摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
前言 | 第12页 |
1.1 细胞自噬概述 | 第12-16页 |
1.1.1 细胞自噬的不同形式和形态特点 | 第12-13页 |
1.1.2 酵母和哺乳动物的自噬研究 | 第13-16页 |
1.2 植物自噬研究进展 | 第16-21页 |
1.2.1 植物自噬的分子调控机制 | 第16-18页 |
1.2.2 植物自噬的功能研究进展 | 第18-20页 |
1.2.3 ATG6蛋白功能及其在植物中的研究近况 | 第20-21页 |
1.3 研究内容和意义 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-35页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-35页 |
2.2.1 大麦自噬同源基因的搜索与序列分析 | 第22-23页 |
2.2.2 载体构建 | 第23-26页 |
2.2.3 大麦幼苗的培养及非生物胁迫处理 | 第26-27页 |
2.2.4 大麦幼苗组织RNA的提取 | 第27-28页 |
2.2.5 半定量PCR和实时定量PCR分析(RT-PCR) | 第28-31页 |
2.2.5.1 RNA模板的逆转录反应 | 第28页 |
2.2.5.2 半定量PCR | 第28-29页 |
2.2.5.3 RT-PCR | 第29-31页 |
2.2.6 大麦原生质体的制备和转化 | 第31-32页 |
2.2.6.1 大麦原生质体的制备 | 第31页 |
2.2.6.2 大麦原生质体转化和GFP荧光观察 | 第31-32页 |
2.2.7 酵母功能互补实验 | 第32-33页 |
2.2.7.1 酵母细胞的质粒转化 | 第32-33页 |
2.2.7.2 酵母细胞中自噬小体观察 | 第33页 |
2.2.8 BSMV介导的基因沉默实验及后续表型观察 | 第33-35页 |
2.2.8.1 BSMV介导的基因沉默侵染实验 | 第33-34页 |
2.2.8.2 ATG6基因沉默对植株叶片生长的影响分析 | 第34-35页 |
第三章 实验结果与分析 | 第35-62页 |
3.1 大麦ATG6同源蛋白的搜索和序列分析 | 第35-39页 |
3.1.1 大麦ATG6蛋白的搜索筛选 | 第35-36页 |
3.1.2 大麦ATG6蛋白的序列分析 | 第36-39页 |
3.2 大麦ATG6蛋白的细胞学水平分析 | 第39-42页 |
3.2.1 HvATG6蛋白在大麦原生质体中的表达 | 第39-41页 |
3.2.2 酵母功能互补实验分析 | 第41-42页 |
3.3 胁迫条件下的表达谱分析 | 第42-50页 |
3.3.1 氮源胁迫处理时ATG6基因表达分析 | 第42-44页 |
3.3.2 盐胁迫下ATG6基因表达分析 | 第44-45页 |
3.3.3 铝毒胁迫对ATG6基因表达的影响 | 第45-48页 |
3.3.4 冷胁迫和干旱胁迫中的ATG6表达水平分析 | 第48-49页 |
3.3.5 大麦ATG6基因在抽穗期的表达水平变化 | 第49-50页 |
3.4 BSMV介导的HvATG6基因沉默对大麦幼苗的影响 | 第50-55页 |
3.4.1 BSMV介导的大麦ATG6基因沉默 | 第50-52页 |
3.4.2 大麦ATG6基因沉默对植物抗胁迫敏感性的影响 | 第52-55页 |
3.5 35S:ATG6-GFP大麦报告株系的构建 | 第55-57页 |
3.6 ATG8同源蛋白在大麦中的研究 | 第57-62页 |
第四章 总结与展望 | 第62-64页 |
4.1 大麦自噬基因ATG6的工作总结 | 第62-63页 |
4.2 ATG6研究的后续展望和其它自噬相关工作的讨论 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |