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基于LAMP和荧光定量PCR技术的猪圆环病毒2型和猪细小病毒检测试剂盒的研制

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第1章 绪论第12-25页
   ·猪主要DNA病毒及其检测方法简介第12-18页
     ·猪细小病毒简介及其检测方法研究进展第12-15页
       ·猪细小病毒的危害及发现第12页
       ·猪细小病毒的特点第12页
       ·猪细小病毒基因的表达第12-13页
       ·猪细小病毒的传播和流行特点第13页
       ·猪细小病毒感染相关诊断技术第13-15页
     ·猪圆环病毒2型简介及其检测方法研究进展第15-18页
       ·猪圆环病毒2型的发现与分类地位第15页
       ·猪圆环病毒的形态和理化特征第15-16页
       ·猪圆环病毒的分子生物学特征第16-17页
       ·猪圆环病毒2型的传播第17页
       ·猪圆环病毒2型的流行第17页
       ·猪圆环病毒2型感染相关诊断技术第17-18页
   ·猪病常用核酸诊断技术简介第18-20页
     ·环介导等温扩增技术第19-20页
     ·实时荧光定量PCR技术第20页
   ·研究的目的和意义第20-21页
   ·创新点与先进性第21-22页
   ·技术路线第22-25页
     ·研制PPV LAMP检测试剂盒技术路线第22-23页
     ·研制PCV2 LAMP检测试剂盒技术路线第23-24页
     ·研制PCV2荧光定量PCR检测试剂盒技术路线第24-25页
第2章 猪细小病毒LAMP可视化快速检测试剂盒的研制及应用第25-44页
   ·材料第25-27页
     ·病毒来源第25-26页
     ·引物第26页
     ·主要试剂(盒)第26页
     ·主要仪器和设备第26-27页
   ·方法第27-36页
     ·培养基及溶液的配制第27页
     ·猪细小病毒DNA的提取第27-28页
     ·普通PCR反应体系第28页
     ·PCR产物的克隆与测序检测第28-31页
       ·胶回收第28-29页
       ·胶回收后的产物检测第29-30页
       ·连接反应体系第30页
       ·转化第30页
       ·PCR方法鉴定阳性克隆第30页
       ·阳性克隆菌液扩大培养第30页
       ·测序第30-31页
     ·标准品阳性质粒模板的制备第31-32页
     ·PPV LAMP检测方法的建立第32-34页
     ·PPV LAMP可视化试验第34页
     ·PPV LAMP试剂盒的组装第34-35页
     ·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的灵敏度试验第35页
     ·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的特异性试验第35页
     ·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的稳定性试验第35-36页
     ·PPV LAMP可视化快速检测试剂盒的应用第36页
   ·结果与分析第36-42页
     ·PPV的PCR扩增产物的检测第36页
     ·PCR产物的克隆与测序检测第36-38页
       ·PCR胶回收产物第36-37页
       ·克隆产物的检测第37页
       ·测序结果第37-38页
     ·反应条件的优化第38-40页
     ·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的灵敏度试验第40-41页
     ·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的特异性试验第41页
     ·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的稳定性试验第41页
     ·PPV LAMP反应可视化结果的判定第41-42页
     ·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的临床样品检测第42页
   ·讨论第42-44页
第3章 猪圆环病毒2型LAMP可视化快速检测试剂盒的研制及应用第44-56页
   ·材料第44-45页
     ·病毒来源第44页
     ·引物第44-45页
     ·主要试剂第45页
   ·方法第45-50页
     ·病毒标准阳性质粒模板的制备第45页
     ·PCV2 LAMP检测方法的建立第45-46页
     ·PCV2 LAMP可视化试验第46-48页
     ·PCV2 LAMP试剂盒的组装第48-49页
     ·猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒的灵敏度试验第49页
     ·猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒的特异性试验第49页
     ·猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒的稳定性试验第49页
     ·PCV2 LAMP可视化快速检测试剂盒的应用第49-50页
   ·结果与分析第50-54页
     ·优化的LAMP反应体系和反应条件第50-51页
     ·PCV2 LAMP可视化快速检测试剂盒的研制第51页
     ·PCV2 LAMP可视化快速检测试剂盒的灵敏度实验第51-52页
     ·PCV2 LAMP可视化快速检测试剂盒的特异性试验第52-53页
     ·猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒的稳定性试验第53页
     ·PCV2 LAMP反应可视化结果的判定第53-54页
     ·猪圆环病毒2型LAMP可视化快速检测试剂盒的临床样品检测第54页
   ·讨论第54-56页
第4章 猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测试剂盒的研制及应用第56-68页
   ·材料第56-57页
     ·病毒来源第56-57页
     ·引物第57页
     ·主要试剂第57页
   ·方法第57-61页
     ·标准品浓度的计算第57页
     ·实时荧光定量PCR检测方法的建立第57-59页
     ·标准曲线的建立第59页
     ·PCV2荧光定量PCR定量检测试剂盒的组装和说明书第59-61页
     ·PCV2的荧光定量PCR检测试剂盒特异性试验第61页
     ·PCV2的荧光定量PCR检测试剂盒灵敏度试验第61页
     ·PCV2的荧光定量PCR检测试剂盒重复性试验第61页
     ·临床样品检测第61页
     ·PCV2荧光定量PCR检测试剂盒的应用第61页
   ·结果与分析第61-66页
     ·实时荧光定量PCR检测方法的建立第61-62页
     ·标准曲线的建立第62-63页
     ·PCV2荧光定量PCR检测试剂盒的研制第63页
     ·PCV2荧光定量PCR检测试剂盒的特异性试验第63-64页
     ·PCV2荧光定量PCR检测试剂盒的灵敏度试验第64-65页
     ·PCV2的荧光定量PCR检测试剂盒重复性试验第65-66页
     ·PCV2的荧光定量PCR检测试剂盒的临床样品检测第66页
   ·讨论第66-68页
第5章 全文总结第68-69页
参考文献第69-75页
攻读学位期间取得的研究成果第75-76页
致谢第76-77页

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