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核酸恒温扩增技术检测结核分枝杆菌的比较研究

摘要第1-8页
Abstract第8-13页
英文缩略词表第13-14页
前言第14-15页
第一章 文献综述第15-27页
 1 结核病的流行情况第15-17页
   ·人结核病的流行情况与现状第15-16页
   ·牛结核病的流行现状与趋势第16-17页
 2 结核病的发病率大幅上升的原因第17-19页
   ·HIV与TB的双重感染第17-18页
   ·耐多药结核分枝杆菌的散播第18页
   ·BCG免疫效果降低第18-19页
   ·人.的大规模流动第19页
   ·诊断方法落后、耗费大第19页
 3 结核病的实验室诊断技术第19-27页
   ·细菌学诊断新技术第19-21页
     ·以涂片为基础的诊断技术第19-20页
     ·以培养为基础的诊断新技术第20-21页
   ·免疫学诊断第21-23页
     ·结核菌素皮肤实验(TST)第21页
     ·淋巴细胞分泌抗体的(ALS)检测第21-22页
     ·γ–干扰素检测(IGRA)第22页
     ·隐性结核感染的Quanti FERON血液学检测第22-23页
     ·ELISpot即酶联免疫斑点法第23页
   ·分子生物学诊断第23-27页
     ·聚合酶链反应(PCR)第23页
     ·直接测序技术第23页
     ·基因芯片技术第23-24页
     ·Xpert MTB/RIF检测技术第24页
     ·环介导恒温扩增技术第24页
     ·RNA扩增技术第24-27页
第二章 实验部分第27-60页
 实验一 环介导等温扩增法对结核分枝杆菌检测条件的优化第27-36页
  摘要第27页
  1 材料与方法第27-30页
   ·材料第27-28页
     ·菌株第28页
     ·主要试剂第28页
   ·方法第28-30页
     ·细菌培养以及DNA模板的制备第28页
     ·PCR检测第28页
     ·LAMP实验的引物第28-29页
     ·LAMP反应体系与反应条件第29页
     ·LAMP检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性第29页
     ·人工人工阳性乳中结核分枝杆菌基因组DNA的提取方法比较第29-30页
     ·LAMP检测结核分枝杆菌人工阳性乳的最低检测浓度第30页
  2 结果第30-34页
   ·LAMP检测方法的建立第30页
   ·LAMP反应体系与反应程序的优化第30-31页
   ·LAMP扩增技术灵敏度的检测第31页
   ·LAMP特异性实验第31-32页
   ·人工人工阳性乳中结核分枝杆菌DNA的提取第32-33页
   ·人工人工阳性乳中LAMP的最低检测浓度第33-34页
  3 讨论第34-35页
  4 小结第35-36页
 实验二 RNA恒温扩增实时检测技术检测牛奶中结核分枝杆菌的研究第36-50页
  摘要第36页
  1 材料和方法第36-42页
   ·材料第36-39页
     ·实验菌株第36-37页
     ·主要仪器设备第37页
     ·实验用培养基和实验重要试剂的配制第37-39页
   ·方法第39-42页
     ·无菌牛奶的制备第39页
     ·结核分枝杆菌菌悬液的制备第39页
     ·模板的制备第39-40页
     ·SAT检测第40页
     ·SAT反应体系的优化第40页
     ·SAT特异性、敏感性、重复性的检测第40-41页
     ·人工阳性乳的制备第41页
     ·人工阳性乳中结核分枝杆菌总RNA提取第41-42页
     ·SAT检测结核分枝杆菌人工阳性乳特异性实验第42页
     ·SAT检测结核分枝杆菌人工阳性乳敏感性实验第42页
     ·SAT检测结核分枝杆菌人工阳性乳重复性实验第42页
  2. 结果第42-47页
   ·SAT检测的优化结果第42页
   ·SAT特异性实验结果第42-43页
   ·敏感性实验的检测结果第43-44页
   ·重复性实验结果第44页
   ·对人工阳性乳的检测结果第44-47页
     ·人工阳性乳模板的制备第44-46页
     ·人工阳性乳模板SAT扩增结果第46页
     ·人工阳性乳的SAT特异性实验结果第46-47页
     ·人工阳性乳的SAT敏感性实验结果第47页
     ·人工阳性乳的SAT重复性实验结果第47页
  3 讨论第47-48页
  4 小结第48-50页
 实验三 几种不同检测牛奶中结核分枝杆菌方法的比较第50-60页
  摘要第50页
  1 材料与方法第50-53页
   ·材料第50-51页
     ·实验菌株第50页
     ·主要实验仪器与设备第50-51页
     ·主要试剂的配制第51页
   ·方法第51-53页
     ·菌悬液的制备第51-52页
     ·人工阳性乳的制备第52页
     ·罗氏培养法检测第52页
     ·抗酸染色镜检第52页
     ·PCR法检测第52-53页
     ·LAMP法检测第53页
     ·SAT法第53页
     ·比较五种检测方法检测结果第53页
  2 结果第53-58页
   ·罗氏培养法检测人工阳性乳中结核分枝杆菌的结果第53-54页
   ·抗酸染色镜检人工阳性乳中结核分枝杆菌的结果第54-55页
   ·PCR检测人工阳性乳中结核分枝杆菌的结果第55页
   ·LAMP法扩增检测结核分枝杆菌人工阳性乳的结果第55-56页
   ·SAT法检测人工阳性乳中结核分枝杆菌的结果第56-57页
   ·评价分析几种检测方法的结果第57-58页
  3 讨论第58-59页
  4 小结第59-60页
创新点第60-61页
参考文献第61-67页
致谢第67-68页
作者简介第68-69页
导师评阅表第69页

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