| 目录 | 第1-8页 |
| CATALOGUE | 第8-12页 |
| 中文摘要 | 第12-17页 |
| ABSTRACT | 第17-25页 |
| 第一章 前言 | 第25-37页 |
| 1 胸腺五肽 | 第25-28页 |
| ·胸腺五肽的起源与发展 | 第25-26页 |
| ·胸腺五肽的结构与性质 | 第26页 |
| ·胸腺五肽的生物学功能 | 第26-27页 |
| ·胸腺五肽的临床应用 | 第27页 |
| ·胸腺五肽的受体研究 | 第27-28页 |
| 2 胸腺素α1 | 第28-33页 |
| ·胸腺素α1的起源与发展 | 第28页 |
| ·胸腺素α1的结构与性质 | 第28-29页 |
| ·胸腺素α1的生物学功能 | 第29-30页 |
| ·胸腺素α1的临床应用 | 第30-32页 |
| ·胸腺素α1的表达 | 第32页 |
| ·胸腺素α1的受体研究 | 第32-33页 |
| 3 胸腺五肽存在的问题及改进方法 | 第33-35页 |
| 4 本课题的设计思路及拟解决的问题 | 第35-37页 |
| 第二章 内含肽介导的Tα1-TP5表达及分离纯化 | 第37-64页 |
| 1 实验材料 | 第37-41页 |
| ·菌株及质粒 | 第37-38页 |
| ·试剂与材料 | 第38页 |
| ·仪器设备 | 第38-39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·溶液配制 | 第39-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-50页 |
| ·大肠杆菌表达质粒pTYB2-Tα1-TP5的构建 | 第41-42页 |
| ·目的基因的构建 | 第42-43页 |
| ·目的基因的克隆 | 第43-45页 |
| ·表达Tα1-TP5-Sce intein-CBD的大肠杆菌菌株构建 | 第45-46页 |
| ·Tα1-TP5-Sce intein-CBD在大肠杆菌中的诱导表达 | 第46-47页 |
| ·从细菌裂解上清中纯化Tα1-TP5融合肽 | 第47-48页 |
| ·从包涵体中纯化Tα1-TP5融合肽 | 第48-49页 |
| ·纯化样品Tα1-TP5的鉴定 | 第49-50页 |
| 3 实验结果 | 第50-60页 |
| ·DH5α阳性转化子的PCR筛选 | 第50页 |
| ·表达质粒pTYB2-Tα1-TP5的DNA测序验证 | 第50-51页 |
| ·阳性ER2566菌株的鉴定 | 第51-53页 |
| ·从细菌裂解上清中纯化Tα1-TP5融合肽 | 第53-54页 |
| ·从包涵体中纯化Tα1-TP5融合肽 | 第54-57页 |
| ·Superdex 30脱盐纯化Tα1-TP5 | 第57-59页 |
| ·Tα1-TP5的ESI-MS鉴定 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 第三章 胸腺融合肽Tα1-TP5体内外免疫调节活性的研究 | 第64-78页 |
| 1 实验材料 | 第64-66页 |
| ·试剂与材料 | 第64页 |
| ·仪器设备 | 第64-65页 |
| ·实验动物 | 第65页 |
| ·溶液配制 | 第65-66页 |
| 2 实验方法 | 第66-69页 |
| ·CCK-8法测定Tα1-TP5对小鼠脾淋巴细胞的作用 | 第66页 |
| ·流式细胞术检测Tα1-TP5对小鼠脾淋巴细胞CD69表达的作用 | 第66-67页 |
| ·RT-PCR检测Tα1-TP5对小鼠脾淋巴细胞IFN-r表达的作用 | 第67-68页 |
| ·Tα1-TP5对HC诱导的免疫抑制的影响 | 第68-69页 |
| 3 实验结果 | 第69-75页 |
| ·Tα1-TP5对小鼠脾淋巴细胞增殖影响 | 第69-70页 |
| ·Tα1-TP5对脾淋巴细胞表面CD69表达的作用 | 第70-71页 |
| ·Tα1-TP5对脾淋巴细胞IFN-γ表达的作用 | 第71页 |
| ·Tα1-TP5抵抗HC诱导的免疫抑制的作用 | 第71-75页 |
| 4 讨论 | 第75-77页 |
| 5 结论 | 第77-78页 |
| 第四章 Tα1-TP5辅助抗肿瘤作用研究 | 第78-90页 |
| 1 实验材料 | 第78-79页 |
| ·试剂与材料 | 第78页 |
| ·仪器设备 | 第78-79页 |
| ·实验动物 | 第79页 |
| ·溶液配制 | 第79页 |
| 2 实验方法 | 第79-81页 |
| ·Tα1-TP5体外对肿瘤细胞生长的抑制作用的研究 | 第79页 |
| ·Tα1-TP5体内联合CY抑制黑色素瘤生长的研究 | 第79-81页 |
| 3 实验结果 | 第81-87页 |
| ·Tα1-TP5体外对肿瘤细胞生长的抑制作用 | 第81-82页 |
| ·Tα1-TP5联合CY对肿瘤生长的抑制作用 | 第82-84页 |
| ·Tα1-TP5逆转CY诱导的白细胞数量减少的研究 | 第84页 |
| ·Tα1-TP5联合CY对肿瘤组织MHC I表达的影响 | 第84-85页 |
| ·Tα1-TP5联合CY对肿瘤组织中CD8~+T细胞浸润及CD86表达的影响 | 第85-87页 |
| 4 讨论 | 第87-89页 |
| 5 结论 | 第89-90页 |
| 第五章 Tα1-TP5与TLR2结合活性研究 | 第90-107页 |
| 1 实验材料 | 第90-92页 |
| ·试剂与材料 | 第90-91页 |
| ·仪器设备 | 第91页 |
| ·实验动物 | 第91页 |
| ·溶液配制 | 第91-92页 |
| 2 实验方法 | 第92-96页 |
| ·Tα1-TP5、TP5及Tα1的FITC标记 | 第92-93页 |
| ·BMDMs的分离及培养 | 第93页 |
| ·荧光显微镜观察多肽与BMDMs的结合 | 第93-94页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察多肽与BMDMs的结合 | 第94页 |
| ·SPR分析多肽与TLR2的结合性质研究 | 第94-96页 |
| 3 实验结果 | 第96-104页 |
| ·荧光显微镜观察Tα1-TP5与BMDMs的结合 | 第96-97页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察Tα1-TP5与BMDMs的结合 | 第97-98页 |
| ·SPR检测Tα1-TP5和TLR2的结合 | 第98-104页 |
| 4 讨论 | 第104-106页 |
| 5 结论 | 第106-107页 |
| 总结与展望 | 第107-109页 |
| 1 全文总结 | 第107页 |
| 2 创新点 | 第107-108页 |
| 3 展望 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-125页 |
| Article 1 | 第125-136页 |
| References | 第134-136页 |
| Article 2 | 第136-144页 |
| References | 第142-144页 |
| Article 3 | 第144-152页 |
| References | 第149-152页 |
| 致谢 | 第152-153页 |
| 博士期间发表的论文 | 第153-154页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第154页 |
