摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
英文缩略词表 | 第13-14页 |
前言 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-27页 |
1 结核病的流行情况 | 第15-17页 |
·人结核病的流行情况与现状 | 第15-16页 |
·牛结核病的流行现状与趋势 | 第16-17页 |
2 结核病的发病率大幅上升的原因 | 第17-19页 |
·HIV与TB的双重感染 | 第17-18页 |
·耐多药结核分枝杆菌的散播 | 第18页 |
·BCG免疫效果降低 | 第18-19页 |
·人.的大规模流动 | 第19页 |
·诊断方法落后、耗费大 | 第19页 |
3 结核病的实验室诊断技术 | 第19-27页 |
·细菌学诊断新技术 | 第19-21页 |
·以涂片为基础的诊断技术 | 第19-20页 |
·以培养为基础的诊断新技术 | 第20-21页 |
·免疫学诊断 | 第21-23页 |
·结核菌素皮肤实验(TST) | 第21页 |
·淋巴细胞分泌抗体的(ALS)检测 | 第21-22页 |
·γ–干扰素检测(IGRA) | 第22页 |
·隐性结核感染的Quanti FERON血液学检测 | 第22-23页 |
·ELISpot即酶联免疫斑点法 | 第23页 |
·分子生物学诊断 | 第23-27页 |
·聚合酶链反应(PCR) | 第23页 |
·直接测序技术 | 第23页 |
·基因芯片技术 | 第23-24页 |
·Xpert MTB/RIF检测技术 | 第24页 |
·环介导恒温扩增技术 | 第24页 |
·RNA扩增技术 | 第24-27页 |
第二章 实验部分 | 第27-60页 |
实验一 环介导等温扩增法对结核分枝杆菌检测条件的优化 | 第27-36页 |
摘要 | 第27页 |
1 材料与方法 | 第27-30页 |
·材料 | 第27-28页 |
·菌株 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28页 |
·方法 | 第28-30页 |
·细菌培养以及DNA模板的制备 | 第28页 |
·PCR检测 | 第28页 |
·LAMP实验的引物 | 第28-29页 |
·LAMP反应体系与反应条件 | 第29页 |
·LAMP检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性 | 第29页 |
·人工人工阳性乳中结核分枝杆菌基因组DNA的提取方法比较 | 第29-30页 |
·LAMP检测结核分枝杆菌人工阳性乳的最低检测浓度 | 第30页 |
2 结果 | 第30-34页 |
·LAMP检测方法的建立 | 第30页 |
·LAMP反应体系与反应程序的优化 | 第30-31页 |
·LAMP扩增技术灵敏度的检测 | 第31页 |
·LAMP特异性实验 | 第31-32页 |
·人工人工阳性乳中结核分枝杆菌DNA的提取 | 第32-33页 |
·人工人工阳性乳中LAMP的最低检测浓度 | 第33-34页 |
3 讨论 | 第34-35页 |
4 小结 | 第35-36页 |
实验二 RNA恒温扩增实时检测技术检测牛奶中结核分枝杆菌的研究 | 第36-50页 |
摘要 | 第36页 |
1 材料和方法 | 第36-42页 |
·材料 | 第36-39页 |
·实验菌株 | 第36-37页 |
·主要仪器设备 | 第37页 |
·实验用培养基和实验重要试剂的配制 | 第37-39页 |
·方法 | 第39-42页 |
·无菌牛奶的制备 | 第39页 |
·结核分枝杆菌菌悬液的制备 | 第39页 |
·模板的制备 | 第39-40页 |
·SAT检测 | 第40页 |
·SAT反应体系的优化 | 第40页 |
·SAT特异性、敏感性、重复性的检测 | 第40-41页 |
·人工阳性乳的制备 | 第41页 |
·人工阳性乳中结核分枝杆菌总RNA提取 | 第41-42页 |
·SAT检测结核分枝杆菌人工阳性乳特异性实验 | 第42页 |
·SAT检测结核分枝杆菌人工阳性乳敏感性实验 | 第42页 |
·SAT检测结核分枝杆菌人工阳性乳重复性实验 | 第42页 |
2. 结果 | 第42-47页 |
·SAT检测的优化结果 | 第42页 |
·SAT特异性实验结果 | 第42-43页 |
·敏感性实验的检测结果 | 第43-44页 |
·重复性实验结果 | 第44页 |
·对人工阳性乳的检测结果 | 第44-47页 |
·人工阳性乳模板的制备 | 第44-46页 |
·人工阳性乳模板SAT扩增结果 | 第46页 |
·人工阳性乳的SAT特异性实验结果 | 第46-47页 |
·人工阳性乳的SAT敏感性实验结果 | 第47页 |
·人工阳性乳的SAT重复性实验结果 | 第47页 |
3 讨论 | 第47-48页 |
4 小结 | 第48-50页 |
实验三 几种不同检测牛奶中结核分枝杆菌方法的比较 | 第50-60页 |
摘要 | 第50页 |
1 材料与方法 | 第50-53页 |
·材料 | 第50-51页 |
·实验菌株 | 第50页 |
·主要实验仪器与设备 | 第50-51页 |
·主要试剂的配制 | 第51页 |
·方法 | 第51-53页 |
·菌悬液的制备 | 第51-52页 |
·人工阳性乳的制备 | 第52页 |
·罗氏培养法检测 | 第52页 |
·抗酸染色镜检 | 第52页 |
·PCR法检测 | 第52-53页 |
·LAMP法检测 | 第53页 |
·SAT法 | 第53页 |
·比较五种检测方法检测结果 | 第53页 |
2 结果 | 第53-58页 |
·罗氏培养法检测人工阳性乳中结核分枝杆菌的结果 | 第53-54页 |
·抗酸染色镜检人工阳性乳中结核分枝杆菌的结果 | 第54-55页 |
·PCR检测人工阳性乳中结核分枝杆菌的结果 | 第55页 |
·LAMP法扩增检测结核分枝杆菌人工阳性乳的结果 | 第55-56页 |
·SAT法检测人工阳性乳中结核分枝杆菌的结果 | 第56-57页 |
·评价分析几种检测方法的结果 | 第57-58页 |
3 讨论 | 第58-59页 |
4 小结 | 第59-60页 |
创新点 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简介 | 第68-69页 |
导师评阅表 | 第69页 |