| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 文献综述 | 第11-26页 |
| 第一章 猪瘟病毒及其蛋白的研究进展 | 第11-20页 |
| 1.1 CSFV基因结构及其编码蛋白的功能 | 第11-16页 |
| 1.1.1 5’非编码区 | 第12页 |
| 1.1.2 N~(pro)蛋白 | 第12-13页 |
| 1.1.3 核衣壳C蛋白 | 第13页 |
| 1.1.4 Erns蛋白 | 第13页 |
| 1.1.5 E1蛋白 | 第13-14页 |
| 1.1.6 E2蛋白 | 第14页 |
| 1.1.7 P7蛋白 | 第14页 |
| 1.1.8 NS2和NS3蛋白 | 第14-15页 |
| 1.2.9 NS4A和NS4B蛋白 | 第15页 |
| 1.1.10 NS5B蛋白 | 第15页 |
| 1.1.11 3’非编码区 | 第15-16页 |
| 1.2 NS5A研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1 猪瘟病毒NS5A蛋白结构特征 | 第16-17页 |
| 1.2.2 CSFV NS5A蛋白功能研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.3 CSFV NS5A蛋白对宿主细胞的影响 | 第18-20页 |
| 第二章 DEAD-BOX家族研究进展 | 第20-26页 |
| 2.1 DEAD-BOX蛋白的结构 | 第20-21页 |
| 2.2 DEAD-BOX家族蛋白的酶活性 | 第21-23页 |
| 2.2.1 ATPase活性 | 第21-22页 |
| 2.2.2 RNA结合活性 | 第22页 |
| 2.2.3 解旋酶活性 | 第22-23页 |
| 2.2.4 退火活性 | 第23页 |
| 2.3 DEAD-BOX蛋白参与的生物学过程 | 第23-26页 |
| 2.3.1 转录 | 第24页 |
| 2.3.2 剪切 | 第24页 |
| 2.3.3 核糖体生成 | 第24页 |
| 2.3.4 运输 | 第24-25页 |
| 2.3.5 翻译 | 第25页 |
| 2.3.6 降解 | 第25-26页 |
| 试验研究 | 第26-46页 |
| 第三章 DDX5基因的克隆及其真核表达载体的构建 | 第26-33页 |
| 3.1 材料与方法 | 第26-30页 |
| 3.1.1 材料 | 第26-27页 |
| 3.1.2 方法 | 第27-30页 |
| 3.2 结果 | 第30-31页 |
| 3.2.1 DDX5基因的扩增 | 第30页 |
| 3.2.2 重组质粒的双酶切鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.3 重组质粒的测序鉴定 | 第31页 |
| 3.3 讨论 | 第31-32页 |
| 3.4 小结 | 第32-33页 |
| 第四章 DDX5和NS5A相互作用的研究 | 第33-41页 |
| 4.1 材料 | 第33-35页 |
| 4.1.1 细胞 | 第33页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第34页 |
| 4.1.4 主要试剂配制 | 第34-35页 |
| 4.2 方法 | 第35-37页 |
| 4.2.1 细胞复苏 | 第35页 |
| 4.2.2 测定重组质粒OD值 | 第35页 |
| 4.2.3 转染 | 第35页 |
| 4.2.4 pCDNA3.1-DDX5-Myc瞬转细胞的Western blot鉴定 | 第35-36页 |
| 4.2.5 免疫共沉淀验证NS5A和DDX5之间的相互作用 | 第36-37页 |
| 4.2.6 激光共聚焦观察NS5A和DDX5的细胞共定位 | 第37页 |
| 4.3 结果 | 第37-39页 |
| 4.3.1 细胞转染重组质粒后的荧光显微镜观察 | 第37-38页 |
| 4.3.2 Co-IP验证NS5A和DDX5相互作用 | 第38页 |
| 4.3.3 激光共聚焦研究NS5A与DDX5在细胞中的共定位 | 第38-39页 |
| 4.4 讨论 | 第39-40页 |
| 4.5 小结 | 第40-41页 |
| 第五章 DDX5对猪瘟病毒基因复制的影响 | 第41-46页 |
| 5.1 材料 | 第41-42页 |
| 5.1.1 细胞与病毒 | 第41页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第41页 |
| 5.1.4 主要试剂的配制 | 第41-42页 |
| 5.2 方法 | 第42-43页 |
| 5.2.1 引物的设计与合成 | 第42页 |
| 5.2.2 SUVEC细胞总RNA的提取 | 第42页 |
| 5.2.3 感染CSFV石门株的SUVEC细胞总RNA的反转录 | 第42页 |
| 5.2.4 实时荧光定量PCR反应体系与条件 | 第42-43页 |
| 5.3 结果 | 第43-45页 |
| 5.3.1 目的片段的扩增 | 第43页 |
| 5.3.2 DDX5对猪瘟病毒复制的影响测定 | 第43-45页 |
| 5.4 讨论 | 第45页 |
| 5.5 小结 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 致谢 | 第57-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
