摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
第1章 绪论 | 第12-25页 |
·猪主要DNA病毒及其检测方法简介 | 第12-18页 |
·猪细小病毒简介及其检测方法研究进展 | 第12-15页 |
·猪细小病毒的危害及发现 | 第12页 |
·猪细小病毒的特点 | 第12页 |
·猪细小病毒基因的表达 | 第12-13页 |
·猪细小病毒的传播和流行特点 | 第13页 |
·猪细小病毒感染相关诊断技术 | 第13-15页 |
·猪圆环病毒2型简介及其检测方法研究进展 | 第15-18页 |
·猪圆环病毒2型的发现与分类地位 | 第15页 |
·猪圆环病毒的形态和理化特征 | 第15-16页 |
·猪圆环病毒的分子生物学特征 | 第16-17页 |
·猪圆环病毒2型的传播 | 第17页 |
·猪圆环病毒2型的流行 | 第17页 |
·猪圆环病毒2型感染相关诊断技术 | 第17-18页 |
·猪病常用核酸诊断技术简介 | 第18-20页 |
·环介导等温扩增技术 | 第19-20页 |
·实时荧光定量PCR技术 | 第20页 |
·研究的目的和意义 | 第20-21页 |
·创新点与先进性 | 第21-22页 |
·技术路线 | 第22-25页 |
·研制PPV LAMP检测试剂盒技术路线 | 第22-23页 |
·研制PCV2 LAMP检测试剂盒技术路线 | 第23-24页 |
·研制PCV2荧光定量PCR检测试剂盒技术路线 | 第24-25页 |
第2章 猪细小病毒LAMP可视化快速检测试剂盒的研制及应用 | 第25-44页 |
·材料 | 第25-27页 |
·病毒来源 | 第25-26页 |
·引物 | 第26页 |
·主要试剂(盒) | 第26页 |
·主要仪器和设备 | 第26-27页 |
·方法 | 第27-36页 |
·培养基及溶液的配制 | 第27页 |
·猪细小病毒DNA的提取 | 第27-28页 |
·普通PCR反应体系 | 第28页 |
·PCR产物的克隆与测序检测 | 第28-31页 |
·胶回收 | 第28-29页 |
·胶回收后的产物检测 | 第29-30页 |
·连接反应体系 | 第30页 |
·转化 | 第30页 |
·PCR方法鉴定阳性克隆 | 第30页 |
·阳性克隆菌液扩大培养 | 第30页 |
·测序 | 第30-31页 |
·标准品阳性质粒模板的制备 | 第31-32页 |
·PPV LAMP检测方法的建立 | 第32-34页 |
·PPV LAMP可视化试验 | 第34页 |
·PPV LAMP试剂盒的组装 | 第34-35页 |
·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的灵敏度试验 | 第35页 |
·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的特异性试验 | 第35页 |
·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的稳定性试验 | 第35-36页 |
·PPV LAMP可视化快速检测试剂盒的应用 | 第36页 |
·结果与分析 | 第36-42页 |
·PPV的PCR扩增产物的检测 | 第36页 |
·PCR产物的克隆与测序检测 | 第36-38页 |
·PCR胶回收产物 | 第36-37页 |
·克隆产物的检测 | 第37页 |
·测序结果 | 第37-38页 |
·反应条件的优化 | 第38-40页 |
·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的灵敏度试验 | 第40-41页 |
·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的特异性试验 | 第41页 |
·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的稳定性试验 | 第41页 |
·PPV LAMP反应可视化结果的判定 | 第41-42页 |
·猪细小病毒LAMP检测试剂盒的临床样品检测 | 第42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
第3章 猪圆环病毒2型LAMP可视化快速检测试剂盒的研制及应用 | 第44-56页 |
·材料 | 第44-45页 |
·病毒来源 | 第44页 |
·引物 | 第44-45页 |
·主要试剂 | 第45页 |
·方法 | 第45-50页 |
·病毒标准阳性质粒模板的制备 | 第45页 |
·PCV2 LAMP检测方法的建立 | 第45-46页 |
·PCV2 LAMP可视化试验 | 第46-48页 |
·PCV2 LAMP试剂盒的组装 | 第48-49页 |
·猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒的灵敏度试验 | 第49页 |
·猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒的特异性试验 | 第49页 |
·猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒的稳定性试验 | 第49页 |
·PCV2 LAMP可视化快速检测试剂盒的应用 | 第49-50页 |
·结果与分析 | 第50-54页 |
·优化的LAMP反应体系和反应条件 | 第50-51页 |
·PCV2 LAMP可视化快速检测试剂盒的研制 | 第51页 |
·PCV2 LAMP可视化快速检测试剂盒的灵敏度实验 | 第51-52页 |
·PCV2 LAMP可视化快速检测试剂盒的特异性试验 | 第52-53页 |
·猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒的稳定性试验 | 第53页 |
·PCV2 LAMP反应可视化结果的判定 | 第53-54页 |
·猪圆环病毒2型LAMP可视化快速检测试剂盒的临床样品检测 | 第54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第4章 猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测试剂盒的研制及应用 | 第56-68页 |
·材料 | 第56-57页 |
·病毒来源 | 第56-57页 |
·引物 | 第57页 |
·主要试剂 | 第57页 |
·方法 | 第57-61页 |
·标准品浓度的计算 | 第57页 |
·实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第57-59页 |
·标准曲线的建立 | 第59页 |
·PCV2荧光定量PCR定量检测试剂盒的组装和说明书 | 第59-61页 |
·PCV2的荧光定量PCR检测试剂盒特异性试验 | 第61页 |
·PCV2的荧光定量PCR检测试剂盒灵敏度试验 | 第61页 |
·PCV2的荧光定量PCR检测试剂盒重复性试验 | 第61页 |
·临床样品检测 | 第61页 |
·PCV2荧光定量PCR检测试剂盒的应用 | 第61页 |
·结果与分析 | 第61-66页 |
·实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第61-62页 |
·标准曲线的建立 | 第62-63页 |
·PCV2荧光定量PCR检测试剂盒的研制 | 第63页 |
·PCV2荧光定量PCR检测试剂盒的特异性试验 | 第63-64页 |
·PCV2荧光定量PCR检测试剂盒的灵敏度试验 | 第64-65页 |
·PCV2的荧光定量PCR检测试剂盒重复性试验 | 第65-66页 |
·PCV2的荧光定量PCR检测试剂盒的临床样品检测 | 第66页 |
·讨论 | 第66-68页 |
第5章 全文总结 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-75页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |