致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
1 文献综述 | 第9-17页 |
·lncRNA简介 | 第9-11页 |
·lncRNA的发现 | 第9页 |
·lncRNA的结构与分类 | 第9-10页 |
·lncRNA的作用机制与功能 | 第10页 |
·lncRNA的病理学意义 | 第10-11页 |
·lncRNA存在的问题与展望 | 第11页 |
·新基因的发现及研究 | 第11-16页 |
·新基因序列的分析及研究 | 第12页 |
·分子生物学途径 | 第12页 |
·生物信息学分析 | 第12页 |
·lncRNA的研究方法 | 第12-13页 |
·实验技术简介 | 第13-16页 |
·研究的目的和意义 | 第16-17页 |
2 引言 | 第17-18页 |
3 鸡pouAC22基因的全长克隆 | 第18-31页 |
·材料方法 | 第18页 |
·试验取样 | 第18页 |
·主要试剂及溶液配置 | 第18页 |
·引物设计与合成 | 第18页 |
·试验方法 | 第18-24页 |
·总RNA提取 | 第18-19页 |
·pouAC22的5’RACE扩增 | 第19-21页 |
·pouAC22的3'RACE扩增 | 第21-22页 |
·反转录反应 | 第22页 |
·普通PCR反应 | 第22-23页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第23页 |
·胶回收 | 第23页 |
·扩增片段的克隆测序 | 第23-24页 |
·试验结果与分析 | 第24-28页 |
·总RNA提取 | 第24页 |
·RACE扩增 | 第24-27页 |
·pouAC22基因的生物信息学分析 | 第27-28页 |
·讨论与小结 | 第28-31页 |
4 鸡pouAC22基因的表达特性分析 | 第31-39页 |
·试验材料 | 第31页 |
·试验动物与来源 | 第31页 |
·样品的采集 | 第31页 |
·试验主要试剂及溶液配制 | 第31页 |
·试验仪器 | 第31页 |
·试验方法 | 第31-33页 |
·总RNA提取和反转录分别参照3.2.1和3.2.4 | 第31页 |
·引物设计 | 第31-32页 |
·荧光定量PCR反应操作步骤 | 第32页 |
·数据处理 | 第32-33页 |
·结果与分析 | 第33-38页 |
·总RNA提取 | 第33页 |
·pouAC22基因四种不同剪接体形式的表达分析 | 第33页 |
·总pouAC22基因14胚龄组织表达谱分析 | 第33-34页 |
·总pouAC22基因7日龄组织表达谱分析 | 第34页 |
·总pouAC22基因不同生长阶段表达谱分析 | 第34-36页 |
·pouAC22-4基因不同组织和不同生长阶段表达谱分析 | 第36页 |
·不同油脂添加水平对pouAC22基因及其剪接体形式pouAC22-4表达情况的影响 | 第36-38页 |
·结论与讨论 | 第38-39页 |
5 鸡pouAC22多态性分析 | 第39-48页 |
·试验材料 | 第39页 |
·试验样品 | 第39页 |
·血样采集 | 第39页 |
·试验主要试剂 | 第39页 |
·主要溶液配制和仪器 | 第39页 |
·试验方法 | 第39-42页 |
·基因组DNA的提取 | 第39-40页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测DNA | 第40页 |
·DNA混池的构建 | 第40-41页 |
·引物的设计和合成 | 第41页 |
·引物稀释 | 第41页 |
·PCR扩增 | 第41页 |
·PCR产物的检测 | 第41页 |
·酶切 | 第41-42页 |
·酶切片段的检测 | 第42页 |
·测序验证 | 第42页 |
·统计分析 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-46页 |
·鸡pouAC22基因变异位点研究 | 第42页 |
·鸡pouAC22基因个变异位点的基因型频率和等位基因频率在品种间的分布 | 第42-43页 |
·鸡pouAC22基因变异位点单倍型构建与分析 | 第43-45页 |
·PCR-RFLP检测A2020G变异在固始鸡资源群的分布 | 第45-46页 |
·pouAC22基因型与资源群经部分济性状关联分析结果 | 第46页 |
·讨论与结论 | 第46-48页 |
6 总结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
ABSTRACT | 第54-56页 |
附录 | 第56-61页 |