| 摘要 | 第1-3页 |
| Summary | 第3-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| ·土壤盐碱化的现状与危害 | 第10页 |
| ·盐胁迫对植物的影响 | 第10-14页 |
| ·盐胁迫对植物生长发育的影响 | 第10-11页 |
| ·盐胁迫对植物的生理伤害 | 第11-12页 |
| ·盐胁迫下的渗透胁迫 | 第11页 |
| ·盐胁迫下的离子毒害 | 第11-12页 |
| ·盐胁迫下氧化胁迫对植物的影响 | 第12页 |
| ·盐胁迫对植物激素的影响 | 第12-13页 |
| ·盐胁迫对植物光合作用的影响变化 | 第13-14页 |
| ·植物的耐盐机制 | 第14-16页 |
| ·盐胁迫种子萌发的机理 | 第14页 |
| ·盐胁迫下渗透调节物质的作用 | 第14-15页 |
| ·植物体内离子选择性吸收和区隔化 | 第15页 |
| ·盐生植物与非盐生植物耐盐机制差异 | 第15-16页 |
| ·植物耐盐相关基因的研究进展 | 第16-17页 |
| ·离子转运相关基因 | 第16页 |
| ·渗透调节相关基因 | 第16页 |
| ·盐胁迫信号传导基因及表达调节相关功能基因 | 第16页 |
| ·与细胞排毒、抗氧化性相关的酶基因 | 第16-17页 |
| ·保护细胞免受胁迫伤害的相关功能蛋白基因 | 第17页 |
| ·研究目的和意义 | 第17-18页 |
| ·技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 盐生草Unigene7547基因的克隆及序列分析 | 第19-35页 |
| ·试验材料与试剂 | 第19-20页 |
| ·试验材料 | 第19页 |
| ·试剂及常用酶 | 第19页 |
| ·引物设计 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19-20页 |
| ·菌株与克隆载体 | 第20页 |
| ·仪器与设备 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-26页 |
| ·盐生草总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第21页 |
| ·盐生草Unigene7547基因的克隆 | 第21-24页 |
| ·盐生草Unigene7547基因核心片段的克隆 | 第21-22页 |
| ·盐生草Unigene7547基因 3' Racer的克隆 | 第22页 |
| ·盐生草Unigene7547基因 5' Racer的克隆 | 第22-24页 |
| ·基因的测序及全长序列的拼接 | 第24-25页 |
| ·PCR产物回收纯化 | 第24-25页 |
| ·连接克隆载体 | 第25页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第25页 |
| ·蓝白斑的筛选及测序 | 第25页 |
| ·基因全长拼接 | 第25页 |
| ·目的基因的生物信息学分析 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-33页 |
| ·总RNA的提取 | 第26页 |
| ·盐生草Unigene7547基因的克隆及序列拼接 | 第26-29页 |
| ·Unigene7547基因的生物信息学分析 | 第29-33页 |
| ·Unigene7547基因编码蛋白理化性质预测 | 第29页 |
| ·Unigene7547基因编码蛋白亚细胞定位 | 第29-30页 |
| ·Unigene7547基因编码蛋白的跨膜区和疏水性分析 | 第30-31页 |
| ·Unigene7547基因编码蛋白信号肽预测 | 第31-32页 |
| ·Unigene7547基因编码蛋白的磷酸化位点预测 | 第32页 |
| ·Unigene7547基因编码蛋白的二级结构预测 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| ·盐生草Unigene7547基因的克隆 | 第33页 |
| ·盐生草Unigene7547基因的生物信息学分析 | 第33-35页 |
| 第三章 盐生草Unigene7547基因表达载体构建与遗传转化 | 第35-50页 |
| ·试验材料和试剂 | 第35页 |
| ·试剂与工具酶 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·植物表达载体和菌株 | 第35页 |
| ·试验方法 | 第35-41页 |
| ·引物设计 | 第35页 |
| ·克隆目的基因 | 第35-36页 |
| ·目的片段的扩增 | 第35-36页 |
| ·回收纯化目的片段 | 第36页 |
| ·回收产物加A尾 | 第36页 |
| ·回收产物连接克隆载体 | 第36-37页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第37页 |
| ·阳性重组子的筛选与测序 | 第37页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的小量提取 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第38页 |
| ·构建植物表达载体pBI-Unigene7547 | 第38-39页 |
| ·质粒的双酶切 | 第38-39页 |
| ·目的片段与载体pBI121连接 | 第39页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第39页 |
| ·蓝白斑的筛选与测序 | 第39页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定和双酶切鉴定 | 第39页 |
| ·pBI-Unigene7547转化农杆菌 | 第39-40页 |
| ·农杆菌感受态细胞LBA4404的制备 | 第39-40页 |
| ·将重组质粒pBI-Unigene7547转入农杆菌 | 第40页 |
| ·阳性克隆的筛选及抗性菌落PCR检测 | 第40页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第40-41页 |
| ·烟草叶片组织培养 | 第40页 |
| ·农杆菌的活化与制备 | 第40-41页 |
| ·农杆菌浸染烟草叶片 | 第41页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-48页 |
| ·克隆目的基因 | 第41-45页 |
| ·构建植物表达载体 | 第45-46页 |
| ·植物表达载体pBI- Unigene7547的构建 | 第45页 |
| ·植物表达载体pBI- Unigene7547的鉴定 | 第45-46页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第46-48页 |
| ·重组质粒pBI-Unigene7547的农杆菌转化 | 第46-47页 |
| ·农杆菌浸染烟草叶片组织 | 第47-48页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59-60页 |
| 导师简介 | 第60-61页 |
