| 本工作主要创新点 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 第一章 背景介绍 | 第14-38页 |
| 1 RNA干扰 | 第14-22页 |
| ·小RNA的分类 | 第14-15页 |
| ·siRNA的产生 | 第15页 |
| ·miRNA的产生 | 第15-17页 |
| ·RISC复合体 | 第17-19页 |
| ·siRNA下调基因表达 | 第19页 |
| ·miRNA下调基因表达 | 第19-21页 |
| ·miRNA上调基因表达 | 第21-22页 |
| 2 线粒体的介绍 | 第22-33页 |
| ·线粒体的结构 | 第23-26页 |
| ·线粒体的遗传学 | 第26-29页 |
| ·线粒体的分裂与融合 | 第29页 |
| ·线粒体起源 | 第29-31页 |
| ·线粒体功能 | 第31-33页 |
| 3 肌肉发育 | 第33-35页 |
| ·线粒体在肌肉发育中的作用 | 第33-34页 |
| ·miRNA在肌肉发育中的作用 | 第34-35页 |
| 4 线粒体中的非编码RNA | 第35-36页 |
| ·线粒体基因组编码潜在的非编码RNA | 第35-36页 |
| ·miRNA在线粒体中 | 第36页 |
| 5 本研究工作的主要内容 | 第36-38页 |
| 第二章 材料和方法 | 第38-74页 |
| 1. 实验材料 | 第38-51页 |
| ·菌株,细胞系,线虫品系及质粒 | 第38页 |
| ·主要生化试剂 | 第38-40页 |
| ·所用耗材 | 第40页 |
| ·细胞操作相关试剂 | 第40页 |
| ·酶类 | 第40-41页 |
| ·同位素相关 | 第41页 |
| ·RNA合成 | 第41-42页 |
| ·本研究所用引物 | 第42-44页 |
| ·分析软件及绘图软件 | 第44页 |
| ·仪器 | 第44-45页 |
| ·溶液的配制 | 第45-49页 |
| ·培养基 | 第49-50页 |
| ·抗体、染料和实际盒 | 第50-51页 |
| 2 实验方法 | 第51-74页 |
| ·化学转化 | 第51页 |
| ·大肠杆菌DH5 a化学转化感受态的制备 | 第51-52页 |
| ·细胞实验操作 | 第52-54页 |
| ·细胞复苏 | 第52页 |
| ·细胞传代 | 第52-54页 |
| ·肌肉细胞分化模型 | 第54页 |
| ·线虫的培养 | 第54-58页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第58页 |
| ·线粒体的分离与纯化 | 第58-59页 |
| ·线粒体功能检测 | 第59-60页 |
| ·使用BCA蛋白检测试剂盒检测蛋白浓度 | 第60页 |
| ·miRNA捕获靶标mRNA实验 | 第60-61页 |
| ·RNA提取(Trizol) | 第61页 |
| ·逆转录PCR | 第61-63页 |
| ·miRNA的检测 | 第63-66页 |
| ·miRACE miRNA靶基因鉴定方法 | 第66-69页 |
| ·Western Blot | 第69-71页 |
| ·紫外交联 | 第71页 |
| ·免疫共沉淀 | 第71页 |
| ·免疫荧光 | 第71-72页 |
| ·双荧光素酶报告系统 | 第72页 |
| ·生物信息学分析 | 第72-74页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第74-98页 |
| 1 ARGONAUTE2结合了众多线粒体MRNA | 第74-76页 |
| 2 sIRNA可以下调线粒体基因表达 | 第76-78页 |
| 3 MIR-320上调线粒体基因ND1的表达 | 第78-79页 |
| 4 MIRACE得出MIR-1的靶标基因部分是线粒体基因 | 第79-90页 |
| 5 人工设计的MIRNA也可以调控线粒体基因的表达 | 第90-92页 |
| 6 MIR-1在HELA细胞中对线粒体的影响 | 第92-93页 |
| 7 MIR-1在线虫中的作用 | 第93-98页 |
| 讨论 | 第98-101页 |
| 1 RNA干扰机器在线粒体中存在 | 第98页 |
| 2 siRNA下调线粒体内的基因表达 | 第98-99页 |
| 3 小RNA进入线粒体的机制 | 第99页 |
| 4 miRNA在线粒体内引起基因上调 | 第99-100页 |
| 5 miR-1和线粒体功能在肌肉分化过程中的重要性 | 第100-101页 |
| 研究工作总结与展望 | 第101-103页 |
| 附录1 | 第103-104页 |
| Reference | 第104-112页 |
| 攻博期间待发表的科研成果 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
