中文摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-19页 |
1.1 小麦产量构成因素 | 第10-11页 |
1.2 我国小麦育种进展 | 第11-12页 |
1.3 小麦遗传转化研究进展 | 第12-18页 |
1.3.1 小麦遗传转化方法 | 第13-15页 |
1.3.1.1 基因枪法 | 第13-14页 |
1.3.1.2 农杆菌介导法 | 第14页 |
1.3.1.3 花粉管通道法 | 第14-15页 |
1.3.2 选择标记基因在遗传转化中的应用 | 第15页 |
1.3.3 转基因技术在小麦育种中的应用 | 第15-18页 |
1.3.3.1 抗病转基因小麦研究 | 第15-16页 |
1.3.3.2 抗虫转基因小麦研究 | 第16页 |
1.3.3.3 抗逆转基因小麦研究 | 第16页 |
1.3.3.4 品质改良转基因小麦研究 | 第16-17页 |
1.3.3.5 其它转基因小麦研究 | 第17-18页 |
1.4 小麦转基因存在的问题、展望 | 第18页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
2 材料和方法 | 第19-23页 |
2.1 试验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 供试小麦材料 | 第19页 |
2.1.2 载体质粒 | 第19-20页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第20页 |
2.2 试验方法 | 第20-23页 |
2.2.1 培养基配制及灭菌方法 | 第20-21页 |
2.2.2 小麦幼胚愈伤组织、成熟胚诱导物的培养 | 第21页 |
2.2.3 小麦潮霉素敏感性试验 | 第21页 |
2.2.4 基因枪转化前准备 | 第21-22页 |
2.2.4.1 质粒提取 | 第21页 |
2.2.4.2 金粉处理 | 第21页 |
2.2.4.3 DNA包被金粉 | 第21-22页 |
2.2.4.4 高渗处理 | 第22页 |
2.2.5 基因枪轰击 | 第22页 |
2.2.6 转化材料的筛选培养 | 第22页 |
2.2.7 转化材料的生根、移栽 | 第22页 |
2.2.8 GUS组织化学染色 | 第22页 |
2.2.9 PCR分子检测 | 第22-23页 |
2.2.10 转基因植株的表型观察 | 第23页 |
3 结果与分析 | 第23-33页 |
3.1 小麦潮霉素筛选体系的建立 | 第23-27页 |
3.1.1 不同浓度潮霉素对幼胚愈伤组织的影响 | 第23-24页 |
3.1.2 不同浓度潮霉素对成熟胚诱导物的影响 | 第24-25页 |
3.1.3 潮霉素处理时间对组织再生的影响 | 第25页 |
3.1.4 潮霉素对是否恢复培养的幼胚愈伤组织分化的影响 | 第25-27页 |
3.1.5 潮霉素对转化后抗性苗生根的影响 | 第27页 |
3.2 小麦基因枪遗传转化 | 第27-33页 |
3.2.1 转基因小麦的获得 | 第27-28页 |
3.2.1.1 幼胚愈伤组织转基因植株的获得 | 第27页 |
3.2.1.2 小麦成熟胚诱导物转基因植株的获得 | 第27-28页 |
3.2.2 转基因小麦的鉴定 | 第28-32页 |
3.2.2.1 转基因抗性组织GUS染色 | 第28-29页 |
3.2.2.2 转基因T_0代抗性植株hpt PCR检测 | 第29页 |
3.2.2.3 转基因T_0代抗性植株Ghd7 PCR检测 | 第29-30页 |
3.2.2.4 转基因T_0代植株hpt和Ghd7 PCR共转化检测 | 第30页 |
3.2.2.5 转基因T_1代植株Ghd7 PCR检测 | 第30-31页 |
3.2.2.6 转基因T_2代植株Ghd7 PCR检测 | 第31-32页 |
3.2.3 两种受体转化效率的比较 | 第32页 |
3.2.4 转基因小麦后代表型观察 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-36页 |
4.1 潮霉素对植物生长分化的影响 | 第33-34页 |
4.2 潮霉素对不同小麦基因型再生的影响 | 第34页 |
4.3 不同受体类型对小麦转化效率的影响 | 第34页 |
4.4 目的基因的导入对转基因植株生长过程的影响 | 第34-35页 |
4.5 研究创新之处 | 第35-36页 |
图版说明 | 第36-41页 |
参考文献 | 第41-49页 |
附录Ⅰ小麦遗传转化研究进展部分表格 | 第49-53页 |
附录Ⅱ部分溶液配方及试验操作流程 | 第53-55页 |
致谢 | 第55页 |