| 摘要 | 第1-8页 |
| 文献综述 | 第8-18页 |
| 1 支原体和滑液支原体 | 第8-13页 |
| ·支原体 | 第8页 |
| ·滑液支原体 | 第8-13页 |
| 2 乳酸脱氢酶 | 第13-18页 |
| ·乳酸脱氢酶的分类及分布 | 第13-14页 |
| ·乳酸脱氢酶结构 | 第14-15页 |
| ·乳酸脱氢酶功能 | 第15-17页 |
| ·支原体乳酸脱氢酶 | 第17-18页 |
| 试验一 滑液支原体乳酸脱氢酶基因的克隆、表达、蛋白纯化及多抗的制备 | 第18-28页 |
| 1 材料和方法 | 第18-22页 |
| ·菌种、载体、抗体及实验动物 | 第18页 |
| ·仪器及设备 | 第18-19页 |
| ·试剂 | 第19-20页 |
| ·MS WVU 1853培养和鉴定 | 第20页 |
| ·LDH基因组的提取及序列测定 | 第20页 |
| ·LDH基因的克隆和重组载体的构建 | 第20-21页 |
| ·LDH基因的原核表达和蛋白纯化 | 第21页 |
| ·兔抗His-LDH多抗的制备及其免疫原性分析 | 第21-22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-26页 |
| ·MSWVU1853菌种鉴定和LDH基因的克隆 | 第22-24页 |
| ·乳酸脱氢酶基因表达及产物纯化 | 第24-25页 |
| ·His-LDH抗原滴定的确定 | 第25页 |
| ·His-LDH多抗的鉴定 | 第25-26页 |
| 3 讨论 | 第26-28页 |
| 试验二 滑液支原体乳酸脱氢酶促反应动力学的研究 | 第28-33页 |
| 1 材料和方法 | 第28-29页 |
| ·实验仪器 | 第28页 |
| ·实验试剂 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-31页 |
| ·His-LDH比活力的测定 | 第29-30页 |
| ·pH和温度对酶活的影响 | 第30-31页 |
| ·金属离子对His-LDH活性的影响 | 第31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| 试验三 滑液支原体乳酸脱氢酶亚细胞定位及生物学功能的研究 | 第33-41页 |
| 1 材料和方法 | 第33-37页 |
| ·菌种、抗原、抗体及细胞株 | 第33页 |
| ·实验仪器和耗材 | 第33-34页 |
| ·实验试剂 | 第34页 |
| ·滑液支原体膜蛋白的提取 | 第34-35页 |
| ·膜蛋白的Western-blot分析 | 第35页 |
| ·pIGN-1dh荧光表达菌粘附DF1细胞的间接免疫荧光试验 | 第35-36页 |
| ·His-LDH抗血清的体外补体杀菌试验 | 第36页 |
| ·His-LDH对MS WVU 1853粘附DF1及其粘附抑制试验 | 第36-37页 |
| 2 实验结果 | 第37-39页 |
| ·Western-blot对LDH的分析 | 第37页 |
| ·pIGN-1dh荧光表达菌粘附DF1细胞的间接免疫荧光试验 | 第37-38页 |
| ·His-LDH抗血清的体外补体杀菌试验 | 第38-39页 |
| ·His-LDH抗血清的粘附和粘附抑制试验 | 第39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| Abstract | 第48-50页 |
| 缩略语表 | 第50-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
