| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-23页 |
| 1.1 猪伪狂犬病病毒的病原学 | 第15-18页 |
| 1.1.1 伪狂犬病病毒的分类与形态特点 | 第15页 |
| 1.1.2 伪狂犬病病毒的DNA特点 | 第15-16页 |
| 1.1.3 伪狂犬病病毒蛋白特性 | 第16-17页 |
| 1.1.4 病毒的理化性质 | 第17页 |
| 1.1.5 伪狂犬病病毒的流行病学 | 第17-18页 |
| 1.2 伪狂犬病病毒基因功能 | 第18-21页 |
| 1.2.1 必需糖蛋白 | 第18-19页 |
| 1.2.2 非必需糖蛋白 | 第19页 |
| 1.2.3 其他基因 | 第19-20页 |
| 1.2.4 非编码基因 | 第20-21页 |
| 1.3 伪狂犬病病毒的检测及防治 | 第21页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第21-23页 |
| 第二章 不同代次的伪狂犬病病毒高温传代毒株的生物学特性分析 | 第23-29页 |
| 2.1 材料和方法 | 第23-25页 |
| 2.1.1 毒株 | 第23页 |
| 2.1.2 实验动物及材料 | 第23页 |
| 2.1.3 实验方法 | 第23-25页 |
| 2.2 结果 | 第25-27页 |
| 2.2.1 蚀斑实验 | 第25-26页 |
| 2.2.2 生长曲线 | 第26页 |
| 2.2.3 小鼠致病性实验 | 第26-27页 |
| 2.3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 不同代次的伪狂犬病病毒高温传代毒株的基因组序列分析 | 第29-41页 |
| 3.1 材料和方法 | 第29-32页 |
| 3.1.1 毒株与细胞 | 第29页 |
| 3.1.2 菌株、试剂与载体 | 第29页 |
| 3.1.3 主要的设备仪器 | 第29-30页 |
| 3.1.4 病毒基因组DNA的提取 | 第30页 |
| 3.1.5 高通量测序 | 第30-31页 |
| 3.1.6 常规测序方法补测 | 第31-32页 |
| 3.1.7 测序结果序列拼接与序列分析 | 第32页 |
| 3.2 结果 | 第32-40页 |
| 3.2.1 高通量测序结果 | 第32-35页 |
| 3.2.2 常规测序 | 第35-36页 |
| 3.2.3 F50，F120全序列的获得 | 第36-37页 |
| 3.2.4 JS-2012 与各传代毒的序列对比分析 | 第37-40页 |
| 3.3 讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 PRV高温传代毒株F120 UL16，UL46基因移码突变的验证 | 第41-50页 |
| 4.1 | 第41-45页 |
| 4.1.1 毒株 | 第41页 |
| 4.1.2 菌株与试剂 | 第41页 |
| 4.1.3 主要的设备仪器 | 第41页 |
| 4.1.4 mRNA水平验证 | 第41-44页 |
| 4.1.5 蛋白水平验证 | 第44-45页 |
| 4.2 实验结果 | 第45-48页 |
| 4.2.1 3’ RACE-PCR电泳结果 | 第45-46页 |
| 4.2.2 测序结果分析 | 第46页 |
| 4.2.3 UL16，UL46蛋白原核表达结果 | 第46-47页 |
| 4.2.4 UL16，UL46 Western blot鉴定 | 第47-48页 |
| 4.2.5 UL16，UL46 IFA鉴定 | 第48页 |
| 4.3 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 伪狂犬病病毒变异株gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | 第50-56页 |
| 5.1 材料和方法 | 第50-52页 |
| 5.1.1 毒株、细胞和实验动物 | 第50页 |
| 5.1.2 载体、试剂和菌株 | 第50页 |
| 5.1.3 pCold-gE重组质粒的构建 | 第50-51页 |
| 5.1.4 重组蛋白的诱导表达与纯化 | 第51页 |
| 5.1.5 小鼠免疫 | 第51页 |
| 5.1.6 McAbs的制备 | 第51页 |
| 5.1.7 间接免疫荧光试验检测单克隆抗体 | 第51页 |
| 5.1.8 Western blot检测单克隆抗体 | 第51-52页 |
| 5.2 结果 | 第52-54页 |
| 5.2.1 pCold-gE重组质粒的构建 | 第52页 |
| 5.2.2 重组gE蛋白的表达纯化 | 第52-53页 |
| 5.2.3 间接免疫荧光试验检测gE单克隆抗体的特异性 | 第53页 |
| 5.2.4 Western blot检测gE单克隆抗体的特异性 | 第53-54页 |
| 5.3 讨论 | 第54-56页 |
| 第六章 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-71页 |
| 附录表S1 扩增F50，F120全基因组的引物 | 第63-66页 |
| 附录表S2 传代毒株与JS-2012 亲本毒株数据统计表 | 第66-67页 |
| 附录表S3 SNP、small indel数据统计表 | 第67-69页 |
| 附录表S4 样本中exonic区域突变位点对蛋白翻译的影响 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简历 | 第72页 |
