摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
引言 | 第13-15页 |
第一章 文献研究 | 第15-30页 |
1.1 肿瘤与血管新生 | 第15-16页 |
1.2 肿瘤血管新生相关信号传导通路 | 第16-19页 |
1.2.1 VEGF/VEGFR信号通路 | 第16-17页 |
1.2.2 PI3K/AKT通路 | 第17页 |
1.2.3 MAPK通路 | 第17-18页 |
1.2.4 FAK通路 | 第18-19页 |
1.3 GRP78与肿瘤血管新生研究进展 | 第19-20页 |
1.4 缺氧与肿瘤血管新生 | 第20-21页 |
1.5 抗肿瘤血管新生治疗进展 | 第21-23页 |
1.5.1 贝伐单抗 | 第21页 |
1.5.2 阿普西普 | 第21-22页 |
1.5.3 西妥昔单抗 | 第22页 |
1.5.4 抗VEGFR抗体 | 第22页 |
1.5.5 酪氨酸激酶抑制剂(TKI) | 第22-23页 |
1.5.6 其他抗血管生成抑制剂 | 第23页 |
1.6 中医药治疗肿瘤血管生成进展 | 第23-24页 |
1.7 中医理论对肺癌的认识及YQCTF的临床应用 | 第24-30页 |
第二章 细胞实验研究 | 第30-72页 |
2.1 实验材料 | 第30-33页 |
2.1.1 细胞株 | 第30页 |
2.1.2 实验用药 | 第30页 |
2.1.3 实验主要试剂 | 第30-32页 |
2.1.4 实验主要仪器 | 第32-33页 |
2.1.5 药物及常用试剂的配制 | 第33页 |
2.2 实验方法 | 第33-41页 |
2.2.1 细胞培养 | 第33页 |
2.2.2 细胞冻存 | 第33-34页 |
2.2.3 细胞复苏 | 第34页 |
2.2.4 建立缺氧细胞模型 | 第34页 |
2.2.5 CCK8法检测细胞活力 | 第34页 |
2.2.6 倒置显微镜观察YQCTF对细胞状态的影响 | 第34-35页 |
2.2.7 流式细胞术AnnexinV/PI染色法检测细胞凋亡 | 第35页 |
2.2.8 流式细胞术细胞DNA含量测定检测细胞周期 | 第35页 |
2.2.9 Tube Formation实验观察管腔形成 | 第35页 |
2.2.10 划痕实验观察细胞修复能力 | 第35-36页 |
2.2.11 Transwell实验检测细胞迁移和细胞侵袭 | 第36页 |
2.2.12 Western Blot检测血管新生相关信号蛋白表达水平 | 第36-38页 |
2.2.13 QPCR检测血管新生相关基因mRNA表达水平 | 第38-40页 |
2.2.14 免疫荧光观察细胞GRP78定位 | 第40页 |
2.2.15 细胞siRNA GRP78转染构建 | 第40-41页 |
2.2.16 Western Blot和QPCR验证siRNA转染体系 | 第41页 |
2.2.17 倒置显微镜观察siRNA GRP78细胞形态 | 第41页 |
2.2.18 CCK8评估siRNA GRP78对细胞活力的影响 | 第41页 |
2.2.19 Tube Formation和Transwell实验评估siRNA GRP78血管新生能力 | 第41页 |
2.2.20 免疫荧光观察siRNA GRP78细胞定位 | 第41页 |
2.2.21 统计学处理 | 第41页 |
2.3 结果 | 第41-65页 |
2.3.1 CoCl_2诱导缺氧对细胞活力的影响 | 第41-42页 |
2.3.2 YQCTF对细胞活力的影响 | 第42-43页 |
2.3.3 YQCTF对细胞状态的影响 | 第43-44页 |
2.3.4 YQCTF对细胞凋亡的影响 | 第44-45页 |
2.3.5 YQCTF对细胞周期的影响 | 第45-47页 |
2.3.6 YQCTF对管腔形成的影响 | 第47-48页 |
2.3.7 YQCTF对细胞修复能力的影响 | 第48-50页 |
2.3.8 YQCTF对细胞迁移、侵袭能力的影响 | 第50-52页 |
2.3.9 YQCTF对血管新生相关信号通路蛋白和基因表达水平的影响 | 第52-58页 |
2.3.10 YQCTF对细胞GRP78定位的影响 | 第58-59页 |
2.3.11 siRNA条件确立 | 第59-60页 |
2.3.12 siGRP78细胞形态学的观察 | 第60-61页 |
2.3.13 siGRP78对细胞活力的影响 | 第61-62页 |
2.3.14 siGRP78对管腔形成、细胞迁移、细胞侵袭的影响 | 第62-63页 |
2.3.15 沉默GRP78对血管新生相关信号蛋白表达的影响 | 第63-64页 |
2.3.16 沉默GRP78后细胞GRP78定位 | 第64-65页 |
2.4 讨论 | 第65-72页 |
第三章 动物实验 | 第72-85页 |
3.1 材料和方法 | 第72-74页 |
3.1.1 实验细胞株 | 第72页 |
3.1.2 实验动物 | 第72页 |
3.1.3 实验用药 | 第72页 |
3.1.4 实验主要试剂 | 第72-73页 |
3.1.5 实验主要仪器 | 第73页 |
3.1.6 常用试剂的配制 | 第73-74页 |
3.2 实验方法 | 第74-75页 |
3.2.1 细胞培养 | 第74页 |
3.2.2 动物饲养 | 第74页 |
3.2.3 裸鼠移植瘤模型建立 | 第74页 |
3.2.4 动物分组及给药方法 | 第74页 |
3.2.5 裸鼠一般情况观察、体重与移植瘤体积测量 | 第74页 |
3.2.6 标本采集 | 第74页 |
3.2.7 免疫组化法(IHC)检测瘤体组织血管新生相关蛋白表达 | 第74-75页 |
3.3 统计学处理 | 第75-76页 |
3.4 实验结果 | 第76-82页 |
3.4.1 YQCTF对肺癌A549移植瘤小鼠体重的影响 | 第76页 |
3.4.2 YQCTF对移植瘤生长的影响 | 第76-77页 |
3.4.3 YQCTF对移植瘤瘤重的影响 | 第77-78页 |
3.4.4 YQCTF对移植瘤组织血管新生相关蛋白表达的影响 | 第78-82页 |
3.5 讨论 | 第82-85页 |
结语 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-95页 |
附录 | 第95-96页 |
在校期间发表论文情况 | 第96-97页 |
统计学审核证明 | 第97-99页 |
致谢 | 第99页 |