| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 1 绪论 | 第12-23页 |
| ·胰腺 | 第12-17页 |
| ·胰腺的形态结构 | 第12-14页 |
| ·胰腺的发育过程概述 | 第14页 |
| ·胰腺疾病概述 | 第14-15页 |
| ·胰腺相关miRNAs的研究进展 | 第15-17页 |
| ·胰腺特异的转录因子Ptf1a | 第17-21页 |
| ·早期胰腺发育过程中Ptf1a的作用 | 第17-19页 |
| ·Ptf1a的调控因子概述 | 第19-21页 |
| ·MicroRNA-18a调控作用简介 | 第21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 miR-18a的表达模式分析及其对Ptfla 3’UTR靶向作用研究 | 第23-37页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·试验动物、载体及细胞系 | 第23页 |
| ·主要仪器与设备 | 第23-24页 |
| ·试验药品、试剂配制 | 第24页 |
| ·试验器械的清洗与消毒 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-30页 |
| ·总RNA提取与反转录 | 第24-27页 |
| ·DNA载体构建 | 第27-29页 |
| ·实时定量RT-PCR | 第29-30页 |
| ·双荧光素酶报告系统检测 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30-35页 |
| ·胚胎胰腺发育过程和胰腺细胞系中miR-18a的表达模式 | 第30-32页 |
| ·miR-18a的靶基因鉴定 | 第32-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 3 在NIT 3 T3 细胞中miR-18a能抑制Ptf1a mRNA及蛋白水平的表达 | 第37-44页 |
| ·试验材料 | 第37-38页 |
| ·试验细胞系 | 第37页 |
| ·主要仪器与设备 | 第37页 |
| ·试验药品与试剂配制 | 第37-38页 |
| ·试验方法 | 第38-41页 |
| ·pCAG-Ptf1a 3’UTR全长表达载体构建 | 第38页 |
| ·3T3细胞转染 | 第38-39页 |
| ·提取细胞蛋白 | 第39页 |
| ·Western | 第39-41页 |
| ·实验结果 | 第41-42页 |
| ·pCAG-Ptf1a 3’UTR载体构建 | 第41-42页 |
| ·miR-18a能抑制Ptf1a mRNA及蛋白水平的表达 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 4 在胰腺祖细胞中过表达miR-18a对Pf1a的影响 | 第44-48页 |
| ·试验材料 | 第44页 |
| ·试验细胞系 | 第44页 |
| ·主要仪器与设备 | 第44页 |
| ·试验药品与试剂配制 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-45页 |
| ·胰腺祖细胞转染 | 第44页 |
| ·细胞计数 | 第44-45页 |
| ·实验结果 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 5 在大鼠AR42J细胞中过表达miR-18a对Ptf1a的影响 | 第48-51页 |
| ·试验材料 | 第48页 |
| ·试验细胞系 | 第48页 |
| ·主要仪器与设备 | 第48页 |
| ·试验药品与试剂配制 | 第48页 |
| ·试验方法 | 第48页 |
| ·AR42J细胞转染 | 第48页 |
| ·实验结果 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50页 |
| ·本章小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
