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禽类特异的IncRNA基因pouAC22的克隆、表达特性及其遗传变异研究

致谢第1-7页
摘要第7-9页
1 文献综述第9-17页
   ·lncRNA简介第9-11页
     ·lncRNA的发现第9页
     ·lncRNA的结构与分类第9-10页
     ·lncRNA的作用机制与功能第10页
     ·lncRNA的病理学意义第10-11页
     ·lncRNA存在的问题与展望第11页
   ·新基因的发现及研究第11-16页
     ·新基因序列的分析及研究第12页
       ·分子生物学途径第12页
       ·生物信息学分析第12页
     ·lncRNA的研究方法第12-13页
     ·实验技术简介第13-16页
   ·研究的目的和意义第16-17页
2 引言第17-18页
3 鸡pouAC22基因的全长克隆第18-31页
   ·材料方法第18页
     ·试验取样第18页
     ·主要试剂及溶液配置第18页
     ·引物设计与合成第18页
   ·试验方法第18-24页
     ·总RNA提取第18-19页
     ·pouAC22的5’RACE扩增第19-21页
     ·pouAC22的3'RACE扩增第21-22页
     ·反转录反应第22页
     ·普通PCR反应第22-23页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第23页
     ·胶回收第23页
     ·扩增片段的克隆测序第23-24页
   ·试验结果与分析第24-28页
     ·总RNA提取第24页
     ·RACE扩增第24-27页
     ·pouAC22基因的生物信息学分析第27-28页
   ·讨论与小结第28-31页
4 鸡pouAC22基因的表达特性分析第31-39页
   ·试验材料第31页
     ·试验动物与来源第31页
     ·样品的采集第31页
     ·试验主要试剂及溶液配制第31页
     ·试验仪器第31页
   ·试验方法第31-33页
     ·总RNA提取和反转录分别参照3.2.1和3.2.4第31页
     ·引物设计第31-32页
     ·荧光定量PCR反应操作步骤第32页
     ·数据处理第32-33页
   ·结果与分析第33-38页
     ·总RNA提取第33页
     ·pouAC22基因四种不同剪接体形式的表达分析第33页
     ·总pouAC22基因14胚龄组织表达谱分析第33-34页
     ·总pouAC22基因7日龄组织表达谱分析第34页
     ·总pouAC22基因不同生长阶段表达谱分析第34-36页
     ·pouAC22-4基因不同组织和不同生长阶段表达谱分析第36页
     ·不同油脂添加水平对pouAC22基因及其剪接体形式pouAC22-4表达情况的影响第36-38页
   ·结论与讨论第38-39页
5 鸡pouAC22多态性分析第39-48页
   ·试验材料第39页
     ·试验样品第39页
     ·血样采集第39页
     ·试验主要试剂第39页
     ·主要溶液配制和仪器第39页
   ·试验方法第39-42页
     ·基因组DNA的提取第39-40页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测DNA第40页
     ·DNA混池的构建第40-41页
     ·引物的设计和合成第41页
     ·引物稀释第41页
     ·PCR扩增第41页
     ·PCR产物的检测第41页
     ·酶切第41-42页
     ·酶切片段的检测第42页
     ·测序验证第42页
     ·统计分析第42页
   ·结果与分析第42-46页
     ·鸡pouAC22基因变异位点研究第42页
     ·鸡pouAC22基因个变异位点的基因型频率和等位基因频率在品种间的分布第42-43页
     ·鸡pouAC22基因变异位点单倍型构建与分析第43-45页
     ·PCR-RFLP检测A2020G变异在固始鸡资源群的分布第45-46页
     ·pouAC22基因型与资源群经部分济性状关联分析结果第46页
   ·讨论与结论第46-48页
6 总结第48-49页
参考文献第49-54页
ABSTRACT第54-56页
附录第56-61页

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