| 目录 | 第1-7页 |
| CONTENTS | 第7-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| ·病原学 | 第13-17页 |
| ·禽白血病病毒及其亚群 | 第13页 |
| ·ALV-J 亚群病毒结构及特性 | 第13-14页 |
| ·ALV-J 亚群核酸和基因组结构 | 第14-15页 |
| ·ALV-J 亚群病毒蛋白及特性 | 第15-17页 |
| ·流行病学 | 第17-18页 |
| ·病毒传播学特性 | 第17页 |
| ·病毒感染特征 | 第17页 |
| ·流行特点 | 第17-18页 |
| ·病毒致瘤机制 | 第18-19页 |
| ·AL-J 临床症状及病理变化 | 第19-20页 |
| ·临床症状及剖检病变 | 第19-20页 |
| ·病理组织学变化 | 第20页 |
| ·AL-J 的诊断与检测方法 | 第20-21页 |
| ·病毒分离鉴定 | 第20-21页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第21页 |
| ·酶联免疫吸附试验检测技术(ELISA) | 第21页 |
| ·AL-J 的防治 | 第21-22页 |
| ·本研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-39页 |
| ·实验材料 | 第23-27页 |
| ·病料与细胞 | 第23页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·抗原与血清 | 第23页 |
| ·培养基和分子生物学试剂 | 第23-24页 |
| ·主要试剂的配制 | 第24-26页 |
| ·引物的设计与合成 | 第26页 |
| ·仪器设备 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-39页 |
| ·ALV-J 分离与鉴定 | 第27-29页 |
| ·ALV-J 病毒 gp85 基因克隆 | 第29-32页 |
| ·pET-gp85 基因原核表达 | 第32-36页 |
| ·ALV-J 间接 ELISA 检测方法建立 | 第36-39页 |
| 3 结果 | 第39-53页 |
| ·ALV-J 分离鉴定结果 | 第39-44页 |
| ·临床症状观察 | 第39页 |
| ·病理解剖学诊断 | 第39页 |
| ·病理组织学诊断 | 第39页 |
| ·IFA 检测结果 | 第39-43页 |
| ·PCR 鉴定 | 第43-44页 |
| ·ALV-J 病毒 gp85 基因克隆 | 第44-45页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第44页 |
| ·菌液 PCR 鉴定 | 第44-45页 |
| ·pMD-gp85 序列分析 | 第45页 |
| ·ALV-J 病毒 gp85 基因原核表达 | 第45-48页 |
| ·扩增目的基因 | 第45-46页 |
| ·重组质粒 pET-gp85 鉴定 | 第46-47页 |
| ·表达产物 SDS-PAGE 分析 | 第47页 |
| ·表达产物 Western-blot 鉴定 | 第47-48页 |
| ·间接 ELISA 方法检测建立 | 第48-53页 |
| ·最佳抗原包被浓度和血清的稀释度确定 | 第48-49页 |
| ·最佳封闭液浓度确定 | 第49页 |
| ·最佳血清作用时间确定 | 第49-50页 |
| ·HRP 标记羊抗鸡 IgG(二抗)最佳稀释度确定 | 第50页 |
| ·二抗最佳作用时间确定 | 第50-51页 |
| ·最佳底物作用时间确定 | 第51页 |
| ·临界值确定 | 第51页 |
| ·重复性试验 | 第51页 |
| ·特异性试验 | 第51-52页 |
| ·临床样品检测 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-58页 |
| ·ALV-J 病毒的分离鉴定 | 第53-54页 |
| ·ALV-J-gp85 克隆与表达 | 第54-55页 |
| ·gp85 基因克隆与序列分析 | 第54页 |
| ·重组质粒构建与诱导表达 | 第54-55页 |
| ·间接 ELISA 方法建立 | 第55-58页 |
| ·间接 ELISA 包被抗原 | 第55-56页 |
| ·间接 ELISA 操作的质量控制 | 第56-57页 |
| ·间接 ELISA 方法的特点 | 第57-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第66页 |