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多环芳烃降解菌的筛选及基于靶标酶结构的降解机制研究

致谢第4-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
1 引言第15-17页
2 绪论第17-46页
    2.1 多环芳烃概述第17-33页
        2.1.1 多环芳烃的来源与污染现状第17-19页
        2.1.2 多环芳烃的分布第19-20页
        2.1.3 多环芳烃的毒理学机制第20-23页
        2.1.4 多环芳烃的修复方法第23-24页
        2.1.5 PAHs降解菌的研究现状第24-27页
        2.1.6 PAHs降解机制研究进展第27-33页
    2.2 同源模建第33-37页
        2.2.1 蛋白质晶体学第33-36页
        2.2.2 同源模建方法概述第36-37页
    2.3 分子对接第37-43页
        2.3.1 分子对接方法分类第38页
        2.3.2 分子对接构象的搜寻方法第38-39页
        2.3.3 分子对接软件的发展历程第39-43页
    2.4 微量热技术的应用及研究现状第43-45页
    2.5 研究内容与思路第45-46页
3 PAHs降解菌的筛选与鉴定第46-59页
    3.1 材料与方法第46-52页
        3.1.1 样品采集第46-47页
        3.1.2 试剂和仪器第47-48页
        3.1.3 培养基的配制第48-49页
        3.1.4 菌株的富集筛选第49页
        3.1.5 菌株的分离与复筛第49页
        3.1.6 细菌生长活性测定第49-50页
        3.1.7 细菌的分子生物学鉴定第50-52页
        3.1.8 PAHs降解菌的生理学特征研究第52页
    3.2 结果与讨论第52-58页
        3.2.1 PAHs降解菌的富集筛选第52页
        3.2.2 PAHs降解菌的鉴定第52-55页
        3.2.3 芘和荧蒽降解菌的生理学特征第55-58页
    3.3 本章小结第58-59页
4 假单胞菌JPN2对芘的降解性能和机制研究第59-72页
    4.1 材料与方法第59-63页
        4.1.1 化学品和仪器第59-60页
        4.1.2 菌株JPN2对芘的生物降解性能研究第60页
        4.1.3 芘降解产物的提取与测定第60-61页
        4.1.4 芘及其降解产物的分析方法第61-62页
        4.1.5 芘对菌株JPN2生物活性的影响研究第62页
        4.1.6 菌株JPN2对不同碳源的生物利用率研究第62-63页
    4.2 结果与讨论第63-71页
        4.2.1 菌株JPN2对芘的生物降解能力研究第63-64页
        4.2.2 芘降解产物的鉴定与分析第64-67页
        4.2.3 芘对菌株JPN2生物活性的影响研究第67-69页
        4.2.4 菌株JPN2对不同碳源的生物利用率研究第69-71页
    4.3 本章小结第71-72页
5 副氧化微杆菌JPM1对荧蒽的降解性能和机制研究第72-83页
    5.1 材料与方法第72-74页
        5.1.1 化学品和仪器第72页
        5.1.2 菌株JPM1对荧蒽的生物降解能力研究第72-73页
        5.1.3 荧蒽降解产物的提取与鉴定第73-74页
        5.1.4 荧蒽对菌株JPM1生物活性的影响研究第74页
        5.1.5 菌株JPM1对不同类型碳源的生物利用率研究第74页
    5.2 结果与讨论第74-82页
        5.2.1 菌株JPM1对荧蒽的生物降解能力研究第74-75页
        5.2.2 荧蒽降解产物的鉴定与分析第75-78页
        5.2.3 荧蒽对菌株JPM1生物活性的影响研究第78-81页
        5.2.4 菌株JPM1对不同类型碳源的生物利用率研究第81-82页
    5.3 本章小结第82-83页
6 靶标酶三维晶体结构的同源模建研究第83-94页
    6.1 材料与方法第83-89页
        6.1.1 nahAc基因的PCR扩增第83-84页
        6.1.2 靶标酶晶体结构的同源模建研究第84-88页
        6.1.3 模建晶体结构的优化与评价第88-89页
    6.2 结果与讨论第89-93页
        6.2.1 假单胞菌JPN2中nahAc基因的鉴定第89-90页
        6.2.2 模板与靶标酶一级氨基酸序列比对第90-91页
        6.2.3 靶标酶三维晶体结构解析第91-92页
        6.2.4 靶标酶JPN2-NDO晶体结构的合理性检验第92-93页
    6.3 本章小结第93-94页
7 基于靶标酶晶体结构的降解机制研究第94-105页
    7.1 材料与方法第94-95页
        7.1.1 分子对接软件第94页
        7.1.2 分子对接方法和参数设置第94-95页
        7.1.3 分子对接方法验证第95页
    7.2 结果与讨论第95-104页
        7.2.1 对接方法和对接参数验证第95-96页
        7.2.2 芘与靶标酶JPN2-NDO活性位点之间的相互作用机制研究第96-101页
        7.2.3 模板与靶标酶活性位点的结构比对第101-102页
        7.2.4 芘在假单胞菌JPN2中的生物降解机制研究第102-104页
    7.3 本章小结第104-105页
8 结论第105-109页
    8.1 主要研究结论第105-106页
    8.2 创新点第106-107页
    8.3 展望第107-109页
参考文献第109-125页
附录A Pseudomonas sp.JPN2的16S rDNA序列第125-126页
附录B Pseudomonas sp.JPN2中nahAc基因序列和相应的氨基酸序列第126-127页
附录C Microbacterium paraoxydans JPM1的16S rDNA序列第127-128页
附录D 模建的三维晶体结构JPN2-NDO的Ramachandran详解图第128-129页
附录E JPN2-NDO活性位点中各个氨基酸残基的能量第129-131页
作者简历及在学研究成果第131-135页
学位论文数据集第135页

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