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EHEC O157:H7 Intimin和Tir-Tccp蛋白对小鼠免疫保护及人工感染牛羊试验

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一篇 文献综述第11-33页
 1 引言第11-12页
 2 病原学第12-13页
 3 流行病学第13-14页
 4 临床特征与病理变化第14页
 5 致病因子第14-19页
   ·外膜蛋白第14-15页
   ·LPS第15页
   ·紧密粘附素(Intimin)第15页
   ·转位紧密粘附素受体(Tir)第15-16页
   ·Tir细胞骨架偶联蛋白(TccP)第16页
   ·菌毛第16-17页
   ·ToxB第17页
   ·EspS蛋白第17页
   ·志贺毒素第17-18页
   ·溶血素第18-19页
 6 致病机理第19-20页
 7 检测方法第20-23页
   ·细菌分离法第20页
   ·免疫学方法第20-21页
   ·分子生物学方法第21-22页
   ·生物传感技术第22-23页
   ·基因芯片技术第23页
 8 防治策略第23-27页
   ·亚单位疫苗第23-24页
   ·多糖结合疫苗第24页
   ·细菌ghost疫苗第24页
   ·转基因植物疫苗第24-25页
   ·核酸疫苗第25页
   ·重组活载体疫苗第25页
   ·减毒活菌疫苗第25-27页
 参考文献第27-33页
第二篇 实验研究第33-71页
 第一章 O157:H7 pCold Ⅰ-tir-tccp重组质粒的构建和融合蛋白的表达第33-47页
  摘要第33-34页
  1 材料和方法第34-40页
   ·质粒和菌株第34页
   ·主要试剂和仪器第34页
   ·tir-tccp基因的克隆第34-35页
   ·PCR扩增产物的回收第35-36页
   ·目的片段tir-tccp的T-A克隆与鉴定第36-38页
   ·pCold Ⅰ-tir-tccp重组质粒的构建第38-39页
   ·Western blot鉴定第39-40页
  2 结果第40-43页
   ·目的片段的PCR扩增第40-41页
   ·重组质粒pCold Ⅰ-tir-tccp的酶切鉴定第41页
   ·基因序列分析第41-42页
   ·重组蛋白的表达及表达形式的鉴定第42页
   ·重组蛋白的纯化及Western blotting第42-43页
  3 讨论第43-45页
  参考文献第45-46页
  Abstract第46-47页
 第二章 肠出血性大肠杆菌O157:H7 Intimin和Tir-Tccp蛋白对小鼠免疫保护性研究第47-61页
  摘要第47-48页
  1 材料与方法第48-51页
   ·试剂第48页
   ·主要仪器第48页
   ·菌种和实验动物第48页
   ·重组蛋白的诱导与纯化第48-50页
   ·小鼠的免疫保护性试验第50-51页
  2 结果第51-55页
   ·重组蛋白的诱导及纯化第51-53页
   ·免疫后血清中特异性抗体的检测第53-54页
   ·小鼠存活率第54页
   ·攻毒后排菌情况检测第54-55页
  3 讨论第55-58页
  参考文献第58-60页
  ABSTRACT第60-61页
 第三章 肠出血性大肠杆菌O157:H7感染牛羊试验第61-71页
  摘要第61-62页
  1 材料和方法第62-65页
   ·试剂及实验动物第62页
   ·攻毒前动物的处理第62页
   ·免疫磁珠分离细菌第62-63页
   ·重PCR鉴定O157:H7第63-64页
   ·菌液制备第64页
   ·动物分组和处理第64-65页
  2 结果第65-67页
   ·攻毒前PCR检测粪便结果第65页
   ·动物粪便排菌结果第65-67页
  3 讨论第67-69页
  参考文献第69-70页
  ABSTRACT第70-71页
全文总结第71-73页
常用试剂配制第73-77页
致谢第77页

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