| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 综述 | 第12-33页 |
| 1.1 组蛋白与组蛋白去乙酰化酶 | 第12-16页 |
| 1.1.1 组蛋白与修饰 | 第12-13页 |
| 1.1.2 组蛋白去乙酰化酶的分类与功能 | 第13-16页 |
| 1.2 HDAC抑制剂的研究进展 | 第16-25页 |
| 1.2.1 目前已商品化的HDAC抑制剂 | 第16-25页 |
| 1.3 HDAC抑制剂的结构和生物学活性 | 第25-29页 |
| 1.3.1 HDAC抑制剂的结构特征 | 第25-26页 |
| 1.3.2 HDAC抑制剂的生物学活性 | 第26-29页 |
| 1.4 开发新型HDAC抑制剂 | 第29-32页 |
| 1.4.1 目前已知的HDAC抑制剂的缺陷 | 第29-30页 |
| 1.4.2 开发新的HDAC抑制剂 | 第30-32页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第32-33页 |
| 第二章 通过HTS识别新化学结构的HDAC抑制剂 | 第33-47页 |
| 2.1 前言 | 第33页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第33-38页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第33页 |
| 2.2.2 构建稳定表达荧光报告基因和腺病毒晚期启动子Ad-MLP的细胞株 | 第33-36页 |
| 2.2.3 HTS检测 | 第36-37页 |
| 2.2.4 HDAC活性测试 | 第37-38页 |
| 2.3 实验结果 | 第38-45页 |
| 2.3.1 构建腺病毒载体，检测AdMLP-Luc基因表达情况 | 第38-39页 |
| 2.3.2 利用荧光报告系统和细胞活性试验高通量筛选活性化合物 | 第39-42页 |
| 2.3.3 进一步筛选对HDAC有抑制效果的化合物 | 第42-45页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 SAR鉴定UF010及其类似物 | 第47-55页 |
| 3.1 前言 | 第47页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第47-49页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第47页 |
| 3.2.2 分子对接 | 第47-48页 |
| 3.2.3 HDAC活性测试 | 第48-49页 |
| 3.3 实验结果 | 第49-54页 |
| 3.3.1 人工合成UF010类似物 | 第49-50页 |
| 3.3.2 分子模拟 | 第50-51页 |
| 3.3.3 构效关系检测 | 第51-54页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 UF010对全部蛋白质乙酰化水平的影响 | 第55-66页 |
| 4.1 前言 | 第55页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第55-60页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第55页 |
| 4.2.2 细胞培养 | 第55-56页 |
| 4.2.3 组蛋白提取和纯化 | 第56页 |
| 4.2.4 蛋白免疫杂交Western blotting | 第56-60页 |
| 4.2.5 HDAC活性测试 | 第60页 |
| 4.3 实验结果 | 第60-64页 |
| 4.3.1 检测苯甲酰胺类化合物UF010等对特异位点乙酰化的调控 | 第60-61页 |
| 4.3.2 人工合成UF010类似物对组蛋白乙酰化的调控 | 第61页 |
| 4.3.3 UF010对非组蛋白的乙酰化的影响 | 第61-63页 |
| 4.3.4 UF010的作用底物蛋白的乙酰化位点分析 | 第63-64页 |
| 4.3.5 UF010与已知HDAC抑制剂比较 | 第64页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第64-66页 |
| 第五章 UF010对靶蛋白快结合-慢释放的机制 | 第66-73页 |
| 5.1 前言 | 第66页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第66-68页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第66页 |
| 5.2.2 细胞培养 | 第66-67页 |
| 5.2.3 HDAC活性测试 | 第67页 |
| 5.2.4 HDAC荧光酶动力学测试 | 第67-68页 |
| 5.2.5 UF010酶动力学检测 | 第68页 |
| 5.3 实验结果 | 第68-71页 |
| 5.3.1 体外检测UF010对HDAC2的酶动力学影响 | 第68页 |
| 5.3.2 蛋白杂交检测UF010对HDAC酶动力学的影响 | 第68-70页 |
| 5.3.3 检测活细胞中的HDAC变化 | 第70-71页 |
| 5.4 结论与讨论 | 第71-73页 |
| 第六章 UF010及其类似物的HDAC抑制活性与其抗增殖活性相关 | 第73-84页 |
| 6.1 前言 | 第73页 |
| 6.2 实验材料与方法 | 第73-75页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第73页 |
| 6.2.2 细胞培养 | 第73页 |
| 6.2.3 细胞活力测试 | 第73-74页 |
| 6.2.4 NCI-60 癌细胞系面板测试(Shoemaker 2006) | 第74-75页 |
| 6.3 实验结果 | 第75-82页 |
| 6.3.1 UF010对HC T116细胞的毒性与MS-275，SAHA相比较 | 第75-76页 |
| 6.3.2 UF010及其类似物对Hep G2细胞的毒性试验 | 第76页 |
| 6.3.3 UF010及其类似物对不同肿瘤细胞的毒性 | 第76-78页 |
| 6.3.4 UF010及SR-3208 对HCT116和MDA-MB-231 细胞的毒性 | 第78-79页 |
| 6.3.5 UF010对NCI-60 细胞系毒性的测定 | 第79-81页 |
| 6.3.6 UF010对细胞周期的影响 | 第81页 |
| 6.3.7 划痕实验检测UF010对肿瘤细胞迁移的影响 | 第81-82页 |
| 6.4 结论与讨论 | 第82-84页 |
| 第七章 UF010激活肿瘤抑制通路，抑制致癌信号通路 | 第84-90页 |
| 7.1 前言 | 第84页 |
| 7.2 实验材料与方法 | 第84-85页 |
| 7.2.1 实验材料 | 第84-85页 |
| 7.2.2 蛋白质组学分析 | 第85页 |
| 7.2.3 人类基因转录组分析 | 第85页 |
| 7.3 实验结果 | 第85-88页 |
| 7.3.1 AHTA全转录组分析全局基因表达分析 | 第85-87页 |
| 7.3.2 对转录组基因功能分类 | 第87-88页 |
| 7.3.3 UF010对其他药物调节通路的影响 | 第88页 |
| 7.4 结论与讨论 | 第88-90页 |
| 第八章 结论、创新点与展望 | 第90-92页 |
| 8.1 结论 | 第90页 |
| 8.2 创新点 | 第90页 |
| 8.3 研究意义及展望 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-107页 |
| 缩略词 | 第107-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 作者简介 | 第110页 |
