| 摘要 | 第1-8页 |
| Summary | 第8-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-35页 |
| 第一章 奶牛乳房炎的研究进展 | 第11-27页 |
| 1. 奶牛乳房炎的危害 | 第11-12页 |
| ·对奶牛养殖业的经济效益危害 | 第11页 |
| ·牛奶及乳制品的品质降低 | 第11-12页 |
| ·奶牛的产奶年限缩短 | 第12页 |
| ·影响消费者的身体健康 | 第12页 |
| 2 奶牛乳房炎的病因 | 第12-15页 |
| ·病原微生物感染 | 第12-13页 |
| ·自身因素 | 第13-14页 |
| ·营养因素 | 第14页 |
| ·环境因素 | 第14-15页 |
| ·管理因素 | 第15页 |
| 3 乳房炎的分类和特征 | 第15-16页 |
| ·非临床型或亚临床型乳房炎 | 第16页 |
| ·临床型乳房炎 | 第16页 |
| ·传染性乳房炎和环境性乳房炎 | 第16页 |
| 4 乳房炎的诊断和检测方法 | 第16-19页 |
| ·乳汁病原微生物检查 | 第16-18页 |
| ·病原菌分离鉴定法 | 第16-17页 |
| ·核酸检测技术 | 第17页 |
| ·生物标记物检测技术 | 第17-18页 |
| ·乳汁体细胞计数 | 第18页 |
| ·乳汁导电性检测 | 第18页 |
| ·乳汁 pH 值检测 | 第18页 |
| ·乳成分检测法 | 第18-19页 |
| ·PCR 检测法 | 第19页 |
| 5 奶牛乳房炎的防治措施 | 第19-22页 |
| ·加强饲养管理 | 第19-20页 |
| ·建立完善的记录系统 | 第19页 |
| ·保持清洁的生活环境 | 第19页 |
| ·使用正确的挤奶程序 | 第19-20页 |
| ·配制全价优质奶牛日粮 | 第20页 |
| ·乳房炎的治疗方法 | 第20-21页 |
| ·疫苗防治 | 第21-22页 |
| ·中草药防治 | 第22页 |
| 参考文献 | 第22-27页 |
| 第二章 链球菌性乳房炎研究进展 | 第27-35页 |
| 1 链球菌性乳房炎的特性 | 第27-31页 |
| ·链球菌的基本特征 | 第27页 |
| ·链球菌性乳房炎的分类 | 第27-28页 |
| ·链球菌性乳房炎的流行病学 | 第28页 |
| ·链球菌致病机理 | 第28-31页 |
| ·溶血素 | 第29页 |
| ·致热外毒素 | 第29页 |
| ·CAMP 因子 | 第29-30页 |
| ·M 蛋白 | 第30页 |
| ·透明质酸酶 | 第30页 |
| ·溶纤维蛋白酶 | 第30页 |
| ·细胞壁 | 第30-31页 |
| 2 链球菌性疫苗的研究现状 | 第31页 |
| ·传统疫苗 | 第31页 |
| ·基因工程疫苗 | 第31页 |
| 参考文献 | 第31-35页 |
| 第二篇 实验研究 | 第35-74页 |
| 第三章 乳房炎患牛乳腺组织病理学观察 | 第35-39页 |
| 1 材料与方法 | 第35-36页 |
| ·仪器与设备 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·试验材料 | 第35页 |
| ·组织切片制备 | 第35-36页 |
| 2 结果 | 第36-37页 |
| ·正常组织切片观察 | 第36页 |
| ·病理组织切片观察 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 奶牛乳房炎病原菌分离鉴定及耐药性观察 | 第39-44页 |
| 1 材料与方法 | 第39-40页 |
| ·试验材料 | 第39页 |
| ·试验仪器 | 第39-40页 |
| ·试验方法 | 第40页 |
| ·形态学检查 | 第40页 |
| ·生化鉴定 | 第40页 |
| ·药敏试验 | 第40页 |
| 2 结果 | 第40-42页 |
| ·形态学染色结果 | 第40-41页 |
| ·生化试验结果 | 第41页 |
| ·药敏试验结果 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-44页 |
| 第五章 牛源无乳链球菌的分离及 PCR 鉴定 | 第44-51页 |
| 1. 材料与方法 | 第44-45页 |
| ·待检材料 | 第44页 |
| ·主要试剂及菌株 | 第44-45页 |
| 2. 方法 | 第45-46页 |
| ·无乳链球菌的分离 | 第45页 |
| ·细菌分子鉴定 | 第45页 |
| ·PCR 扩增片段的琼脂糖凝胶回收 | 第45-46页 |
| ·PCR 产物连接 T 载体 | 第46页 |
| ·转化大肠杆菌 DH5a 感受态细胞 | 第46页 |
| 3. 结果 | 第46-48页 |
| ·无乳链球菌分离结果 | 第46-47页 |
| ·无乳链球菌 DNA 提取结果 | 第47页 |
| ·16SrRNA 基因序列及系统发育分析 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第六章 无乳链球菌甘肃株 Sip 基因的遗传进化分析 | 第51-59页 |
| 1 材料与方法 | 第51-53页 |
| ·菌株和载体 | 第51页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第51-52页 |
| ·细菌总 DNA 提取 | 第52页 |
| ·引物设计与基因扩增 | 第52页 |
| ·目的基因的克隆 | 第52页 |
| ·sip 基因表达的蛋白质的预测分析 | 第52页 |
| ·系统进化分析 | 第52-53页 |
| 2 结果 | 第53-56页 |
| ·PCR 扩增 | 第53页 |
| ·B 细胞抗原表位预测 | 第53-55页 |
| ·遗传进化分析 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 第七章 无乳链球菌 Sip 基因的原核表达 | 第59-65页 |
| 1 材料与方法 | 第59-62页 |
| ·菌株与质粒 | 第59页 |
| ·实验仪器 | 第59页 |
| ·试剂 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-62页 |
| ·设计引物 | 第59-60页 |
| ·基因扩增 | 第60页 |
| ·基因扩增产物的回收 | 第60页 |
| ·基因与克隆载体的连接转化 | 第60页 |
| ·质粒的小量制备 | 第60-61页 |
| ·酶切鉴定 | 第61页 |
| ·无乳链球菌 sip 基因原核表达质粒及融合质粒的构建 | 第61-62页 |
| ·重组质粒 pGEM-T-sip 及表达载体质粒 pET-28a 的小量制备 | 第61页 |
| ·目的片段及表达载体质粒的酶切 | 第61页 |
| ·酶切目的片段及载体的回收、连接和转化 | 第61-62页 |
| ·重组菌株的诱导表达 | 第62页 |
| ·蛋白样的制备及蛋白电泳 | 第62页 |
| 2 结果 | 第62-64页 |
| ·Sip 基因重组质粒酶切结果 | 第63页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第63-64页 |
| ·Western- blot 检测表达产物结果 | 第64页 |
| 3 讨论 | 第64-65页 |
| 第八章 牛源性无乳链球菌 CAMP 因子的克隆及真核载体的构建 | 第65-74页 |
| 1 材料与方法 | 第65-66页 |
| ·待检材料 | 第65页 |
| ·菌株 | 第65页 |
| ·主要试剂和设备 | 第65-66页 |
| ·引物设计 | 第66页 |
| 2 方法 | 第66-67页 |
| ·无乳链球菌的快速分离 | 第66-67页 |
| ·无乳链球菌 cfb 基因的克隆测序 | 第67页 |
| ·无乳链球菌 cfb 基因序列分析 | 第67页 |
| ·无乳链球 CAMP 因子基因重组真核表达质粒的构建 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-71页 |
| ·cfb 基因 PCR 鉴定 | 第67-68页 |
| ·无乳链球菌 cfb 基因克隆和测序结果 | 第68页 |
| ·分离株无乳链球菌 cfb 基因序列分析结果 | 第68-70页 |
| ·无乳链球菌 cfb 基因真核表达载体的构建结果 | 第70-71页 |
| 4 讨论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 结论 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76-77页 |
| 导师简介 | 第77-78页 |
