摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
引言 | 第11-17页 |
一、肌肉生长抑制素MSTN基因的研究进展 | 第11-12页 |
二、肝素结合生长因子Mdk基因的研究进展 | 第12-14页 |
三、团头鲂四倍体育种研究进展 | 第14-16页 |
四、本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
第一章 团头鲂MSTN基因结构、表达及过表达对胚胎发育的影响 | 第17-27页 |
1.1 实验用鱼、胚胎 | 第17-18页 |
1.2 实验方法 | 第18-20页 |
1.2.1 不同发育时期胚胎和成鱼组织总RNA的提取 | 第18页 |
1.2.2 MSTN基因全长cDNA的获得 | 第18-19页 |
1.2.3 序列比较及进化树分析 | 第19页 |
1.2.4 逆转录PCR(RT-PCR)分析 | 第19页 |
1.2.5 WISH(整胚原位杂交) | 第19-20页 |
1.2.6 团头鲂胚胎显微注射 | 第20页 |
1.3 结果与分析 | 第20-25页 |
1.3.1 团头鲂MSTN基因cDNA序列分析 | 第20-21页 |
1.3.2 同源性及分子进化分析 | 第21-23页 |
1.3.3 团头鲂MSTN mRNA在不同时期胚胎和成鱼不同组织中的表达分析 | 第23-24页 |
1.3.4 团头鲂MSTN基因WISH(整胚原位杂交)结果分析 | 第24-25页 |
1.3.5 团头鲂MSTN mRNA过表达结果分析 | 第25页 |
1.4 讨论 | 第25-27页 |
第二章 团头鲂肝素结合生长因子Mdk重复基因的克隆及功能研究 | 第27-41页 |
2.1 实验用鱼、胚胎 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-30页 |
2.2.1 不同发育时期胚胎和成鱼组织总RNA的提取 | 第28页 |
2.2.2 团头鲂Mdk重复基因全长cDNA的克隆 | 第28页 |
2.2.3 序列比较及进化树分析 | 第28-29页 |
2.2.4 逆转录PCR(RT-PCR) 和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第29页 |
2.2.5WISH(整胚原位杂交) | 第29-30页 |
2.2.6 营养与生长激素处理 | 第30页 |
2.3 实验结果与分析 | 第30-39页 |
2.3.1 团头鲂Mdka/Mdkb重复基因的cDNA序列分析 | 第30-32页 |
2.3.2 团头鲂Mdka、Mdkb基因氨基酸序列同源性及分子进化分析 | 第32-34页 |
2.3.3 团头鲂Mdka、Mdkb mRNA表达分析 | 第34-37页 |
2.3.4 整胚原位杂交 | 第37页 |
2.3.5 营养及生长激素处理结果分析 | 第37-39页 |
2.4 讨论 | 第39-41页 |
第三章 热休克诱导团头鲂四倍体初步研究 | 第41-48页 |
3.1 实验仪器、试剂及材料 | 第41-42页 |
3.1.1 实验所需仪器 | 第41页 |
3.1.2 实验所需生物化学试剂 | 第41页 |
3.1.3 实验用鱼、胚胎 | 第41-42页 |
3.2 实验方法 | 第42-43页 |
3.2.1 不同温度、时间热休克诱导团头鲂四倍体 | 第42页 |
3.2.2 团头鲂倍性检测 | 第42页 |
3.2.3 三倍体和二倍体团头鲂染色体的制备 | 第42-43页 |
3.3 实验结果 | 第43-46页 |
3.3.1 热休克诱导团头鲂出苗率 | 第43-44页 |
3.3.2 正常二倍体和三倍体团头鲂DNA含量及三倍体诱导率分析 | 第44-45页 |
3.3.3 正常二倍体和三倍体团头鲂染色体分析 | 第45-46页 |
3.4 讨论 | 第46-48页 |
结论与展望 | 第48-51页 |
一、结论 | 第48-50页 |
二、展望 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
附录:英文缩略语表 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
硕士期间发表的论文 | 第62页 |