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益气除痰方调控GRP78介导多条信号通路抑制肿瘤血管新生的机制研究

摘要第3-6页
Abstract第6-9页
引言第13-15页
第一章 文献研究第15-30页
    1.1 肿瘤与血管新生第15-16页
    1.2 肿瘤血管新生相关信号传导通路第16-19页
        1.2.1 VEGF/VEGFR信号通路第16-17页
        1.2.2 PI3K/AKT通路第17页
        1.2.3 MAPK通路第17-18页
        1.2.4 FAK通路第18-19页
    1.3 GRP78与肿瘤血管新生研究进展第19-20页
    1.4 缺氧与肿瘤血管新生第20-21页
    1.5 抗肿瘤血管新生治疗进展第21-23页
        1.5.1 贝伐单抗第21页
        1.5.2 阿普西普第21-22页
        1.5.3 西妥昔单抗第22页
        1.5.4 抗VEGFR抗体第22页
        1.5.5 酪氨酸激酶抑制剂(TKI)第22-23页
        1.5.6 其他抗血管生成抑制剂第23页
    1.6 中医药治疗肿瘤血管生成进展第23-24页
    1.7 中医理论对肺癌的认识及YQCTF的临床应用第24-30页
第二章 细胞实验研究第30-72页
    2.1 实验材料第30-33页
        2.1.1 细胞株第30页
        2.1.2 实验用药第30页
        2.1.3 实验主要试剂第30-32页
        2.1.4 实验主要仪器第32-33页
        2.1.5 药物及常用试剂的配制第33页
    2.2 实验方法第33-41页
        2.2.1 细胞培养第33页
        2.2.2 细胞冻存第33-34页
        2.2.3 细胞复苏第34页
        2.2.4 建立缺氧细胞模型第34页
        2.2.5 CCK8法检测细胞活力第34页
        2.2.6 倒置显微镜观察YQCTF对细胞状态的影响第34-35页
        2.2.7 流式细胞术AnnexinV/PI染色法检测细胞凋亡第35页
        2.2.8 流式细胞术细胞DNA含量测定检测细胞周期第35页
        2.2.9 Tube Formation实验观察管腔形成第35页
        2.2.10 划痕实验观察细胞修复能力第35-36页
        2.2.11 Transwell实验检测细胞迁移和细胞侵袭第36页
        2.2.12 Western Blot检测血管新生相关信号蛋白表达水平第36-38页
        2.2.13 QPCR检测血管新生相关基因mRNA表达水平第38-40页
        2.2.14 免疫荧光观察细胞GRP78定位第40页
        2.2.15 细胞siRNA GRP78转染构建第40-41页
        2.2.16 Western Blot和QPCR验证siRNA转染体系第41页
        2.2.17 倒置显微镜观察siRNA GRP78细胞形态第41页
        2.2.18 CCK8评估siRNA GRP78对细胞活力的影响第41页
        2.2.19 Tube Formation和Transwell实验评估siRNA GRP78血管新生能力第41页
        2.2.20 免疫荧光观察siRNA GRP78细胞定位第41页
        2.2.21 统计学处理第41页
    2.3 结果第41-65页
        2.3.1 CoCl_2诱导缺氧对细胞活力的影响第41-42页
        2.3.2 YQCTF对细胞活力的影响第42-43页
        2.3.3 YQCTF对细胞状态的影响第43-44页
        2.3.4 YQCTF对细胞凋亡的影响第44-45页
        2.3.5 YQCTF对细胞周期的影响第45-47页
        2.3.6 YQCTF对管腔形成的影响第47-48页
        2.3.7 YQCTF对细胞修复能力的影响第48-50页
        2.3.8 YQCTF对细胞迁移、侵袭能力的影响第50-52页
        2.3.9 YQCTF对血管新生相关信号通路蛋白和基因表达水平的影响第52-58页
        2.3.10 YQCTF对细胞GRP78定位的影响第58-59页
        2.3.11 siRNA条件确立第59-60页
        2.3.12 siGRP78细胞形态学的观察第60-61页
        2.3.13 siGRP78对细胞活力的影响第61-62页
        2.3.14 siGRP78对管腔形成、细胞迁移、细胞侵袭的影响第62-63页
        2.3.15 沉默GRP78对血管新生相关信号蛋白表达的影响第63-64页
        2.3.16 沉默GRP78后细胞GRP78定位第64-65页
    2.4 讨论第65-72页
第三章 动物实验第72-85页
    3.1 材料和方法第72-74页
        3.1.1 实验细胞株第72页
        3.1.2 实验动物第72页
        3.1.3 实验用药第72页
        3.1.4 实验主要试剂第72-73页
        3.1.5 实验主要仪器第73页
        3.1.6 常用试剂的配制第73-74页
    3.2 实验方法第74-75页
        3.2.1 细胞培养第74页
        3.2.2 动物饲养第74页
        3.2.3 裸鼠移植瘤模型建立第74页
        3.2.4 动物分组及给药方法第74页
        3.2.5 裸鼠一般情况观察、体重与移植瘤体积测量第74页
        3.2.6 标本采集第74页
        3.2.7 免疫组化法(IHC)检测瘤体组织血管新生相关蛋白表达第74-75页
    3.3 统计学处理第75-76页
    3.4 实验结果第76-82页
        3.4.1 YQCTF对肺癌A549移植瘤小鼠体重的影响第76页
        3.4.2 YQCTF对移植瘤生长的影响第76-77页
        3.4.3 YQCTF对移植瘤瘤重的影响第77-78页
        3.4.4 YQCTF对移植瘤组织血管新生相关蛋白表达的影响第78-82页
    3.5 讨论第82-85页
结语第85-86页
参考文献第86-95页
附录第95-96页
在校期间发表论文情况第96-97页
统计学审核证明第97-99页
致谢第99页

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