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熏蒸剂对姜根际细菌群落结构的影响及姜内生细菌的多样性分析

中文摘要第1-12页
Abstract第12-14页
1 前言第14-37页
   ·生姜概述第14页
   ·生姜的常见病害及防治方法第14-18页
     ·生姜的常见病害第14-15页
       ·姜瘟病介绍第14-15页
       ·斑点病介绍第15页
       ·茎腐病介绍第15页
     ·防治方法第15-18页
       ·田间农作防治第15-16页
       ·发病后的药剂防治第16页
       ·化学防治第16-17页
       ·生物防治第17-18页
       ·综合防治第18页
   ·根际土壤微生物的研究概述第18-19页
   ·关于生姜微生物群落研究的展望第19页
   ·植物内生细菌第19-25页
     ·植物内生细菌的概念第19-20页
     ·内生细菌的分布特点第20-21页
     ·内生细菌的多样性以及分类第21-22页
       ·植物内生细菌的多样性第21页
       ·植物内生细菌的分类第21-22页
     ·植物内生细菌的生物学作用以及机制第22-25页
       ·内生细菌的生物学作用第22-23页
       ·内生细菌防止病害的机制第23页
       ·植物内生细菌的侵染和定殖第23-25页
   ·植物内生细菌的研究前景以及存在问题第25页
   ·生姜生长过程中的分泌物第25-26页
   ·细菌群落多样性分析的研究方法第26-30页
     ·PCR-DGGE第26-28页
       ·聚合酶链式反应(PCR)第26-27页
       ·变性梯度凝胶电泳(DGGE)第27-28页
     ·DGGE 的优越性与局限性第28-29页
     ·PCR-DGGE 技术在微生态研究中的应用第29-30页
   ·T-RFLP(Terminal restriction fragment length polymorphism)第30-31页
   ·16S rDNA 文库第31-34页
   ·内生细菌多样性的研究方法第34页
   ·ARDRA 分析方法第34-35页
   ·本实验的研究目的的意义第35-36页
   ·研究内容和技术路线第36-37页
     ·实验研究内容第36页
     ·技术路线第36-37页
2 材料和方法第37-50页
   ·生化试剂第37页
   ·主要仪器设备第37页
   ·样品的采集第37-38页
     ·土壤样品第37页
     ·植物组织样品第37-38页
     ·病原菌第38页
   ·主要溶液以及培养基的制备第38-41页
     ·培养基的配制第38-40页
       ·牛肉膏蛋白胨培养基第38页
       ·高氏培养基第38页
       ·马丁培养基第38-39页
       ·R2A 培养基第39页
       ·PDA 培养基第39-40页
       ·LB 培养基第40页
     ·主要溶液的配制第40-41页
       ·氨苄青霉素(Amp)溶液第40页
       ·X-Gal 贮液第40页
       ·IAA 鉴定和定量试剂第40页
       ·DNA 提取试剂第40-41页
       ·琼脂糖凝胶电泳试剂:第41页
       ·鲜姜汁的制备第41页
   ·PCR 引物第41页
   ·样品理化指标的测定第41-42页
   ·土壤样品总 DNA 提取以及 16S rDNA 的扩增第42页
     ·样品总 DNA 的提取第42页
     ·16S rDNA 的 PCR 扩增体系以及条件第42页
     ·PCR 产物的纯化第42页
   ·T-RFLP 分析第42-43页
     ·荧光 PCR 产物的限制性酶切第42-43页
     ·酶切产物的基因扫描第43页
   ·构建 16S rDNA 文库第43-45页
     ·PCR 产物的连接第43页
     ·E. coli DH5α感受态细胞的制备(CaCl2法)第43-44页
     ·转化第44页
     ·阳性克隆的筛选第44页
     ·ARDRA 分型第44-45页
   ·内生细菌多样性分析第45-46页
     ·植株的表面消毒第45页
     ·内生细菌的分离和纯化第45页
     ·内生细菌 DNA 基因组的提取第45-46页
     ·IAA 产生菌的筛选和定量分析第46页
     ·ARDRA 分型第46页
   ·拮抗菌的筛选第46-47页
   ·鲜姜汁的抑菌试验第47页
   ·数据分析第47-49页
     ·细菌群落多样性分析第47页
     ·去趋势对应分析(DCA)第47-48页
     ·16S rDNA 文库分析第48-49页
       ·序列分析第48页
       ·文库统计数据分析第48-49页
   ·核苷酸序列登录号第49-50页
3 结果与分析第50-79页
   ·熏蒸剂对根际土壤样品中可培养微生物的影响第50-51页
     ·熏蒸剂对根际土壤细菌的影响第50页
     ·熏蒸剂对根际土壤放线菌的影响第50页
     ·熏蒸剂对根际土壤真菌的影响第50-51页
   ·T-RFLP 分析第51-55页
     ·样品的 T-RFLP 图谱分析第51-52页
     ·多样性指数分析第52-53页
     ·T-RFLP 图谱中主要片段的定性分析第53-55页
   ·16S rDNA 克隆文库分析第55-59页
     ·文库的构建第55-56页
       ·阳性克隆子的验证第55页
       ·16S rDNA 扩增片段的 ARDRA 分型第55-56页
       ·嵌合体检测以及库容的估算第56页
     ·基于 16S rDNA 克隆文库的细菌多样性分析第56-59页
       ·生姜根际细菌群落结构分析第56-58页
       ·细菌多样性指数分析第58-59页
   ·生姜根际土壤环境特征第59-66页
     ·有机质含量变化趋势第59-60页
     ·腐殖质含量变化趋势第60-61页
     ·铵态氮的含量变化趋势第61页
     ·硝态氮的含量变化趋势第61-62页
     ·速效磷的含量变化趋势第62页
     ·速效钾的含量变化趋势第62-63页
     ·微量元素铁的变化趋势第63-64页
     ·微量元素锰的含量变化趋势第64-65页
     ·微量元素锌的含量变化趋势第65页
     ·微量元素铜的含量变化趋势第65-66页
   ·细菌群落与环境因子之间的关系(RDA 分析)第66-67页
   ·内生细菌多样性分析第67-76页
     ·内生细菌的数量第67-68页
     ·内生拮抗细菌的筛选第68-69页
     ·产吲哚乙酸(IAA)内生细菌的筛选第69-71页
       ·内生细菌 IAA 产生能力检测第69页
       ·吲哚乙酸定量分析第69-71页
     ·生姜有益内生细菌的多样性分析第71-75页
       ·16S rDNA 的 PCR 扩增第71页
       ·PCR 扩增产物限制性内切酶酶切图谱第71页
       ·生姜有益内生细菌的聚类分析第71-75页
     ·鲜姜汁抑菌效果的检测第75-76页
   ·生姜根际拮抗菌的筛选以及鉴定第76-79页
     ·生姜根际拮抗菌的筛选第76-77页
     ·拮抗菌的 ARDRA 分析第77-79页
       ·PCR 扩增产物限制性内切酶酶切图谱第77页
       ·PCR 扩增产物限制性酶切图谱软件分析第77-78页
       ·拮抗菌的 16S rDNA 序列及系统发育分析第78-79页
4 讨论第79-84页
5 结论第84-86页
参考文献第86-93页
附录第93-105页
致谢第105页

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