| 符号说明 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 前言 | 第16-30页 |
| ·“木桶原理” | 第16-17页 |
| ·泌乳反刍动物氨基酸的代谢 | 第17-23页 |
| ·PDV组织中的代谢 | 第17-18页 |
| ·肝脏组织中的代谢 | 第18-20页 |
| ·乳腺组织中的代谢 | 第20-23页 |
| ·乳腺对AA提取 | 第20-22页 |
| ·乳腺血流量 | 第22-23页 |
| ·泌乳对单一氨基酸的反应 | 第23-25页 |
| ·泌乳对补充单一氨基酸的反应 | 第23-24页 |
| ·泌乳对缺乏单一氨基酸的反应 | 第24-25页 |
| ·氨基酸作为信号因子调控蛋白合成 | 第25-28页 |
| ·必需氨基酸影响eIF2α磷酸化 | 第26-27页 |
| ·必需氨基酸影响 4eBP1磷酸化和eIF4F组装 | 第27页 |
| ·氨基酸调控帽端mRNA翻译 | 第27-28页 |
| ·研究目的意义及研究内容 | 第28-30页 |
| 材料与方法 | 第30-52页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·牛乳腺上皮细胞系 | 第30页 |
| ·泌乳小鼠 | 第30页 |
| ·试验设计 | 第30-37页 |
| ·单一EAA对牛乳腺上皮细胞中调控乳蛋白合成信号途径的影响 | 第30-31页 |
| ·不同浓度EAA对牛乳腺上皮细胞中调控乳蛋白合成关键信号蛋白的影响 | 第31-32页 |
| ·Met、Leu、Ile、Val对乳腺上皮细胞调控蛋白合成信号通路的影响 | 第32-33页 |
| ·蛋白质缺乏泌乳小鼠模型的建立 | 第33-34页 |
| ·试验处理 | 第33-34页 |
| ·样品采集及测定指标 | 第34页 |
| ·单一EAA（Leu、Ile、Met、Thr）对泌乳小鼠乳蛋白合成的影响 | 第34-36页 |
| ·试验处理 | 第34-35页 |
| ·样品采集及测定指标 | 第35-36页 |
| ·Met、Leu诱导内分泌变化对泌乳的影响 | 第36-37页 |
| ·试验处理 | 第36-37页 |
| ·样品采集及测定指标 | 第37页 |
| ·试验试剂与主要仪器 | 第37-41页 |
| ·试验方法 | 第41-50页 |
| ·MAC-T培养方法 | 第41页 |
| ·RNA提取与纯度鉴定 | 第41-42页 |
| ·cDNA的合成 | 第42页 |
| ·实时荧光相对定量 | 第42-44页 |
| ·RNA-Seq | 第44-48页 |
| ·RNA-Seq实验步骤 | 第44-45页 |
| ·信息分析流程 | 第45页 |
| ·基因表达定量 | 第45-46页 |
| ·差异基因筛选 | 第46-47页 |
| ·GO分析 | 第47-48页 |
| ·组织和细胞蛋白的提取 | 第48页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第48页 |
| ·蛋白变性 | 第48页 |
| ·Western Blotting | 第48-49页 |
| ·石蜡切片免疫荧光实验步骤 | 第49-50页 |
| ·数据处理与统计 | 第50-52页 |
| 结果与分析 | 第52-75页 |
| ·单一EAA对牛乳腺上皮细胞系中调控蛋白合成信号通路的影响 | 第52-54页 |
| ·单一EAA对牛乳腺上皮细胞中mTOR、4eBP1及S6K1磷酸化的影响 | 第52-53页 |
| ·单一EAA对牛乳腺上皮细胞中eEF2和eIF2α磷酸化的影响 | 第53-54页 |
| ·不同浓度EAA对牛乳腺上皮细胞中调控蛋白合成信号蛋白敏感性研究 | 第54-55页 |
| ·不同浓度EAA对牛乳腺上皮细胞中mTOR、4eBP1及S6K1磷酸化的影响 | 第54-55页 |
| ·不同浓度EAA对乳腺上皮细胞中eEF2和eIF2α磷酸化的影响 | 第55页 |
| ·Met、Leu、Ile和Val对牛乳腺上皮细胞调控蛋白合成信号通路的影响 | 第55-56页 |
| ·不同蛋白水平对泌乳小鼠乳蛋白合成的影响 | 第56-58页 |
| ·不同蛋白水平对小鼠窝增重和食仔率的影响 | 第56-58页 |
| ·不同蛋白水平对泌乳小鼠乳腺中信号蛋白的影响 | 第58页 |
| ·单一EAA（Met、Leu、Ile、Thr）对泌乳小鼠乳蛋白合成的影响 | 第58-66页 |
| ·Met、Leu、Ile和Thr对小鼠采食量和窝增重的影响 | 第58-59页 |
| ·Met、Leu、Ile和Thr对泌乳小鼠血液生化指标的影响 | 第59-60页 |
| ·Met、Leu、Ile和Thr对泌乳小鼠激素水平的影响 | 第60页 |
| ·Met、Leu、Ile和Thr对泌乳小鼠血浆氨基酸组成的影响 | 第60-61页 |
| ·Met、Leu、Ile和Thr对泌乳小鼠肌肉组织中蛋白代谢相关基因表达的影响 | 第61-62页 |
| ·Met、Leu、Ile和Thr对泌乳小鼠肌肉组织中蛋白合成相关信号通的影响 | 第62-63页 |
| ·Met、Leu、Ile和Thr对泌乳小鼠乳腺组织中蛋白代谢相关基因的表达的影响 | 第63页 |
| ·Met、Leu、Ile和Thr对泌乳小鼠乳腺组织中蛋白合成相关信号蛋白的影响 | 第63-64页 |
| ·Met、Leu、Ile和Thr对仔鼠增重和乳腺组织中信号蛋白相关性 | 第64-66页 |
| ·Met、Leu诱导内分泌变化对泌乳的影响 | 第66-75页 |
| ·Met、Leu对泌乳小鼠采食量和窝增重的影响 | 第66页 |
| ·Met、Leu对泌乳小鼠激素的影响 | 第66-68页 |
| ·Met、Leu对泌乳小鼠肝脏组织RNA-Seq | 第68-75页 |
| ·测序质量评估 | 第68页 |
| ·测序饱和度分析 | 第68-69页 |
| ·Met、Leu对泌乳小鼠肝脏中差异基因的筛选 | 第69页 |
| ·Met、Leu对泌乳小鼠肝脏中差异基因passway显著性富集分析 | 第69-73页 |
| ·测序结果可靠性验证 | 第73-74页 |
| ·Met、Leu对泌乳小鼠乳腺组织中Akt的影响 | 第74-75页 |
| 讨论 | 第75-80页 |
| ·信号蛋白与AA | 第75-76页 |
| ·GH、IGF-1 与AA | 第76-77页 |
| ·胰岛素、胰高血糖素与AA | 第77-78页 |
| ·乳蛋白与AA | 第78-80页 |
| 总体结论 | 第80-81页 |
| 研究创新点和研究展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 附件 | 第99-108页 |
