| 英文缩略一览表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一部分 外源性GDF15基因瞬时转入HepG2胞 | 第14-28页 |
| 1 材料 | 第14-16页 |
| ·细胞和菌株 | 第14-15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| 2 方法 | 第16-24页 |
| ·细胞培养 | 第16页 |
| ·重组GDF15质粒转化大肠杆菌 | 第16-17页 |
| ·重组GDF15质粒转染HepG2细胞 | 第17-18页 |
| ·RT-PCR检测转染效率 | 第18-21页 |
| ·Western blot检测转染效率 | 第21-23页 |
| ·MTT法检测瞬时转染对HepG2细胞生长的作用 | 第23页 |
| ·流式细胞仪检测HepG2细胞的周期 | 第23-24页 |
| ·统计学分析 | 第24页 |
| 3 结果 | 第24-27页 |
| ·重组GDF15质粒转化大肠杆菌 | 第24页 |
| ·mRNA检测 | 第24页 |
| ·蛋白水平检测 | 第24-25页 |
| ·瞬时转染对HepG2细胞增殖的影响 | 第25-26页 |
| ·瞬时转染对HepG2细胞周期的影响 | 第26-27页 |
| 4 讨论 | 第27页 |
| 5 小结 | 第27-28页 |
| 第二部分 稳定转染HepG2细胞株的建立 | 第28-47页 |
| 1 材料 | 第28-30页 |
| ·细胞和菌株 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·主要仪器 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-39页 |
| ·GDF15基因的扩增 | 第30-31页 |
| ·GDF15基因连入pEASY-Blunt T载体 | 第31-34页 |
| ·构建pLEX-MCS-GDF15质粒 | 第34-36页 |
| ·慢病毒的包装 | 第36-39页 |
| ·稳定转染HepG2细胞株的建立 | 第39页 |
| ·mRNA和蛋白水平检测GDF15基因的表达 | 第39页 |
| ·统计学分析 | 第39页 |
| 3 结果 | 第39-46页 |
| ·GDF15基因的扩增 | 第39-40页 |
| ·GDF15基因连入T载体 | 第40-43页 |
| ·构建含GDF15基因的pLEX-MCS-GDF15质粒 | 第43-45页 |
| ·筛选嘌呤霉素最低有效杀死浓度 | 第45页 |
| ·稳定转染细胞株GDF15基因的表达 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46页 |
| 5 小结 | 第46-47页 |
| 第三部分 稳定转染细胞株的生物学行为变化 | 第47-53页 |
| 1 材料 | 第47页 |
| ·细胞 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-49页 |
| ·细胞培养 | 第47-48页 |
| ·稳定转染细胞株的生长 | 第48页 |
| ·细胞体外迁移实验 | 第48页 |
| ·平板克隆形成实验 | 第48-49页 |
| ·统计学分析 | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-51页 |
| ·GDF15基因对细胞增殖的影响 | 第49页 |
| ·GDF15基因对细胞迁移的影响 | 第49-50页 |
| ·GDF15基因对细胞克隆形成的影响 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-52页 |
| 5 小结 | 第52-53页 |
| 第四部分 汉黄芩素对高表达细胞株生物学行为的影响 | 第53-59页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| ·细胞 | 第53页 |
| ·药物 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53-54页 |
| 2 方法 | 第54-55页 |
| ·细胞培养 | 第54页 |
| ·细胞体外增殖实验 | 第54页 |
| ·汉黄芩素对细胞迁移能力的影响 | 第54-55页 |
| ·平板克隆形成实验 | 第55页 |
| ·统计学分析 | 第55页 |
| 3 结果 | 第55-57页 |
| ·汉黄芩素对稳定转染细胞株生长的影响 | 第55-56页 |
| ·汉黄芩素对细胞迁移的影响 | 第56-57页 |
| ·汉黄芩素对克隆形成的影响 | 第57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 5 小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 文献综述 | 第64-70页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 个人简历 | 第70页 |
