阪崎克罗诺杆菌毒力相关基因的筛选鉴定
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| ·阪崎克罗诺杆菌的简介 | 第8-12页 |
| ·阪崎克罗诺杆菌的分类 | 第8页 |
| ·阪崎克罗诺杆菌的生物学性状 | 第8-9页 |
| ·阪崎克罗诺杆菌的致病机制 | 第9-11页 |
| ·阪崎克罗诺杆菌的污染来源 | 第11页 |
| ·阪崎克罗诺杆菌的检测技术 | 第11-12页 |
| ·对阪崎克罗诺杆菌的控制 | 第12页 |
| ·抑制性消减杂交 | 第12-14页 |
| ·SSH的基本原理 | 第12页 |
| ·SSH的基本流程 | 第12-13页 |
| ·SSH的优缺点 | 第13-14页 |
| ·SSH的应用前景 | 第14页 |
| ·重叠延伸PCR | 第14-16页 |
| ·SOE PCR技术的基本原理 | 第14页 |
| ·SOE PCR技术的重叠互补引物的设计 | 第14页 |
| ·SOE PCR技术的应用 | 第14-16页 |
| ·SOE PCR技术的应用前景 | 第16页 |
| ·基因敲除技术 | 第16-19页 |
| ·基因敲除的基本原理 | 第16-17页 |
| ·基因敲除的应用 | 第17-18页 |
| ·基因敲除的常用技术 | 第18页 |
| ·基因敲除技术存在的问题 | 第18页 |
| ·基因敲除技术的应用前景 | 第18-19页 |
| ·研究目的及意义 | 第19页 |
| ·研究内容 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-36页 |
| ·实验材料 | 第20-22页 |
| ·实验菌株与载体 | 第20页 |
| ·主要试剂、溶液及培养基 | 第20-22页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-36页 |
| ·菌株活化 | 第22页 |
| ·阪崎克罗诺杆菌的毒性检测 | 第22-23页 |
| ·抑制性消减杂交 | 第23-25页 |
| ·差异基因克隆测序 | 第25-26页 |
| ·基因敲除 | 第26-33页 |
| ·基因敲除突变体的PCR验证 | 第33-34页 |
| ·利用致死时间检验突变株毒力变化 | 第34页 |
| ·利用LD_(50)检测突变株毒力变化 | 第34-36页 |
| 3 结果与讨论 | 第36-46页 |
| ·阪崎克罗诺杆菌毒力验证 | 第36页 |
| ·基因组差异基因的筛选 | 第36-37页 |
| ·差异基因的测序鉴定与分析 | 第37-38页 |
| ·重组酶质粒pKD20转化子的筛选 | 第38-39页 |
| ·重组片段的扩增 | 第39-42页 |
| ·重叠延伸扩增重组片段 | 第39-41页 |
| ·氯霉素抗性重组片段的扩增 | 第41页 |
| ·卡那霉素抗性重组片段的PCR扩增 | 第41-42页 |
| ·PCR筛选基因敲除克隆 | 第42-43页 |
| ·基因敲除突变株的PCR确认 | 第43-44页 |
| ·致死时间检测突变株毒力变化 | 第44-45页 |
| ·LD_(50)检测突变株毒力变化 | 第45-46页 |
| 4 结论 | 第46-47页 |
| 5 展望 | 第47-48页 |
| 6 参考文献 | 第48-54页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第54-55页 |
| 8 致谢 | 第55页 |
