| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 符号说明 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-52页 |
| ·核苷类抗生素简介 | 第16-43页 |
| ·核苷类抗生素的分类 | 第16-22页 |
| (1) 基本同系物 | 第16页 |
| (2) 腺苷类 | 第16-17页 |
| (3) 鸟苷类 | 第17页 |
| (4) 咪唑并嘧啶核苷类 | 第17-18页 |
| (5) 四氢咪唑并二氮杂 类 | 第18页 |
| (6) C-核苷类 | 第18-19页 |
| (7) 氨磺酰核苷类 | 第19页 |
| (8) 3’-氨乙酰基-3’-脱氧腺苷类 | 第19页 |
| (9) 4’-氨乙酰基-4’-脱氧脱氧己糖胞嘧啶类 | 第19-20页 |
| (10) 配糖基核苷类 | 第20页 |
| (11) 肽核苷类 | 第20-21页 |
| (12) 高碳糖核苷 | 第21页 |
| (13) 脂肪酰基核苷类 | 第21页 |
| (14) 核苷酸 | 第21-22页 |
| (15) 其他 | 第22页 |
| ·核苷类抗生素生物合成的研究进展 | 第22-43页 |
| (1) 米多霉素生物合成基因簇 | 第23-27页 |
| (2) 多氧霉素生物合成基因簇 | 第27-31页 |
| (3) 嘌呤霉素生物合成基因簇 | 第31-33页 |
| (4) 杀绿霉素生物合成基因簇 | 第33-37页 |
| (5) 尼克霉素的生物合成基因簇 | 第37-42页 |
| (6) 链丝菌素的生物合成基因簇 | 第42-43页 |
| ·杀稻瘟菌素研究背景和简介 | 第43-52页 |
| ·杀稻瘟菌素的化学结构 | 第43页 |
| ·杀稻瘟菌素在农业方面的应用 | 第43-45页 |
| ·杀稻瘟菌素在基因工程方面的应用 | 第45-48页 |
| ·杀稻瘟菌素的生物合成途径的研究 | 第48-52页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第52-72页 |
| ·实验材料 | 第52-58页 |
| ·菌株 | 第52-53页 |
| ·质粒 | 第53-55页 |
| ·培养基和化学试剂 | 第55-57页 |
| ·本实验所用的 PCR 引物 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58-72页 |
| ·菌种培养及菌种保藏 | 第58-59页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第59页 |
| ·链霉菌总 DNA 的少量快速提取 | 第59-60页 |
| ·片段的回收 | 第60页 |
| ·放射性同位素杂交 | 第60-62页 |
| ·链霉菌原生质体的制备及 DNA 转化 | 第62页 |
| ·两亲本杂交介导的质粒 DNA 的跨属转移 | 第62-63页 |
| ·灰色产色链霉菌基因组文库的构建 | 第63-65页 |
| ·基因组文库的筛选 | 第65页 |
| ·生物信息学分析 | 第65-66页 |
| ·杀稻瘟菌素生物合成基因簇嫁接到变铅青链霉菌中 | 第66-67页 |
| ·双交换基因置换质粒的构建(以 pJTU412 为载体,目的基因被壮观霉素抗性基因替换) | 第67-68页 |
| ·双交换基因置换基因中断菌株的筛选(以 pJTU412 为载体,目的基因被壮观霉素抗性基因替换) | 第68页 |
| ·双交换基因置换突变菌株的筛选和确认 | 第68-69页 |
| ·杀稻瘟菌素及其衍生物的发酵 | 第69页 |
| ·杀稻瘟菌素的生物测定 | 第69-70页 |
| ·杀稻瘟菌素及其衍生化合物的 HPLC-MS 测定 | 第70页 |
| ·融合蛋白 SLBSD 的表达 | 第70-71页 |
| ·融合蛋白 SLBSD 的体外分析 | 第71-72页 |
| 第三章 杀稻瘟菌素生物合成基因簇在变铅青链霉菌中的异源表达及 SLBSD 基因的发现 | 第72-91页 |
| ·杀稻瘟菌素生物合成基因簇下游基因的测序和生物信息学分析 | 第72-73页 |
| ·杀稻瘟菌素生物合成基因簇在变铅青链霉菌中的异源表达 | 第73-76页 |
| ·Streptomyces lividans 中发现一种杀稻瘟菌素脱氨酶(blasticidin S deaminase)及其功能分析 | 第76-86页 |
| ·在 Streptomyces lividans HXY16 中发现一种杀稻瘟菌素脱氨酶 SLBSD | 第76-79页 |
| ·体外分析 SLBSD 的功能 | 第79-82页 |
| ·SLBSD 体内功能分析 | 第82-85页 |
| ·SLBSD 的功能讨论 | 第85-86页 |
| ·杀稻瘟菌素的异源表达 | 第86-87页 |
| ·亚铁离子对杀稻瘟菌素异源表达的影响 | 第87-90页 |
| ·杀稻瘟菌素异源表达的结果讨论 | 第90-91页 |
| 第四章 杀稻瘟菌素生物合成基因簇中关键基因的体内功能分析 | 第91-115页 |
| ·blsL的体内功能分析 | 第91-97页 |
| ·blsL 的基因置换 | 第91-93页 |
| ·blsL 的基因回补 | 第93-95页 |
| ·blsL 功能的分析 | 第95-97页 |
| ·blsF的体内功能分析 | 第97-102页 |
| ·blsF 的基因置换 | 第97-100页 |
| ·blsF 功能的分析 | 第100-102页 |
| ·blsE的体内功能分析 | 第102-107页 |
| ·blsE 的基因置换 | 第102-105页 |
| ·blsE 的功能分析 | 第105-107页 |
| ·blsI的体内功能分析 | 第107-115页 |
| ·blsI 的基因置换 | 第107-111页 |
| ·blsI 的回补 | 第111-112页 |
| ·blsI 的功能分析 | 第112-115页 |
| 第五章 杀稻瘟菌素生物合成途径的重推导 | 第115-118页 |
| ·杀稻瘟菌素与米多霉素生物合成基因簇的比较 | 第115-116页 |
| ·杀稻瘟菌素生物合成途径的修订 | 第116-118页 |
| 第六章 总结与展望 | 第118-122页 |
| ·本工作主要的创新点 | 第118页 |
| ·进一步工作和展望 | 第118-122页 |
| 参考文献 | 第122-130页 |
| 致谢 | 第130-132页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第132-135页 |
| 附件 | 第135页 |