大肠杆菌超级感受态的制备 | 第21-22页 |
| 2.4.1.6 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第22-23页 |
| 2.4.1.7 大肠杆菌阳性的鉴定 | 第23页 |
| 2.4.1.8 质粒小提 | 第23-24页 |
| 2.4.1.9 农杆菌感受态的制备 | 第24页 |
| 2.4.1.10 冻融法转化农杆菌 | 第24页 |
| 2.4.1.11 农杆菌阳性菌的鉴定 | 第24页 |
| 2.4.2 农杆菌介导的水稻转化 | 第24-25页 |
| 2.4.3 OsCYCP4;2-GUS转基因植株筛选 | 第25页 |
| 2.4.4 OsCYCP4;2-GUS转基因材料缺磷处理方法 | 第25-26页 |
| 2.5 OSCYCP4;2 过表达植株的获得 | 第26-28页 |
| 2.5.1 构建OsCYCP4;2 过表达载体 | 第26-27页 |
| 2.5.2 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第27页 |
| 2.5.3 转基因植株的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.5.3.1 TPS法快速粗提植物基因组 | 第27页 |
| 2.5.3.2 PCR扩增过表达片段 | 第27-28页 |
| 2.5.3.3 过表达植株RNA的提取 | 第28页 |
| 2.5.3.4 转录水平检测过表达植株 | 第28页 |
| 2.6 T-DNA突变体CYCP4;2 的鉴定 | 第28-29页 |
| 2.6.1 突变体DNA的获取 | 第28页 |
| 2.6.2 鉴定T-DNA插入水稻突变体cycp4;2 | 第28-29页 |
| 2.7 低磷胁迫处理后生理数据的统计 | 第29-32页 |
| 2.7.1 长度统计 | 第29页 |
| 2.7.2 无机磷的测定 | 第29-31页 |
| 2.7.3 总磷的测定 | 第31-32页 |
| 2.7.4 生物量的测定 | 第32页 |
| 2.7.5 低磷处理后定量方法及引物。 | 第32页 |
| 2.8 数据分析 | 第32-34页 |
| 2.8.1 数据统计 | 第32-33页 |
| 2.8.2 数据绘图 | 第33页 |
| 2.8.3 图片处理 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-44页 |
| 3.1 低磷胁迫抑制水稻地上部细胞增殖 | 第34页 |
| 3.2 OSCYCP家族基因对低磷胁迫的响应 | 第34-35页 |
| 3.3 OSCYCP4;2 在蛋白水平受低磷胁迫诱导 | 第35-36页 |
| 3.4 过表达OSCYCP4;2 减少细胞增殖抑制水稻生长 | 第36-38页 |
| 3.4.1 过表达OsCYCP4;2 抑制水稻生长 | 第36-37页 |
| 3.4.2 过表达OsCYCP4;2 通过减少细胞增殖抑制水稻生长 | 第37-38页 |
| 3.5 功能缺失突变体CYCP4;2 能缓解低磷胁迫对水稻生长的抑制 | 第38-40页 |
| 3.5.1 功能缺失突变体cycp4;2 的鉴定 | 第38-39页 |
| 3.5.2 突变体cycp4;2 能缓解低磷胁迫对水稻的生长抑制 | 第39-40页 |
| 3.6 低磷胁迫诱导的OSCYCP4;2 参与维持磷的动态平衡和信号转导 | 第40-44页 |
| 3.6.1 正常条件下，突变体cycp4;2 磷含量提高 | 第40-41页 |
| 3.6.2 OsCYCP4;2 基因表达的差异影响低磷胁迫相关基因对低磷胁迫的响应 | 第41-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第55页 |
