| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1 前言 | 第12页 |
| 2 猪脂肪相关基因的研究进展 | 第12-14页 |
| ·二酰基甘油酰基转移酶1 | 第12-13页 |
| ·激素敏感性脂肪酶 | 第13页 |
| ·脂蛋白酯酶基因 | 第13-14页 |
| ·过氧化物酶体增殖物激活受体γ | 第14页 |
| 3 启动子的结构功能研究 | 第14-16页 |
| ·启动子基本结构 | 第14-15页 |
| ·真核生物启动子预测相关数据库 | 第15页 |
| ·真核生物启动子功能研究 | 第15-16页 |
| 4 DNA甲基化 | 第16-18页 |
| ·表观遗传学的相关研究 | 第16-17页 |
| ·DNA甲基化的修饰模式 | 第17页 |
| ·DNA甲基化的检测方法 | 第17-18页 |
| 5 BMP-3b基因研究进展 | 第18-19页 |
| 6 研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第20-43页 |
| 1 试验材料 | 第20-22页 |
| ·主要的生化试剂和药品 | 第20页 |
| ·细胞、菌株和载体及猪基因组DNA | 第20页 |
| ·试剂盒 | 第20-21页 |
| ·组织表达谱分析的样品 | 第21页 |
| ·DNA甲基化分析的样品 | 第21页 |
| ·主要的仪器、设备及耗材 | 第21页 |
| ·缓冲液和常用试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·主要的生物学软件和网站 | 第22页 |
| 2 试验方法 | 第22-43页 |
| ·猪BMP-3b基因5’端上游调控区域的克隆和分析 | 第22-26页 |
| ·猪BMP-3b基因转录起始位点的鉴定 | 第26-27页 |
| ·猪BMP-3b基因近端启动子缺失分析 | 第27-31页 |
| ·核心启动区的进一步寻找和验证 | 第31页 |
| ·定点突变的验证试验 | 第31-33页 |
| ·猪BMP-3b基因组织表达谱分析 | 第33-35页 |
| ·核心启动区甲基化研究 | 第35-39页 |
| ·BMP-3b超表达实验 | 第39-43页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第43-57页 |
| 1 猪BMP-3b基因启动子核心位点的寻找 | 第43-49页 |
| ·猪BMP-3b基因5’端上游调控区域克隆和分析 | 第43页 |
| ·猪BMP-3b基因转录起始位点的鉴定 | 第43-44页 |
| ·猪BMP-3b基因5’端上游调控区域的生物信息学分析 | 第44-45页 |
| ·不同物种BMP-3b基因近端启动子序列比对 | 第45-46页 |
| ·猪BMP-3b基因5’端上游调控区域的缺失载体的构建 | 第46页 |
| ·启动子在三种不同真核细胞中活性分析结果 | 第46-47页 |
| ·细致缺失载体的构建 | 第47-48页 |
| ·细致缺失片段在PK细胞中的活性分析 | 第48页 |
| ·点突变分析的验证 | 第48-49页 |
| 2 猪BMP-3b基因组织表达谱分析 | 第49-50页 |
| ·RNA的提取 | 第49页 |
| ·第一链cDNA检测结果 | 第49-50页 |
| ·猪BMP-3b基因在猪不同组织中的表达结果 | 第50页 |
| 3 核心启动区甲基化分析 | 第50-54页 |
| ·猪BMP-3b基因启动子和外显子CpG岛预测 | 第50-51页 |
| ·核心启动区的甲基化扩增结果 | 第51页 |
| ·甲基化测序结果与分析 | 第51-53页 |
| ·猪BMP-3b基因核心启动区不同时期的甲基化情况 | 第53-54页 |
| ·猪BMP-3b基因组织表达与甲基化相关性分析 | 第54页 |
| 4 猪BMP-3b的超表达实验 | 第54-57页 |
| ·不同物种BMP-3b基因氨基酸序列比对 | 第54页 |
| ·猪BMP-3b基因CDS全长的克隆及双酶切鉴定 | 第54-55页 |
| ·PCDNA3.1-CDS在PK细胞中的转染 | 第55-56页 |
| ·荧光定量PCR检测结果 | 第56-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-61页 |
| 1 关于猪BMP-3b基因生物信息学与转录调控分析 | 第57-59页 |
| ·猪BMP-3b基因序列分析 | 第57页 |
| ·猪BMP-3b基因启动子的转录调控分析 | 第57-59页 |
| 2 猪BMP-3b基因启动子甲基化与组织表达谱分析 | 第59-60页 |
| 3 猪BMP-3b基因的超表达实验分析 | 第60-61页 |
| 第五章 小结 | 第61-62页 |
| 1 本实验得到的结论 | 第61页 |
| 2 下一步工作设想 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录 | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
