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大麦自噬同源基因ATG6的鉴定和功能研究

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
第一章 文献综述第12-22页
    前言第12页
    1.1 细胞自噬概述第12-16页
        1.1.1 细胞自噬的不同形式和形态特点第12-13页
        1.1.2 酵母和哺乳动物的自噬研究第13-16页
    1.2 植物自噬研究进展第16-21页
        1.2.1 植物自噬的分子调控机制第16-18页
        1.2.2 植物自噬的功能研究进展第18-20页
        1.2.3 ATG6蛋白功能及其在植物中的研究近况第20-21页
    1.3 研究内容和意义第21-22页
第二章 材料与方法第22-35页
    2.1 实验材料第22页
    2.2 实验方法第22-35页
        2.2.1 大麦自噬同源基因的搜索与序列分析第22-23页
        2.2.2 载体构建第23-26页
        2.2.3 大麦幼苗的培养及非生物胁迫处理第26-27页
        2.2.4 大麦幼苗组织RNA的提取第27-28页
        2.2.5 半定量PCR和实时定量PCR分析(RT-PCR)第28-31页
            2.2.5.1 RNA模板的逆转录反应第28页
            2.2.5.2 半定量PCR第28-29页
            2.2.5.3 RT-PCR第29-31页
        2.2.6 大麦原生质体的制备和转化第31-32页
            2.2.6.1 大麦原生质体的制备第31页
            2.2.6.2 大麦原生质体转化和GFP荧光观察第31-32页
        2.2.7 酵母功能互补实验第32-33页
            2.2.7.1 酵母细胞的质粒转化第32-33页
            2.2.7.2 酵母细胞中自噬小体观察第33页
        2.2.8 BSMV介导的基因沉默实验及后续表型观察第33-35页
            2.2.8.1 BSMV介导的基因沉默侵染实验第33-34页
            2.2.8.2 ATG6基因沉默对植株叶片生长的影响分析第34-35页
第三章 实验结果与分析第35-62页
    3.1 大麦ATG6同源蛋白的搜索和序列分析第35-39页
        3.1.1 大麦ATG6蛋白的搜索筛选第35-36页
        3.1.2 大麦ATG6蛋白的序列分析第36-39页
    3.2 大麦ATG6蛋白的细胞学水平分析第39-42页
        3.2.1 HvATG6蛋白在大麦原生质体中的表达第39-41页
        3.2.2 酵母功能互补实验分析第41-42页
    3.3 胁迫条件下的表达谱分析第42-50页
        3.3.1 氮源胁迫处理时ATG6基因表达分析第42-44页
        3.3.2 盐胁迫下ATG6基因表达分析第44-45页
        3.3.3 铝毒胁迫对ATG6基因表达的影响第45-48页
        3.3.4 冷胁迫和干旱胁迫中的ATG6表达水平分析第48-49页
        3.3.5 大麦ATG6基因在抽穗期的表达水平变化第49-50页
    3.4 BSMV介导的HvATG6基因沉默对大麦幼苗的影响第50-55页
        3.4.1 BSMV介导的大麦ATG6基因沉默第50-52页
        3.4.2 大麦ATG6基因沉默对植物抗胁迫敏感性的影响第52-55页
    3.5 35S:ATG6-GFP大麦报告株系的构建第55-57页
    3.6 ATG8同源蛋白在大麦中的研究第57-62页
第四章 总结与展望第62-64页
    4.1 大麦自噬基因ATG6的工作总结第62-63页
    4.2 ATG6研究的后续展望和其它自噬相关工作的讨论第63-64页
致谢第64-65页
参考文献第65-74页

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