| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略语 | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| 1 昆虫滞育的研究进展 | 第13-16页 |
| ·昆虫滞育 | 第13-14页 |
| ·外界环境与昆虫滞育 | 第14页 |
| ·昆虫滞育的调控 | 第14-16页 |
| 2 滞育关联蛋白 | 第16-17页 |
| 3 眼色素结合蛋白研究进展 | 第17-18页 |
| ·眼色素 | 第17-18页 |
| ·眼色素结合蛋白 | 第18页 |
| 4 柞蚕滞育的研究 | 第18-19页 |
| 5 展望 | 第19-20页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第20-22页 |
| 1 研究目的与意义 | 第20页 |
| 2 实验内容 | 第20-21页 |
| 3 实验流程图 | 第21-22页 |
| 第三章 生物信息学分析 | 第22-28页 |
| 1 序列和生物信息学工具 | 第22页 |
| ·序列 | 第22页 |
| ·生物信息学工具 | 第22页 |
| 2 结果 | 第22-27页 |
| ·Ap-dap2 的基因序列 | 第22-23页 |
| ·AP-DAP2 蛋白的疏水性分析 | 第23-24页 |
| ·AP-DAP2 蛋白的跨膜区分析 | 第24页 |
| ·AP-DAP2 蛋白的信号肽分析 | 第24-25页 |
| ·AP-DAP2 蛋白亚细胞定位预测 | 第25页 |
| ·氨基酸序列比对 | 第25-26页 |
| ·AP-DAP2 蛋白三级结构预测 | 第26-27页 |
| 3 讨论 | 第27-28页 |
| 第四章 Ap-dap2 基因的原核表达纯化与抗体制备 | 第28-41页 |
| 1 材料和试剂 | 第28-30页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·试剂配制 | 第28-30页 |
| 2 方法 | 第30-36页 |
| ·Ap-dap2 基因的获得 | 第30-32页 |
| ·重组质粒的构建 | 第32-34页 |
| ·融合蛋白的表达与纯化 | 第34-35页 |
| ·DAP2 多克隆抗体的制备 | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-40页 |
| ·目的基因的扩增 | 第36-37页 |
| ·重组质粒 pET-28a-Ap-dap2 的鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达与纯化 | 第38页 |
| ·多克隆抗体特异性 Western blot 检测 | 第38-39页 |
| ·多克隆抗体的效价测定 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| 第五章 柞蚕 Ap-dap2 基因的表达谱分析 | 第41-53页 |
| 1 材料与试剂 | 第41页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·试剂配制 | 第41页 |
| 2 方法 | 第41-43页 |
| ·柞蚕各时期及五龄幼蚕各组织总 RNA 的提取 | 第41页 |
| ·DNase I 消化基因组 DNA | 第41-42页 |
| ·反转录生成第一链 cDNA | 第42页 |
| ·荧光定量 PCR 引物设计及荧光定量 PCR | 第42页 |
| ·荧光定量 PCR | 第42-43页 |
| ·定量 PCR 数据分析 | 第43页 |
| ·蛋白样品的提取 | 第43页 |
| ·AP-DAP2 表达分析 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-51页 |
| ·柞蚕滞育蛹发育时期 dap2-mRNA 水平的变化 | 第43-46页 |
| ·柞蚕不同发育时期 dap2-mRNA 水平的变化 | 第46-48页 |
| ·柞蚕发育过程中 Ap-dap2 蛋白表达量的变化 | 第48页 |
| ·五龄幼虫不同组织中 Ap-dap2 转录水平的比较 | 第48-50页 |
| ·五龄幼虫各组织中 AP-DAP2 蛋白表达水平分析 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 第六章 天然 AP-DAP2 的纯化 | 第53-64页 |
| 1 材料和试剂 | 第53-54页 |
| ·材料与仪器 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·主要试剂的配制 | 第53-54页 |
| 2 方法 | 第54-57页 |
| ·血淋巴的收集 | 第54页 |
| ·DAP2 蛋白的初步纯化 | 第54-55页 |
| ·分子筛纯化 DAP2 蛋白 | 第55页 |
| ·阴离子交换柱纯化 DAP2 蛋白 | 第55-56页 |
| ·利用抗体柱亲和层析纯化 DAP2 蛋白 | 第56-57页 |
| ·纯化后的 DAP2 蛋白的 SDS-PAGE 及 Western blot 鉴定 | 第57页 |
| 3 结果 | 第57-62页 |
| ·DAP2 蛋白的初步纯化 | 第57-58页 |
| ·分子筛纯化 DAP2 蛋白 | 第58-59页 |
| ·阴离子交换柱纯化 DAP2 蛋白 | 第59-60页 |
| ·亲和层析纯化 DAP2 蛋白 | 第60-61页 |
| ·纯化后 DAP2 蛋白的 SDS-PAGE 及 Western blot 检测 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 第七章 AP-DAP2 的分子特性的研究 | 第64-72页 |
| 1 材料和试剂 | 第64-65页 |
| ·材料与仪器 | 第64页 |
| ·试剂 | 第64页 |
| ·主要试剂的配制 | 第64-65页 |
| 2 方法 | 第65-68页 |
| ·DAP2 蛋白的全波长扫描 | 第65-66页 |
| ·DAP2 糖基化修饰分析 | 第66页 |
| ·双向电泳 | 第66-68页 |
| 3 结果 | 第68-70页 |
| ·DAP2 样品的全波长扫描 | 第68页 |
| ·DAP2 样品的糖基化分析 | 第68-69页 |
| ·DAP2 样品的双向电泳分析 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
