| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-21页 |
| 1. 大鼠的细小病毒病的概述 | 第12-16页 |
| 2. 鼠脑心肌炎病毒的基本概述 | 第16-17页 |
| 3. 小鼠轮状病毒的基本概述 | 第17-18页 |
| 4. 大鼠疑似泰勒氏病毒的基本概述 | 第18页 |
| 5. 荧光定量PCR技术 | 第18-21页 |
| 第一部分 同时检测和鉴别大鼠微小病毒和大鼠细小病毒的双重TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用 | 第21-31页 |
| 1 材料与方法 | 第21-23页 |
| 1.1 主要的病毒毒株 | 第21页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第21-22页 |
| 1.3 标准品质粒构建与引物设计 | 第22页 |
| 1.4 样本采集 | 第22-23页 |
| 1.5 双重荧光定量PCR反应体系 | 第23页 |
| 1.6 敏感性试验、特异性试验和重复性试验 | 第23页 |
| 1.7 临床样品的检测 | 第23页 |
| 2 结果 | 第23-29页 |
| 2.1 RPV和RMV各自特异序列区间的分析 | 第23-25页 |
| 2.2 双重荧光定量PCR的标准曲线的建立 | 第25页 |
| 2.3 双重荧光定量PCR的敏感性试验 | 第25-26页 |
| 2.4 双重荧光定量PCR的特异性试验 | 第26页 |
| 2.5 双重荧光定量PCR的重复性试验 | 第26-27页 |
| 2.6 临床样品检测 | 第27-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第二部分 鼠脑心肌炎病毒TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法建立 | 第31-39页 |
| 1 材料与方法 | 第31-34页 |
| 1.1 病毒毒株 | 第31页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第31-32页 |
| 1.3 病毒RNA的提取与反转录 | 第32页 |
| 1.4 EMV标准质粒构建 | 第32-33页 |
| 1.5 引物和探针的设计 | 第33页 |
| 1.6 反应体系的建立 | 第33页 |
| 1.7 敏感性、特异性、重复性试验 | 第33-34页 |
| 1.8 临床样品检测 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-37页 |
| 2.1 荧光定量PCR的标准曲线的绘制及最佳线性范围的确定 | 第34页 |
| 2.2 敏感性试验 | 第34-35页 |
| 2.3 特异性试验 | 第35-36页 |
| 2.4 重复性试验 | 第36页 |
| 2.5 临床样品检测 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 第三部分 小鼠轮状病毒TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法建立 | 第39-45页 |
| 1 材料与方法 | 第39-40页 |
| 1.1 病毒毒株 | 第39页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第39页 |
| 1.3 病毒RNA的提取与反转录 | 第39页 |
| 1.4 MRV标准品质粒构建 | 第39页 |
| 1.5 引物和探针的设计 | 第39-40页 |
| 1.6 反应体系和条件的建立 | 第40页 |
| 1.7 敏感性、特异性和重复性 | 第40页 |
| 1.8 临床样品检测 | 第40页 |
| 2 结果 | 第40-43页 |
| 2.1 荧光定量PCR的标准曲线的建立 | 第40-41页 |
| 2.2 敏感性试验 | 第41-42页 |
| 2.3 特异性试验 | 第42页 |
| 2.4 重复性试验 | 第42-43页 |
| 2.5 临床样品检测 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第四部分 大鼠疑似泰勒氏病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | 第45-53页 |
| 1 材料与方法 | 第45-48页 |
| 1.1 主要的病毒毒株 | 第45页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第45-46页 |
| 1.3 标准品质粒构建与引物设计 | 第46页 |
| 1.4 样品核酸的提取 | 第46-47页 |
| 1.5 通过SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR优化反应结果 | 第47-48页 |
| 1.6 荧光定量PCR的敏感性试验、特异性试验、重复性试验 | 第48页 |
| 1.7 临床样品检测 | 第48页 |
| 2 结果 | 第48-52页 |
| 2.1 pUC-TLV108质粒合成及普通PCR结果 | 第48-49页 |
| 2.2 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR的熔点曲线 | 第49页 |
| 2.3 荧光定量PCR的标准曲线的建立 | 第49-50页 |
| 2.4 灵敏度测定 | 第50页 |
| 2.5 特异性测定 | 第50-51页 |
| 2.6 重复性测定 | 第51页 |
| 2.7 初步应用 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 全文结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第61-62页 |
