| 英汉缩略语名词对照 | 第7-10页 |
| 中文摘要 | 第10-17页 |
| 英文摘要 | 第17-23页 |
| 第一部分 筛选对HBV复制有潜在影响的DExD/H-box家族蛋白 | 第24-60页 |
| 1 材料与方法 | 第24-47页 |
| 1.1 材料 | 第24-28页 |
| 1.1.1 细胞系 | 第24-25页 |
| 1.1.2 质粒和菌株 | 第25页 |
| 1.1.3 主要试剂（盒） | 第25-26页 |
| 1.1.4 仪器设备 | 第26-27页 |
| 1.1.5 试剂配制 | 第27-28页 |
| 1.2 方法 | 第28-47页 |
| 1.2.1 查询DExD/H-box解旋酶家族蛋白成员 | 第28页 |
| 1.2.2 细胞复苏 | 第28页 |
| 1.2.3 细胞传代 | 第28页 |
| 1.2.4 细胞冻存 | 第28-29页 |
| 1.2.5 细胞铺板 | 第29页 |
| 1.2.6 提取HepG2细胞总RNA（12 孔板培养皿） | 第29页 |
| 1.2.7 检测RNA浓度 | 第29-30页 |
| 1.2.8 逆转录成cDNA | 第30页 |
| 1.2.9 扩增目的基因片段 | 第30-39页 |
| 1.2.10 胶回收 | 第39页 |
| 1.2.11 检测DNA浓度 | 第39页 |
| 1.2.12 将目的基因片段连接至载体 | 第39-41页 |
| 1.2.13 制备电转感受态细菌JM109 | 第41页 |
| 1.2.14 电击转化JM109 | 第41-42页 |
| 1.2.15 转化产物测序分析 | 第42页 |
| 1.2.16 小量抽提质粒 | 第42-43页 |
| 1.2.17 酚氯仿初筛 | 第43页 |
| 1.2.18 大量抽提质粒 | 第43-44页 |
| 1.2.19 HBV核心启动子荧光素酶报告质粒构建 | 第44-45页 |
| 1.2.20 细胞转染 | 第45-46页 |
| 1.2.21 海肾荧光素酶检测系统分析 | 第46-47页 |
| 2 结果 | 第47-52页 |
| 2.1 人源性RNA解旋酶家族成员查询结果 | 第47-50页 |
| 2.2 目的基因哺乳动物细胞表达质粒构建成功 | 第50-51页 |
| 2.3 成功构建HBV核心启动子荧光素酶报告质粒 | 第51页 |
| 2.4 RNA解旋酶蛋白对HBV启动子活性影响 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 第二部分 DDX17对HBV转录和复制的影响 | 第60-82页 |
| 1 材料与方法 | 第61-69页 |
| 1.1 材料 | 第61-64页 |
| 1.1.1 细胞系 | 第61页 |
| 1.1.2 主要试剂（盒） | 第61-62页 |
| 1.1.3 仪器设备 | 第62页 |
| 1.1.4 试剂配制 | 第62-64页 |
| 1.2 方法 | 第64-69页 |
| 1.2.1 提取细胞总蛋白样品（6 孔板） | 第64页 |
| 1.2.2 蛋白浓度测定 | 第64-65页 |
| 1.2.3 Western blot检测 | 第65页 |
| 1.2.4 提取复制中间体 | 第65-66页 |
| 1.2.5 Southern blot检测 | 第66-67页 |
| 1.2.6 HBsAg ELISA试剂盒检测 | 第67-68页 |
| 1.2.7 HBeAg ELISA试剂盒检测 | 第68页 |
| 1.2.8 Northern blot检测 | 第68-69页 |
| 1.2.9 统计方法 | 第69页 |
| 2 结果 | 第69-75页 |
| 2.1 过表达DDX17对HepG2细胞中HBV复制中间体表达水平的影响 | 第69-70页 |
| 2.2 过表达DDX17对Huh7细胞中HBV复制中间体表达水平的影响 | 第70-71页 |
| 2.3 过表达DDX17对HepG2细胞中HBV转录水平的影响 | 第71-72页 |
| 2.4 过表达DDX17对Huh7细胞中HBV转录水平的影响 | 第72-73页 |
| 2.5 过表达DDX17对肝癌细胞中HBV蛋白表达水平的影响 | 第73-75页 |
| 3 讨论 | 第75-78页 |
| 参考文献 | 第78-82页 |
| 第三部分 DDX17调控HBV复制分子机制 | 第82-120页 |
| 1 材料与方法 | 第83-96页 |
| 1.1 材料 | 第83页 |
| 1.1.1 细胞系 | 第83页 |
| 1.1.2 主要试剂（盒） | 第83页 |
| 1.2 方法 | 第83-96页 |
| 1.2.1 RT-PCR检测节点分子mRNA转录水平 | 第83-85页 |
| 1.2.2 构建DDX17结构域突变体 | 第85-87页 |
| 1.2.3 RNA-Protein Pull-Down | 第87-89页 |
| 1.2.4 构建HBV核心启动子截短突变体 | 第89-90页 |
| 1.2.5 构建Fluc报告基因表达质粒 | 第90-91页 |
| 1.2.6 利用CRISPR/Cas9系统构建DDX17敲除HepG2细胞系 | 第91-93页 |
| 1.2.7 HBV复制中间体Real-time PCR | 第93-94页 |
| 1.2.8 双荧光素酶报告基因检测 | 第94-96页 |
| 2 结果 | 第96-111页 |
| 2.1 DDX17介导的HBV RNA抑制并非通过ER, ZAP和IFN-α 信号途径发挥效应 | 第96-97页 |
| 2.2 成功构建DDX17突变体 | 第97-101页 |
| 2.3 DDX17下调HBV转录并不依赖DDX17 ATP酶活性 | 第101-102页 |
| 2.4 DDX17对HBV复制的抑制并非通过直接与HBV RNA stem loop的 ? 茎环部位结合 | 第102-103页 |
| 2.5 成功利用CRISPR/Cas9系统构建DDX17基因敲除HepG2细胞系 | 第103-104页 |
| 2.6 HBV在DDX17KO细胞中复制水平能回复 | 第104-107页 |
| 2.7 在DDX17KO细胞DDX17可抑制HBV核心启动子 | 第107-108页 |
| 2.8 DDX17对HBV复制及转录的负向调节作用主要是通过抑制Enh Ⅰ活性发挥效应 | 第108-111页 |
| 3 讨论 | 第111-114页 |
| 参考文献 | 第114-120页 |
| 全文总结 | 第120页 |
| 本课题创新点 | 第120-121页 |
| 文献综述 | 第121-134页 |
| 参考文献 | 第126-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 博士期间发表论文 | 第135页 |
