| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-16页 |
| 符号说明 | 第16-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-39页 |
| ·瑞氏木霉——重要的工业生产菌株 | 第18-23页 |
| ·瑞氏木霉的基本特征 | 第18-21页 |
| ·瑞氏木霉的纤维素降解能力 | 第21-22页 |
| ·瑞氏木霉纤维素酶的表达调控 | 第22-23页 |
| ·瑞氏木霉纤维素酶与第二代生物质能源 | 第23页 |
| ·瑞氏木霉对环境信号的响应机制研究 | 第23-28页 |
| ·光信号对瑞氏木霉的影响 | 第24-25页 |
| ·营养和光照信号对瑞氏木霉纤维素酶表达的作用机制 | 第25-28页 |
| ·Ras蛋白及Ras信号途径生理功能和调控机制的研究 | 第28-34页 |
| ·Ras蛋白的发现及其功能 | 第28-31页 |
| ·Ras蛋白及其所介导的信号途径在真菌发育及基因表达调控中的作用 | 第31-32页 |
| ·瑞氏木霉Ras小GTPase家族蛋白 | 第32-34页 |
| ·瑞氏木霉纤维素酶系改良 | 第34-37页 |
| ·纤维素酶的协同作用 | 第34-35页 |
| ·瑞氏木霉的纤维素酶的基因工程改良 | 第35-37页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第37-39页 |
| 第二章 Ras小GTPase在调控瑞氏木霉形态建成及碳源利用过程中的作用研究 | 第39-93页 |
| ·实验材料与方法 | 第39-64页 |
| ·菌株、培养基及PCR引物 | 第39-44页 |
| ·培养条件 | 第44页 |
| ·主要分子克隆用酶、试剂和试剂盒 | 第44-45页 |
| ·主要实验仪器 | 第45页 |
| ·常用试剂和缓冲液 | 第45-46页 |
| ·分子生物学操作方法 | 第46-52页 |
| ·突变菌株的构建 | 第52-59页 |
| ·Ras小GTPase的表达分析及测序 | 第59-60页 |
| ·菌落及菌丝的形态观察 | 第60-61页 |
| ·生长及碳源利用情况测定 | 第61页 |
| ·纤维素酶活力测定 | 第61-62页 |
| ·胞内cAMP含量测定 | 第62页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第62-63页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第63-64页 |
| ·生物信息学软件及分析 | 第64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-90页 |
| ·瑞氏木霉Ras小GTPase的鉴定与分析 | 第64-67页 |
| ·Ras小GTPase在瑞氏木霉生长发育过程中的功能 | 第67-72页 |
| ·Ras小GTPase在瑞氏木霉碳源利用中的作用 | 第72-74页 |
| ·TrRas1和TrRas2的表达不受到碳源的影响 | 第74-77页 |
| ·TrRas1调控瑞氏木霉的顶端延伸及菌丝分支 | 第77-80页 |
| ·TrRas2调控瑞氏木霉顶端延伸、菌丝分支及孢子形成 | 第80-87页 |
| ·TrRas1和TrRas2与cAMP信号途径在调控瑞氏木霉菌丝顶端延伸过程中的关系 | 第87-90页 |
| ·小结 | 第90-93页 |
| 第三章 Ras小GTPase蛋白TrRas2在纤维素酶合成调控中的作用研究 | 第93-111页 |
| ·实验材料与方法 | 第93-98页 |
| ·菌株和质粒 | 第93页 |
| ·PCR引物 | 第93-94页 |
| ·培养基、培养条件和常用试剂 | 第94-95页 |
| ·主要实验仪器和分子实验试剂 | 第95页 |
| ·分子生物学操作方法 | 第95-96页 |
| ·突变子的构建 | 第96-97页 |
| ·纤维素酶活力测定、胞内cAMP含量测定和纤维素酶基因及其调控因子表达量测定 | 第97页 |
| ·瑞氏木霉在纤维素培养基中生物量的测定 | 第97-98页 |
| ·结果与讨论 | 第98-109页 |
| ·TrRas2影响瑞氏木霉纤维素酶的合成 | 第98-100页 |
| ·TrRas2调控瑞氏木霉纤维素酶基因的表达 | 第100-102页 |
| ·TrRas2调控瑞氏木霉纤维素酶转录调控因子的表达 | 第102-104页 |
| ·TrRas2通过调节转录因子Xyr1的合成量来调控纤维素酶基因的表达 | 第104-106页 |
| ·光信号和TrRas2在调控瑞氏木霉纤维素酶表达时的关系 | 第106-107页 |
| ·TrRas2与cAMP信号在调控瑞氏木霉纤维素酶表达时的关系 | 第107-109页 |
| ·小结 | 第109-111页 |
| 第四章 表达谱测序揭示TrRas1和TrRas2在瑞氏木霉生长发育和木质纤维素降解过程中的作用 | 第111-127页 |
| ·实验材料与方法 | 第111-112页 |
| ·菌株 | 第111页 |
| ·RNA的提取和检测 | 第111-112页 |
| ·表达谱测序数据分析 | 第112页 |
| ·结果与讨论 | 第112-126页 |
| ·RNA样品的质量检测 | 第112-114页 |
| ·ATrRas1突变株相对于野生型TU-6的基因表达情况分析 | 第114-118页 |
| ·表达谱测序初步揭示TrRas2在瑞氏木霉降解木质纤维素中的作用 | 第118-126页 |
| ·小结 | 第126-127页 |
| 第五章 瑞氏木霉纤维素酶系的基因工程改良 | 第127-145页 |
| ·实验材料与方法 | 第128-132页 |
| ·菌株和质粒 | 第128页 |
| ·PCR引物 | 第128-129页 |
| ·培养条件、实验仪器和常用试剂 | 第129页 |
| ·分子生物学操作方法 | 第129-130页 |
| ·突变子的构建 | 第130-131页 |
| ·漆酶活力和纤维素酶活力测定 | 第131-132页 |
| ·木糖渣糖化效率测定 | 第132页 |
| ·结果与讨论 | 第132-143页 |
| ·漆酶在瑞氏木霉中的表达及应用 | 第132-140页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的过表达及应用 | 第140-143页 |
| ·小结 | 第143-145页 |
| 全文总结 | 第145-147页 |
| 参考文献 | 第147-160页 |
| 致谢 | 第160-161页 |
| 攻读学位论文期间已(待)发表的学术论文 | 第161-189页 |
| 附件 | 第189页 |
