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PLZF对奶山羊雄性生殖干细胞生物学特性的影响

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
文献综述第12-25页
    第一章 PLZF及雄性生殖干细胞的研究进展第12-25页
        1.1 PLZF研究进展第12-18页
            1.1.1 PLZF与干细胞的自我更新第13-14页
            1.1.2 PLZF与干细胞分化第14-16页
            1.1.3 PLZF与细胞周期/凋亡第16页
            1.1.4 PLZF的基因调控网络第16-18页
        1.2 雄性生殖干细胞研究进展第18-22页
            1.2.1 mGSCs的发育分化第19页
            1.2.2 mGSCs自我更新的调控因素第19-22页
        1.3 PLZF调控mGSCs的研究进展第22-25页
实验部分第25-47页
    第二章 PLZF超表达与干扰载体的构建及稳转细胞的筛选鉴定第25-37页
        2.1 材料和仪器第25-27页
            2.1.1 材料和试剂第25-26页
            2.1.2 主要仪器和器材第26页
            2.1.3 主要溶液的配制第26-27页
        2.2 方法第27-31页
            2.2.1 PLZF慢病毒超表达载体的构建第27-28页
            2.2.2 PLZF慢病毒干扰载体的构建第28页
            2.2.3 细胞转染第28页
            2.2.4 免疫荧光染色第28页
            2.2.5 包装病毒第28-29页
            2.2.6 稳转细胞株的筛选及鉴定第29页
            2.2.7 RNA提取及反转录第29-30页
            2.2.8 实时荧光定量PCR(qPCR)第30页
            2.2.9 蛋白样品的制备第30页
            2.2.10 蛋白免疫印迹(Western blot)第30页
            2.2.11 数据分析第30-31页
        2.3 结果第31-35页
            2.3.1 筛选pIRES2-EGFP/pPLZF-IRES2-EGFP稳转细胞第31页
            2.3.2 构建pPLZF-CDH重组质粒和pshPLZF重组质粒第31-33页
            2.3.3 筛选和鉴定稳转细胞第33-35页
        2.4 讨论第35-36页
        2.5 小结第36-37页
    第三章 PLZF超表达稳转细胞生物学特性的检测第37-47页
        3.1 材料和仪器第37-38页
            3.1.1 材料和试剂第37页
            3.1.2 主要仪器第37页
            3.1.3 主要溶液的配制第37-38页
        3.2 方法第38-40页
            3.2.1 免疫荧光染色第38页
            3.2.2 RNA提取及反转录第38页
            3.2.3 实时荧光定量PCR(qPCR)第38页
            3.2.4 蛋白样品的制备第38页
            3.2.5 蛋白免疫印迹(Western blot)第38页
            3.2.6 细胞生长曲线第38页
            3.2.7 CCK8检测第38-39页
            3.2.8 EdU染色第39页
            3.2.9 实验动物的饲养第39页
            3.2.10 白消安模型鼠的制备第39页
            3.2.11 细胞移植第39-40页
            3.2.12 数据分析第40页
        3.3 结果第40-45页
            3.3.1 PLZF促进奶山羊mGSCs多能性的维持并抑制其分化第40-41页
            3.3.2 PLZF与奶山羊mGSCs的DNA甲基化修饰第41-42页
            3.3.3 PLZF抑制奶山羊mGSCs增殖第42-43页
            3.3.4 PLZF促进奶山羊mGSCs凋亡第43-44页
            3.3.5 细胞移植第44-45页
        3.4 讨论第45-46页
        3.5 小结第46-47页
全文结论第47页
创新之处和进一步研究课题第47-48页
    创新之处第47页
    进一步研究的课题第47-48页
参考文献第48-58页
附录第58-62页
缩略词第62-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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