| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-29页 |
| ·布鲁菌病的危害及流行状况 | 第10-11页 |
| ·布鲁菌病发病过程和机理 | 第11页 |
| ·布鲁菌病的临床特征 | 第11-12页 |
| ·布鲁菌病流行病学特征 | 第12页 |
| ·布鲁菌检测技术研究进展 | 第12-21页 |
| ·细菌学方法检测 | 第13页 |
| ·血清学方法检测 | 第13-15页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第15-21页 |
| ·布鲁菌病的防治 | 第21页 |
| ·布鲁菌疫苗研究概况 | 第21-22页 |
| ·布鲁菌引物和探针 | 第22-24页 |
| ·布鲁菌模板的制备 | 第24-25页 |
| ·荧光定量PCR与LAMP用于不同标本 | 第25-26页 |
| ·荧光定量PCR和LAMP的应用前景 | 第26-27页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第27-28页 |
| ·试验技术路线 | 第28-29页 |
| 2 试验一 全血和血清作为布鲁菌分子生物学检测用标本的比较研究 | 第29-37页 |
| ·材料 | 第29-33页 |
| ·主要仪器设备与试剂 | 第29页 |
| ·标本 | 第29-33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| ·引物和探针 | 第33页 |
| ·血清DNA提取 | 第33页 |
| ·血液DNA提取 | 第33页 |
| ·Real-Time PCR体系与参数设置 | 第33-34页 |
| ·血清学方法检测 | 第34页 |
| ·标本和方法的评价 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-35页 |
| ·引物和探针的灵敏性和特异性 | 第34页 |
| ·血清DNA检测结果 | 第34页 |
| ·全血DNA检测结果 | 第34页 |
| ·血清和全血标本的比较 | 第34页 |
| ·Real-Time PCR与传统方法的比较 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 3 试验二 布鲁菌LAMP检测方法的建立与初步应用 | 第37-55页 |
| ·材料 | 第37-39页 |
| ·试验试剂 | 第37页 |
| ·主要试剂配制方法 | 第37-38页 |
| ·试验仪器 | 第38页 |
| ·菌株与临床标本 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·引物的设计与筛选 | 第39-40页 |
| ·标准品的制备 | 第40-41页 |
| ·DNA的制备 | 第41-42页 |
| ·LAMP反应体系的建立 | 第42页 |
| ·LAMP试验参数的优化 | 第42-43页 |
| ·常规PCR体系及参数设置 | 第43页 |
| ·LAMP方法的评价 | 第43页 |
| ·产物酶切验证与稳定性试验 | 第43页 |
| ·LAMP与荧光定量PCR的比较 | 第43页 |
| ·结果判定 | 第43-44页 |
| ·地方菌株和标本检测 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-52页 |
| ·质粒测序结果 | 第44页 |
| ·LAMP体系优化结果 | 第44-48页 |
| ·检测方法的灵敏度 | 第48-49页 |
| ·检测方法的特异性 | 第49-50页 |
| ·产物酶切验证与稳定性试验结果 | 第50页 |
| ·不同结果判定方法的比较 | 第50页 |
| ·LAMP与荧光定量PCR的比较 | 第50-52页 |
| ·地方菌株与临床标本检测 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |