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透性化酵母细胞产海藻糖的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-13页
第一章 综述第13-25页
   ·海藻糖的结构及其分布第13页
   ·海藻糖的生物学特性及其功能作用原理第13-15页
     ·稳定性及呈色性第13-14页
     ·溶解性、甜度及渗透压第14页
     ·吸水性第14页
     ·其它性质第14-15页
   ·海藻糖的合成和代谢第15-17页
     ·海藻糖在生物体内的合成第15-17页
       ·通过麦芽糖磷酸化酶和海藻糖磷酸化酶以麦芽糖为底物合成海藻糖第15页
       ·通过糖基转移酶和淀粉酶以淀粉或麦芽寡糖为底物合成海藻糖第15页
       ·通过麦芽糖基海藻糖合成酶和麦芽糖基海藻糖水解酶合成海藻糖第15-16页
       ·通过海藻糖-6-磷酸合酶和海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶合成海藻糖第16页
       ·通过海藻糖酶以葡萄糖为底物反向合成海藻糖第16页
       ·通过蔗糖磷酸化酶和海藻糖磷酸化酶以蔗糖为底物合成海藻糖第16页
       ·通过海藻糖合酶以麦芽糖为底物合成海藻糖第16-17页
     ·海藻糖的代谢第17页
   ·海藻糖的检测分析方法第17-19页
     ·纸层析法第17页
     ·薄层层析法第17-18页
     ·高效液相色谱法第18页
     ·气相色谱法第18页
     ·蒽酮比色法第18-19页
     ·酶法第19页
   ·海藻糖生物合成方法第19-20页
     ·酵母提取法第19页
     ·发酵法第19-20页
     ·酶合成法第20页
     ·基因工程法第20页
   ·海藻糖的应用第20-22页
     ·在食品行业的应用第20-21页
       ·海藻糖是一种新型的甜味剂第20页
       ·海藻糖是一种天然的食品保护剂第20-21页
       ·海藻糖是一种多功能风味改良剂第21页
       ·海藻糖具有保健食品的功能第21页
     ·在生物学上的应用第21页
     ·在化妆品方面的应用第21-22页
     ·在农业领域的应用第22页
   ·渗透技术及其应用第22-24页
     ·渗透技术简介第22-23页
     ·渗透细胞技术应用第23-24页
       ·用于提高生物转化效率第23页
       ·用于胞内酶的原位分析第23-24页
       ·用于胞内物质的提取第24页
       ·用于固定化细胞的制备第24页
       ·用于免疫分析等其他方面第24页
   ·本论文主要研究内容第24页
   ·本论文的创新之处第24-25页
第二章 海藻糖测定方法的研究第25-34页
   ·引言第25页
   ·实验材料第25-26页
     ·主要仪器第25页
     ·主要试剂第25-26页
     ·主要溶液的配制第26页
   ·实验方法第26-28页
     ·胞内海藻糖的定量测定第26-27页
       ·硫酸-蒽酮法第26-27页
     ·胞外海藻糖的定量测定第27-28页
       ·DNS 法第27-28页
   ·结果与讨论第28-33页
     ·硫酸-蒽酮法最适测定条件的确定第28-30页
       ·最适煮沸时间的确定第28-29页
       ·最适测定波长的确定第29页
       ·最适蒽酮-硫酸添加量的确定第29-30页
       ·海藻糖标准曲线的绘制第30页
     ·DNS 法最适测定条件的确定第30-33页
       ·葡萄糖标准曲线的绘制第30-31页
       ·酸解海藻糖煮沸时间的确定第31-32页
       ·最适酸浓度的确定第32页
       ·最适酸添加量的确定第32-33页
   ·小结第33-34页
第三章 透性化酵母细胞的制备第34-44页
   ·引言第34页
   ·实验材料第34-35页
     ·实验菌株第34页
     ·培养基第34-35页
     ·实验试剂第35页
     ·实验仪器第35页
   ·实验方法第35-37页
     ·海藻糖的测定第35-36页
       ·胞内海藻糖的测定第35页
       ·胞外海藻糖的测定第35-36页
       ·核酸及蛋白质含量的测定第36页
       ·细胞染色率的测定第36页
     ·实验方法与设计第36-37页
       ·种子培养第36页
       ·摇瓶培养第36页
       ·酵母细胞渗透处理第36页
       ·生物合成海藻糖第36页
       ·胞内海藻糖的提取第36-37页
   ·结果与讨论第37-43页
     ·最佳透性化试剂的选择第37页
     ·核酸、蛋白质含量及细胞染色率的测定第37-39页
     ·吐温 60 处理条件的确定第39-41页
       ·最适浓度的确定第39页
       ·最适用量的确定第39-40页
       ·最适作用时间的确定第40-41页
       ·最适处理温度的确定第41页
     ·正交实验确定最优处理条件第41-42页
     ·验证试验第42-43页
   ·小结第43-44页
第四章 海藻糖积累的培养基及培养条件的研究第44-57页
   ·引言第44页
   ·实验材料第44-45页
     ·实验菌株第44页
     ·培养基第44页
     ·实验试剂第44页
     ·实验仪器第44-45页
   ·实验方法第45-46页
     ·海藻糖的定量测定第45页
       ·胞内海藻糖的定量测定第45页
       ·胞外海藻糖的定量测定第45页
     ·实验方法与设计第45-46页
       ·种子培养第45页
       ·摇瓶培养第45页
       ·酵母细胞渗透处理第45页
       ·生物合成海藻糖第45页
       ·胞内海藻糖的提取第45页
       ·菌体生物量的测定第45-46页
   ·结果与讨论第46-56页
     ·透性酵母细胞发酵培养基单因素实验第46-49页
       ·最佳碳源及其质量分数的确定第46-47页
       ·最佳氮源及其质量分数的确定第47-48页
       ·最佳盐及其质量分数的确定第48-49页
     ·响应面法对海藻糖产生培养基的优化第49-53页
       ·响应面法确定最适培养基组成第49-53页
       ·验证性试验第53页
     ·透性化酵母细胞发酵条件的优化第53-56页
       ·透性酵母合成海藻糖的时间曲线第53页
       ·装液量对海藻糖产量的影响第53-54页
       ·pH 对海藻糖产量的影响第54-55页
       ·温度对海藻糖产量的影响第55页
       ·接种量对海藻糖产量的影响第55-56页
   ·小结第56-57页
第五章 透性化酵母细胞中海藻糖的提取第57-63页
   ·引言第57页
   ·实验材料第57-58页
     ·实验菌株第57页
     ·培养基第57页
     ·实验试剂第57页
     ·实验仪器第57-58页
   ·实验方法第58页
     ·胞内海藻糖的测定第58页
     ·实验方法与设计第58页
       ·种子培养第58页
       ·摇瓶培养第58页
       ·酵母细胞渗透处理第58页
       ·生物合成海藻糖第58页
       ·胞内海藻糖的提取第58页
   ·结果与讨论第58-62页
     ·海藻糖提取单因素实验第58-61页
       ·海藻糖提取料液比的确定第59页
       ·海藻糖提取时间的确定第59-60页
       ·海藻糖提取温度的确定第60页
       ·海藻糖提取三氯乙酸浓度的确定第60-61页
     ·正交实验确定最优处理条件第61-62页
     ·验证试验第62页
   ·结论第62-63页
第六章 结论第63-64页
参考文献第64-67页
致谢第67页

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