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产单宁酶真菌的筛选及其对茶多酚的生物转化

中文摘要第1-3页
Abstract第3-5页
中文文摘第5-7页
目录第7-11页
第一章 绪论第11-31页
   ·单宁酶概述第11-18页
     ·单宁酶介绍第11-12页
     ·单宁酶的来源第12-16页
     ·单宁酶的生产第16-17页
     ·单宁酶酶活测定第17-18页
   ·单宁酶的分离纯化及酶学性质第18-21页
     ·单宁酶分离纯化方法第18-19页
     ·单宁酶的酶学性质第19-21页
   ·单宁酶的分子生物学第21-22页
   ·微生物单宁酶的应用第22-24页
     ·在茶叶加工中的应用第22-23页
     ·在食品工业的应用第23页
     ·在饲料工业的应用第23-24页
     ·在医药化工的应用第24页
     ·在制革工业的应用第24页
   ·有关茶多酚的介绍第24-25页
   ·微生物酶系生物转化茶多酚第25-27页
   ·本课题主要内容和意义第27-31页
     ·主要内容第27-28页
     ·研究背景和意义第28-31页
第二章 产单宁酶菌株的筛选及鉴定第31-47页
   ·前言第31页
   ·材料与方法第31-38页
     ·材料第31-33页
       ·供试茶叶样品第31页
       ·培养基第31-32页
       ·主要仪器设备及药品第32-33页
     ·方法第33-38页
       ·试剂配制第33页
       ·没食子酸标准曲线制作第33-34页
       ·单宁酶酶活测定第34-35页
       ·微生物的分离第35页
       ·产单宁酶菌株初筛第35页
       ·固体发酵初筛和复筛第35-36页
       ·菌株形态学鉴定第36页
       ·菌体培养第36页
       ·基因组DNA的提取第36-37页
       ·PCR反应体系和扩增条件第37页
       ·PCR产物的回收第37-38页
       ·系统发育树的构建第38页
   ·结果与分析第38-44页
     ·产单宁酶菌株的筛选第38-42页
       ·产单宁酶菌株的分离第38-39页
       ·平板初筛第39-41页
       ·固体发酵初筛和复筛第41-42页
     ·菌株P-24的初步鉴定第42-44页
       ·形态观察第42-43页
       ·菌株的ITS测序及系统发育树构建第43-44页
   ·小结与讨论第44-47页
第三章 菌株P-24单宁酶的纯化及酶学性质研究第47-67页
   ·前言第47页
   ·材料与方法第47-53页
     ·材料第47-50页
       ·菌株第47-48页
       ·主要试剂第48页
       ·主要仪器第48-49页
       ·试剂配制第49-50页
     ·方法第50-53页
       ·单宁酶酶活测定第50页
       ·蛋白含量的测定第50-51页
       ·单宁酶分离纯化第51-52页
         ·硫酸铵分级沉淀第51页
         ·DEAE-纤维素阴离子交换柱层析第51页
         ·葡聚糖G-150凝胶柱层析第51-52页
         ·SDS-PAGE 凝胶电泳第52页
       ·单宁酶酶学性质的研究第52-53页
         ·单宁酶热稳定性第52页
         ·单宁酶最适温度第52页
         ·单宁酶pH的稳定性第52-53页
         ·单宁酶最适pH值第53页
         ·有机溶剂对单宁酶的影响第53页
         ·金属离子对单宁酶的影响第53页
         ·单宁酶反应动力学第53页
   ·结果与分析第53-65页
     ·单宁酶的分离纯化第53-57页
       ·硫酸铵分级沉淀的确定第53-54页
       ·DEAE-纤维素阴离子交换柱层析第54-55页
       ·葡聚糖G-150柱层析第55-56页
       ·单宁酶各步纯化结果及纯度鉴定第56-57页
     ·单宁酶酶学性质第57-65页
       ·单宁酶热稳定性第57-59页
       ·单宁酶最适温度第59-60页
       ·单宁酶的pH稳定性第60-61页
       ·单宁酶最适反应pH第61-62页
       ·有机溶剂对单宁酶的影响第62-63页
       ·金属离子对单宁酶的影响第63-64页
       ·单宁酶米氏常数 (K_m)和V_(max)的测定第64-65页
   ·小结与讨论第65-67页
第四章 菌株P-24及单宁酶转化茶多酚的初步研究第67-79页
   ·前言第67页
   ·材料与方法第67-69页
     ·材料第67-68页
       ·供试菌株与其它材料第67页
       ·培养基第67页
       ·主要试剂和仪器第67-68页
     ·方法第68-69页
       ·单宁酶对茶汤“转溶”的研究第68页
       ·茶多酚培养基的摇瓶培养第68页
       ·转化产物的HPLC分析第68-69页
       ·转化产物的HPLC-MS检测第69页
   ·结果与分析第69-77页
     ·单宁酶对茶汤“转溶”效果第69-70页
     ·转化产物的分析第70-77页
       ·标样和空白对照的HPLC和LC-MS分析第71-72页
       ·菌株P-24对茶多酚的转化效果第72-75页
       ·单宁酶对茶多酚的转化效果第75-77页
   ·小结与讨论第77-79页
第五章 结论与展望第79-81页
   ·结论第79-80页
   ·展望第80-81页
参考文献第81-89页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第89-91页
致谢第91-93页
索引第93-95页
个人简历第95-96页

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