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团头鲂生长相关基因(MSTN,Mdk)的克隆及热休克诱导四倍体初步研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
引言第11-17页
    一、肌肉生长抑制素MSTN基因的研究进展第11-12页
    二、肝素结合生长因子Mdk基因的研究进展第12-14页
    三、团头鲂四倍体育种研究进展第14-16页
    四、本研究的目的和意义第16-17页
第一章 团头鲂MSTN基因结构、表达及过表达对胚胎发育的影响第17-27页
    1.1 实验用鱼、胚胎第17-18页
    1.2 实验方法第18-20页
        1.2.1 不同发育时期胚胎和成鱼组织总RNA的提取第18页
        1.2.2 MSTN基因全长cDNA的获得第18-19页
        1.2.3 序列比较及进化树分析第19页
        1.2.4 逆转录PCR(RT-PCR)分析第19页
        1.2.5 WISH(整胚原位杂交)第19-20页
        1.2.6 团头鲂胚胎显微注射第20页
    1.3 结果与分析第20-25页
        1.3.1 团头鲂MSTN基因cDNA序列分析第20-21页
        1.3.2 同源性及分子进化分析第21-23页
        1.3.3 团头鲂MSTN mRNA在不同时期胚胎和成鱼不同组织中的表达分析第23-24页
        1.3.4 团头鲂MSTN基因WISH(整胚原位杂交)结果分析第24-25页
        1.3.5 团头鲂MSTN mRNA过表达结果分析第25页
    1.4 讨论第25-27页
第二章 团头鲂肝素结合生长因子Mdk重复基因的克隆及功能研究第27-41页
    2.1 实验用鱼、胚胎第27-28页
    2.2 实验方法第28-30页
        2.2.1 不同发育时期胚胎和成鱼组织总RNA的提取第28页
        2.2.2 团头鲂Mdk重复基因全长cDNA的克隆第28页
        2.2.3 序列比较及进化树分析第28-29页
        2.2.4 逆转录PCR(RT-PCR) 和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析第29页
        2.2.5WISH(整胚原位杂交)第29-30页
        2.2.6 营养与生长激素处理第30页
    2.3 实验结果与分析第30-39页
        2.3.1 团头鲂Mdka/Mdkb重复基因的cDNA序列分析第30-32页
        2.3.2 团头鲂Mdka、Mdkb基因氨基酸序列同源性及分子进化分析第32-34页
        2.3.3 团头鲂Mdka、Mdkb mRNA表达分析第34-37页
        2.3.4 整胚原位杂交第37页
        2.3.5 营养及生长激素处理结果分析第37-39页
    2.4 讨论第39-41页
第三章 热休克诱导团头鲂四倍体初步研究第41-48页
    3.1 实验仪器、试剂及材料第41-42页
        3.1.1 实验所需仪器第41页
        3.1.2 实验所需生物化学试剂第41页
        3.1.3 实验用鱼、胚胎第41-42页
    3.2 实验方法第42-43页
        3.2.1 不同温度、时间热休克诱导团头鲂四倍体第42页
        3.2.2 团头鲂倍性检测第42页
        3.2.3 三倍体和二倍体团头鲂染色体的制备第42-43页
    3.3 实验结果第43-46页
        3.3.1 热休克诱导团头鲂出苗率第43-44页
        3.3.2 正常二倍体和三倍体团头鲂DNA含量及三倍体诱导率分析第44-45页
        3.3.3 正常二倍体和三倍体团头鲂染色体分析第45-46页
    3.4 讨论第46-48页
结论与展望第48-51页
    一、结论第48-50页
    二、展望第50-51页
参考文献第51-60页
附录:英文缩略语表第60-61页
致谢第61-62页
硕士期间发表的论文第62页

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