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油菜CAMTA1参与冷胁迫应答的功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-12页
一、前言第12-20页
   ·Ca~(2+)信号系统的研究进展第12-14页
     ·依赖于Ca~(2+)的CaM信号途径第13-14页
   ·Ca~(2+)低温信号转导的研究进展第14-16页
   ·CAMTA的研究进展第16-19页
     ·CAMTA3参与拟南芥的生物防御过程第17页
     ·CAMTA蛋白家族参与拟南芥花粉发育过程第17页
     ·CAMTA参与番茄的发育与成熟过程第17-18页
     ·CAMTA参与冷胁迫过程第18页
     ·CAMTA1参与拟南芥的干旱防御过程第18-19页
   ·选题依据及意义第19-20页
二、材料与方法第20-30页
   ·实验材料第20-22页
     ·植物材料第20页
     ·菌种第20页
     ·质粒第20页
     ·工具酶第20页
     ·常用储存液第20页
     ·常用缓冲液第20-21页
     ·培养基第21-22页
     ·DNA的测序第22页
     ·仪器设备第22页
   ·实验方法第22-30页
     ·BnCaMl与BnCAMTA1相互作用的回转实验第22页
     ·油菜的培养第22页
     ·油菜总RNA的提取、纯化及逆转录反应第22-25页
     ·pBI-BnCAMTA1-eGFP融合表达载体的构建及荧光观察第25页
     ·BnCAMTA1过量表达载体的构建及拟南芥的遗传转化第25-26页
     ·BnCAMTA1过量表达转基因拟南芥的表型分析第26-28页
     ·冷相关和ABA相关Marker基因的RT-PCR分析第28-29页
     ·BnCAMTA1与AtCBF2的酵母单杂交实验第29-30页
三、结果与分析第30-44页
   ·BnCaM1与BnCAMTA1的回转验证实验第30页
   ·BnCAMTA1基因的克隆第30-31页
   ·BnCAMTA1基因的表达及蛋白亚细胞定位第31-33页
     ·BnCAMTA1基因的表达受冷胁迫诱导第31-32页
     ·BnCAMTA1-eGFP载体的构建第32页
     ·BnCAMTA1-eGFP融合蛋白的荧光观察第32-33页
   ·BnCAMTA1-OE转基因拟南芥的纯合体获得第33-34页
     ·BnCAMTA1过量表达载体的构建第33页
     ·BnCAMTA1-OE转基因拟南芥的鉴定第33-34页
   ·BnCAMTAl过量转基因拟南芥增强对冷胁迫的耐受性第34-38页
     ·冷处理下转基因拟南芥幼苗期的生长分析第34-36页
     ·冷处理下转基因拟南芥成苗期的生长分析第36-38页
   ·BnCAMTA1过量转基因拟南芥增强对外源ABA的敏感性第38-40页
     ·ABA处理下转基因拟南芥种子萌发的表型分析第38-39页
     ·ABA处理下转基因拟南芥幼苗生长分析第39-40页
   ·冷相关标记基因在转基因拟南芥中的表达分析第40-41页
   ·BnCAMTA1与AtCBF2的相互作用第41-44页
     ·pAbAi-AtCBF2-Pro、pGADT7-BnCAMTA1载体的构建第41-42页
     ·BnCAMTA1与AtCBF2-Pro在酵母细胞内的相互作用第42-44页
四、讨论第44-47页
   ·BnCAMTA1的结构分析第44页
   ·BnCAMTA1的表达受冷胁迫的诱导第44-45页
   ·BnCAMTA1参与冷和ABA信号通路第45页
   ·BnCAMTA1介导BnCaM1参与CBF的冷信号系统第45-47页
参考文献第47-50页
硕士期间参与发表的论文第50-51页
附录第51-52页
致谢第52-53页

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