| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 上篇 文献综述 | 第13-27页 |
| 第一章 高致病性禽流感的研究进展 | 第13-19页 |
| 1 禽流感病毒简介 | 第13-14页 |
| 1.1 禽流感病毒的形态与结构 | 第13页 |
| 1.2 禽流感病毒的分类 | 第13-14页 |
| 2 禽流感病毒主要蛋白的功能及其免疫原性 | 第14-15页 |
| 2.1 血凝素蛋白HA | 第14-15页 |
| 2.2 神经氨酸酶NA | 第15页 |
| 3 高致病性禽流感H_5N_1疫苗的研究进展 | 第15-19页 |
| 3.1 全病毒灭活疫苗 | 第15页 |
| 3.2 DNA疫苗 | 第15-16页 |
| 3.3 基因重组活载体疫苗 | 第16-19页 |
| 3.3.1 重组病毒活载体疫苗 | 第16-17页 |
| 3.3.2 重组细菌活载体疫苗 | 第17页 |
| 3.3.3 生长抑素基因工程疫苗 | 第17-19页 |
| 第二章 家禽消化道黏膜免疫系统的研究进展 | 第19-23页 |
| 1 家禽消化道黏膜免疫系统 | 第19-20页 |
| 1.1 家禽肠道黏膜相关淋巴组织的主要构成 | 第19-20页 |
| 1.2 家禽肠道黏膜免疫的特点 | 第20页 |
| 2 家禽消化道黏膜免疫应答 | 第20-23页 |
| 2.1 黏膜免疫的诱导位点和效应位点 | 第20-21页 |
| 2.2 消化道黏膜免疫的机理 | 第21页 |
| 2.3 家禽消化道黏膜免疫的效应因子S IgA | 第21-23页 |
| 第三章 枯草芽孢杆菌作为递送载体的研究进展 | 第23-27页 |
| 1 枯草芽孢杆菌的生物学特性 | 第23页 |
| 2 枯草芽孢杆菌作为疫苗递送载体的优势 | 第23-24页 |
| 3 枯草芽孢杆菌重组活载体疫苗的应用现状 | 第24-27页 |
| 3.1 细菌重组枯草芽孢杆菌疫苗 | 第24-25页 |
| 3.2 病毒重组枯草芽孢杆菌疫苗 | 第25-27页 |
| 下篇 试验研究 | 第27-59页 |
| 第一章 重组枯草芽孢杆菌的构建及验证 | 第27-35页 |
| 1 材料与方法 | 第27-28页 |
| 1.1 材料 | 第27-28页 |
| 1.1.1 菌株与质粒 | 第27页 |
| 1.1.2 主要试剂及仪器 | 第27-28页 |
| 1.1.3 主要试剂的配置 | 第28页 |
| 2 重组枯草芽孢杆菌的构建 | 第28-30页 |
| 2.1 重组表达质粒pHT_(43)-HA的构建 | 第28页 |
| 2.1.1 克隆禽流感病毒H_5N_1血凝素HA目的片段 | 第28页 |
| 2.1.2 重组表达质粒pHT_(43)-HA的构建与验证 | 第28页 |
| 2.2 重组表达质粒PMK_3-HA-SS的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.1 克隆目的片段 | 第28-29页 |
| 2.2.2 重组表达质粒PMK_3-HA-SS的构建及验证 | 第29页 |
| 2.3 重组枯草芽孢杆菌的获得 | 第29页 |
| 2.4 重组枯草芽孢杆菌外源蛋白的表达 | 第29-30页 |
| 3 试验结果 | 第30-35页 |
| 3.1 目的基因片段扩增 | 第30-31页 |
| 3.2 重组表达质粒验证 | 第31页 |
| 3.3 重组枯草芽孢杆菌验证 | 第31-32页 |
| 3.4 目的蛋白的表达检测 | 第32-35页 |
| 第二章 重组枯草芽孢杆菌在雏鸡体内的定植情况 | 第35-39页 |
| 1 材料和方法 | 第35-36页 |
| 1.1 试验动物 | 第35页 |
| 1.2 动物免疫 | 第35页 |
| 1.3 取材 | 第35页 |
| 1.4 主要的试剂和仪器 | 第35-36页 |
| 2 试验方法 | 第36页 |
| 2.1 粪便样品的处理 | 第36页 |
| 2.2 细菌的分离 | 第36页 |
| 2.3 细菌的鉴定 | 第36页 |
| 2.3.1 形态学鉴定 | 第36页 |
| 2.3.2 分子生物学鉴定 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-38页 |
| 3.1 菌落形态特征及革兰氏染色结果 | 第36-37页 |
| 3.2 细菌16S rDNA基因的同源性分析 | 第37页 |
| 3.3 枯草芽孢杆菌定植情况统计 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 口服禽流感重组枯草芽孢杆菌疫苗诱导产生局部黏膜免疫水平的检测 | 第39-45页 |
| 1 材料和方法 | 第39-40页 |
| 1.1 试验动物及处理 | 第39页 |
| 1.2 取材 | 第39页 |
| 1.3 主要的试剂和仪器 | 第39-40页 |
| 1.4 间接ELISA测定口腔、肠道和气管涮洗液中禽流感特异性SIgA水平 | 第40页 |
| 1.5 数据统计与分析 | 第40页 |
| 2 试验结果 | 第40-42页 |
| 2.1 口腔涮洗液中禽流感特异性SIgA水平 | 第40-41页 |
| 2.2 肠道刷洗液中禽流感特异性SIgA水平 | 第41-42页 |
| 2.3 气管涮洗液中禽流感特异性SIgA水平 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-45页 |
| 第四章 口服禽流感重组枯草芽孢杆菌疫苗诱导鸡全身免疫水平的检测 | 第45-51页 |
| 试验一 口服禽流感重组枯草芽孢杆菌后的鸡血清中特异性HI抗体效价水平 | 第45-48页 |
| 1 材料和方法 | 第45-46页 |
| 1.1 试验动物及处理 | 第45页 |
| 1.2 取材 | 第45页 |
| 1.3 检测抗体效价 | 第45-46页 |
| 1.3.1 1%鸡红细胞的制备 | 第45页 |
| 1.3.2 血凝试验(HA) | 第45-46页 |
| 1.3.3 4单位抗原的制备 | 第46页 |
| 1.3.4 血凝抑制试验(HI) | 第46页 |
| 2 试验结果 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-48页 |
| 试验二 口服禽流感重组枯草芽孢杆菌诱导鸡产生血清特异性IgG水平的检测 | 第48-51页 |
| 1 材料与方法 | 第48-49页 |
| 1.1 试验动物及处理 | 第48页 |
| 1.2 取材 | 第48页 |
| 1.3 主要的试剂和仪器 | 第48页 |
| 1.4 间接ELISA检测血清中的禽流感特异性IgG水平 | 第48-49页 |
| 1.5 数据统计与分析 | 第49页 |
| 2 试验结果 | 第49-50页 |
| 3. 讨论 | 第50-51页 |
| 第五章 口服禽流感重组枯草芽孢杆菌疫苗对鸡生长状况的影响 | 第51-59页 |
| 试验一 口服禽流感重组枯草芽孢杆菌对鸡增重的影响 | 第51-54页 |
| 1 材料与方法 | 第51页 |
| 1.1 试验动物及处理 | 第51页 |
| 1.2 试验方法 | 第51页 |
| 1.3 主要试验仪器: | 第51页 |
| 1.4 数据统计与分析 | 第51页 |
| 2 试验结果 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 试验二 口服禽流感重组枯草芽孢杆菌对鸡小肠黏膜形态结构的影响 | 第54-59页 |
| 1 材料与方法 | 第54-55页 |
| 1.1 试验动物及处理 | 第54页 |
| 1.2 取材 | 第54页 |
| 1.3 主要的试剂和仪器 | 第54页 |
| 1.4 试验方法 | 第54-55页 |
| 1.5 肠绒毛长度统计分析 | 第55页 |
| 2 试验结果 | 第55-57页 |
| 2.1 HE染色结果 | 第55-56页 |
| 2.2 肠绒毛长度和PP结面积统计分析结果 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 全文结论 | 第69-71页 |
| 实践内容 | 第71页 |
| 其它实践内容 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
