摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-33页 |
1 引言 | 第11-12页 |
2 病原学 | 第12-13页 |
3 流行病学 | 第13-14页 |
4 临床特征与病理变化 | 第14页 |
5 致病因子 | 第14-19页 |
·外膜蛋白 | 第14-15页 |
·LPS | 第15页 |
·紧密粘附素(Intimin) | 第15页 |
·转位紧密粘附素受体(Tir) | 第15-16页 |
·Tir细胞骨架偶联蛋白(TccP) | 第16页 |
·菌毛 | 第16-17页 |
·ToxB | 第17页 |
·EspS蛋白 | 第17页 |
·志贺毒素 | 第17-18页 |
·溶血素 | 第18-19页 |
6 致病机理 | 第19-20页 |
7 检测方法 | 第20-23页 |
·细菌分离法 | 第20页 |
·免疫学方法 | 第20-21页 |
·分子生物学方法 | 第21-22页 |
·生物传感技术 | 第22-23页 |
·基因芯片技术 | 第23页 |
8 防治策略 | 第23-27页 |
·亚单位疫苗 | 第23-24页 |
·多糖结合疫苗 | 第24页 |
·细菌ghost疫苗 | 第24页 |
·转基因植物疫苗 | 第24-25页 |
·核酸疫苗 | 第25页 |
·重组活载体疫苗 | 第25页 |
·减毒活菌疫苗 | 第25-27页 |
参考文献 | 第27-33页 |
第二篇 实验研究 | 第33-71页 |
第一章 O157:H7 pCold Ⅰ-tir-tccp重组质粒的构建和融合蛋白的表达 | 第33-47页 |
摘要 | 第33-34页 |
1 材料和方法 | 第34-40页 |
·质粒和菌株 | 第34页 |
·主要试剂和仪器 | 第34页 |
·tir-tccp基因的克隆 | 第34-35页 |
·PCR扩增产物的回收 | 第35-36页 |
·目的片段tir-tccp的T-A克隆与鉴定 | 第36-38页 |
·pCold Ⅰ-tir-tccp重组质粒的构建 | 第38-39页 |
·Western blot鉴定 | 第39-40页 |
2 结果 | 第40-43页 |
·目的片段的PCR扩增 | 第40-41页 |
·重组质粒pCold Ⅰ-tir-tccp的酶切鉴定 | 第41页 |
·基因序列分析 | 第41-42页 |
·重组蛋白的表达及表达形式的鉴定 | 第42页 |
·重组蛋白的纯化及Western blotting | 第42-43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-46页 |
Abstract | 第46-47页 |
第二章 肠出血性大肠杆菌O157:H7 Intimin和Tir-Tccp蛋白对小鼠免疫保护性研究 | 第47-61页 |
摘要 | 第47-48页 |
1 材料与方法 | 第48-51页 |
·试剂 | 第48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·菌种和实验动物 | 第48页 |
·重组蛋白的诱导与纯化 | 第48-50页 |
·小鼠的免疫保护性试验 | 第50-51页 |
2 结果 | 第51-55页 |
·重组蛋白的诱导及纯化 | 第51-53页 |
·免疫后血清中特异性抗体的检测 | 第53-54页 |
·小鼠存活率 | 第54页 |
·攻毒后排菌情况检测 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-58页 |
参考文献 | 第58-60页 |
ABSTRACT | 第60-61页 |
第三章 肠出血性大肠杆菌O157:H7感染牛羊试验 | 第61-71页 |
摘要 | 第61-62页 |
1 材料和方法 | 第62-65页 |
·试剂及实验动物 | 第62页 |
·攻毒前动物的处理 | 第62页 |
·免疫磁珠分离细菌 | 第62-63页 |
·重PCR鉴定O157:H7 | 第63-64页 |
·菌液制备 | 第64页 |
·动物分组和处理 | 第64-65页 |
2 结果 | 第65-67页 |
·攻毒前PCR检测粪便结果 | 第65页 |
·动物粪便排菌结果 | 第65-67页 |
3 讨论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-70页 |
ABSTRACT | 第70-71页 |
全文总结 | 第71-73页 |
常用试剂配制 | 第73-77页 |
致谢 | 第77页 |