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羊痘病毒ORF95和ORF103的表达及iELISA方法研究

附件第1-5页
摘要第5-6页
Abstract第6-10页
英文缩略表第10-11页
第一章 绪论第11-21页
   ·前言第11页
   ·病原学和分类第11页
   ·羊痘病毒属基因组及其编码蛋白的特点和功能第11-13页
   ·流行病学特点第13-14页
   ·临床特点及其致病机制第14-15页
   ·免疫逃避机制第15-16页
     ·病毒自身编码蛋白对机体的作用第15页
     ·细胞的凋亡机制第15页
     ·病毒与细胞的凋亡第15-16页
   ·疾病的诊断与防控第16-19页
     ·诊断方法第16-18页
     ·痘病的免疫力和羊痘疫苗第18-19页
   ·痘病毒载体的研究与应用第19-20页
   ·展望第20-21页
第二章 ORF95 与 ORF103 的克隆与序列分析第21-28页
   ·材料第21-22页
     ·疫苗第21页
     ·菌株第21页
     ·主要试剂第21页
     ·培养基与溶液第21-22页
   ·方法第22-23页
     ·基因组的提取第22页
     ·ORF95 和 ORF103 的扩增第22-23页
     ·ORF95 与 ORF103 的克隆第23页
     ·ORF95 与 ORF103 的序列分析及编码蛋白的结构预测第23页
   ·结果第23-27页
     ·ORF95 和 ORF103 基因 PCR 扩增结果第23-24页
     ·克隆载体的 PCR 鉴定第24页
     ·ORF95 和 ORF103 的序列分析第24-27页
   ·讨论第27-28页
第三章 山羊痘病毒 ORF95 和 ORF103 的原核表达与纯化第28-36页
   ·材料与方法第28-29页
     ·菌株第28页
     ·主要试剂第28页
     ·培养基与溶液第28-29页
     ·主要仪器与设备第29页
   ·方法第29-31页
     ·重组表达质粒的构建与鉴定第29页
     ·重组蛋白在大肠杆菌中的表达及表达条件的优化第29页
     ·ORF95 和 ORF103 重组蛋白的纯化第29-30页
     ·纯化蛋白的反应性分析第30-31页
   ·结果第31-35页
     ·重组质粒的构建与鉴定第31页
     ·重组蛋白的诱导表达及其表达条件的优化第31-32页
     ·重组蛋白的纯化和定量第32页
     ·重组蛋白的反应性分析第32-35页
   ·讨论第35-36页
第四章 间接 ELISA 诊断方法的建立第36-44页
   ·材料第36-37页
     ·抗原、阳性血清及阴性血清第36页
     ·主要试剂第36页
     ·溶液第36-37页
     ·主要仪器与设备第37页
   ·方法第37-39页
     ·间接 ELISA 方法操作程序第37页
     ·间接 ELISA 方法反应条件的优化第37-38页
     ·判定标准的确定第38页
     ·特异性试验第38页
     ·重复性试验第38页
     ·临床样品的检测效果第38-39页
   ·结果第39-42页
     ·间接 ELISA 最佳工作条件的确定第39-40页
     ·间接 ELISA 临界值的确定第40页
     ·特异性试验第40-41页
     ·敏感性试验第41页
     ·重复性试验第41页
     ·临床血清样品的检测第41-42页
   ·讨论第42-44页
第五章 全文结论第44-45页
参考文献第45-52页
致谢第52-53页
作者简历第53页

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