| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-16页 |
| 符号说明及縮略词 | 第16-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-42页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 | 第18-26页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分类 | 第19页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的结构 | 第19-20页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的催化机理 | 第20-21页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的底物特异性 | 第21-22页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第22-23页 |
| ·β-葡萄糖苷酶在生物乙醇生产中的应用 | 第23-26页 |
| ·丝状真菌木质纤维素酶的合成调控机制研究进展 | 第26-34页 |
| ·碳源对纤维素酶的诱导作用 | 第26-29页 |
| ·β-葡萄糖苷酶在真菌纤维素酶合成调控中的作用 | 第29-31页 |
| ·木质纤维素酶的转录水平调控 | 第31-33页 |
| ·其它因素对木质纤维素酶合成调控的影响 | 第33-34页 |
| ·木质纤维素降解酶合成调控机制的转录组学研究 | 第34-40页 |
| ·里氏木霉木质纤维素酶合成调控机制的研究进展 | 第35-36页 |
| ·粗糙脉孢菌木质纤维素酶合成调控机制的研究进展 | 第36-38页 |
| ·曲霉木质纤维素酶合成调控机制的研究进展 | 第38-40页 |
| ·本论文的立题依据和研究内容 | 第40-42页 |
| 第二章 胞外主要β-葡萄糖苷酶BGL1的性质及在木质纤维素酶合成调控中的功能研究 | 第42-71页 |
| 引言 | 第42-43页 |
| ·材料和方法 | 第43-53页 |
| ·菌株、培养基和培养方法 | 第43-44页 |
| ·常用储备液 | 第44-45页 |
| ·常用试剂与仪器 | 第45页 |
| ·基因组DNA与总RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因bgl1的克隆 | 第46页 |
| ·胞外β-葡萄糖苷酶的聚丙烯葡聚糖凝胶层析 | 第46页 |
| ·β-葡萄糖苷酶酶活力的测定 | 第46-47页 |
| ·蛋白浓度的测定和SDS-PAGE分析 | 第47页 |
| ·温度和pH对酶活力的影响 | 第47页 |
| ·pBGL1的反应动力学分析 | 第47-48页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的添加对里氏木霉QM9414酶液糖化能力的影响 | 第48页 |
| ·胞外主要β-葡萄糖苷酶BGL1缺失菌株Δbgl1的构建 | 第48-50页 |
| ·敲除株的验证 | 第50-51页 |
| ·Δbgl1的表型分析 | 第51页 |
| ·胞外木质纤维素酶活力测定 | 第51页 |
| ·纤维糊精的制备 | 第51-52页 |
| ·Δbgl1中木质纤维素酶基因转录水平的测定 | 第52-53页 |
| ·胞内纤维寡糖含量的测定 | 第53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-69页 |
| ·斜卧青霉114-2 BGL1的氨基酸序列分析 | 第53-54页 |
| ·斜卧青霉114-2 BGL1的分离纯化 | 第54-56页 |
| ·pBGL1的酶学性质 | 第56-58页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的添加对里氏木霉QM9414发酵液糖化能力的影响 | 第58-61页 |
| ·BGL1在斜卧青霉114-2中的敲除 | 第61-62页 |
| ·Δbgl1的表型分析 | 第62-63页 |
| ·BGL1的缺失对胞外蛋白分泌及木质纤维素酶活力的影响 | 第63-65页 |
| ·BGL1的缺失对木质纤维素酶基因转录水平的影响 | 第65-69页 |
| 小结 | 第69-71页 |
| 第三章 胞内主要β-葡萄糖苷酶BGL2的性质及在木质纤维素酶合成调控中的功能研究 | 第71-103页 |
| 引言 | 第71-72页 |
| ·材料和方法 | 第72-80页 |
| ·菌株和培养基 | 第72页 |
| ·常用的储备液以及缓冲液 | 第72页 |
| ·胞内β-葡萄糖苷酶基因缺失菌株的构建 | 第72-75页 |
| ·bgl2的原位回补 | 第75-76页 |
| ·蛋白浓度及木质纤维素酶活力的测定 | 第76页 |
| ·Δbgl2纤维素酶基因转录水平测定 | 第76页 |
| ·Δbgl2胞内纤维二糖浓度的测定 | 第76页 |
| ·Δbgl1基因的克隆 | 第76-77页 |
| ·Δbgl2表达载体的构建 | 第77页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第77-78页 |
| ·重组蛋白在E.coli BL21中的异源表达 | 第78-79页 |
| ·重组蛋白的分离纯化 | 第79页 |
| ·pH和温度对重组蛋白酶活力的影响 | 第79页 |
| ·重组蛋白对纤维寡糖的水解作用 | 第79-80页 |
| ·重组BGL2的转糖基作用检测 | 第80页 |
| ·结果与讨论 | 第80-101页 |
| ·斜卧青霉114-2胞内的β-葡萄糖苷酶 | 第80-81页 |
| ·胞内β-葡萄糖苷酶在斜卧青霉114-2中的敲除 | 第81-83页 |
| ·敲除株产纤维素酶能力的测定 | 第83-85页 |
| ·BGL2的缺失对胞外蛋白和木质纤维素酶合成能力的影响 | 第85-91页 |
| ·BGL2的缺失对纤维素条件下木质纤维素酶基因转录的影响 | 第91-92页 |
| ·纤维二糖浓度对敲除株木质纤维素酶基因转录水平的影响 | 第92-94页 |
| ·BGL2的氨基酸序列分析 | 第94页 |
| ·BGL2在E.coli BL21中的异源表达 | 第94-96页 |
| ·重组BGL2的分离纯化 | 第96-97页 |
| ·重组BGL2的性质分析 | 第97-101页 |
| 小结 | 第101-103页 |
| 第四章 BGL1和BGL2双缺菌株中木质纤维素酶合成调控机制的研究 | 第103-118页 |
| 引言 | 第103-104页 |
| ·方法和材料 | 第104-106页 |
| ·菌株、培养基和培养条件 | 第104页 |
| ·BGL1和BGL2双敲除菌株Δbgl1Δbgl2的构建 | 第104-105页 |
| ·Δbgl1Δbgl2的表型分析 | 第105页 |
| ·Δbgl1Δbgl2的产酶能力测定 | 第105页 |
| ·Δbgl1Δbgl2纤维素酶基因转录水平测定 | 第105页 |
| ·Δbgl1Δbgl2胞内纤维二糖浓度的测定 | 第105-106页 |
| ·结果与讨论 | 第106-116页 |
| ·β-葡萄糖苷酶双敲除菌株△bgl1Δbgl2的构建 | 第106-107页 |
| ·Δbgl1Δbgl2的表型分析 | 第107-109页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的缺失对木质纤维素酶活力的影响 | 第109-111页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的缺失对木质纤维素酶基因转录水平的影响 | 第111-113页 |
| ·纤维二糖代谢相关基因的转录水平检测 | 第113-114页 |
| ·不同二糖对斜卧青霉纤维素酶的诱导作用 | 第114-115页 |
| ·斜卧青霉β-葡萄糖苷酶影响纤维素酶调控模型预测 | 第115-116页 |
| 小结 | 第116-118页 |
| 第五章 斜卧青霉114-2及高产突变株的基因表达谱差异分析 | 第118-136页 |
| 引言 | 第118-119页 |
| ·材料与方法 | 第119-121页 |
| ·菌株、培养基及培养条件 | 第119页 |
| ·常用溶液和试剂 | 第119-120页 |
| ·RNA样品的准备及测序 | 第120-121页 |
| ·差异表达基因的筛选 | 第121页 |
| ·差异表达基因的分级聚类分析 | 第121页 |
| ·差异表达基因的GO功能富集分析 | 第121页 |
| ·结果与分析 | 第121-134页 |
| ·斜卧青霉野生菌株114-2在不同条件下的转录差异分析 | 第121-126页 |
| ·斜卧青霉突变株JU-A10-T在不同条件下的转录差异分析 | 第126-130页 |
| ·野生菌株114-2与突变株JU-A10-T的转录差异分析 | 第130-134页 |
| 小结 | 第134-136页 |
| 论文创新性结果总结与展望 | 第136-138页 |
| 参考文献 | 第138-157页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第157-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
| 附录 | 第159-173页 |
| 附件 | 第173页 |
