| 中文摘要 | 第1-21页 |
| ABSTRACT | 第21-25页 |
| 符号说明 | 第25-27页 |
| 第一章 前言 | 第27-50页 |
| 1 HSA的性质和结构 | 第27-28页 |
| 2 HSA的体内合成、分布和代谢 | 第28-30页 |
| 3 HSA的生理功能 | 第30-32页 |
| ·维持胶体渗透压 | 第30页 |
| ·结合和运输作用 | 第30-31页 |
| ·抗氧化作用 | 第31页 |
| ·循环保护作用 | 第31-32页 |
| ·毛细血管膜通透性调节作用和神经保护作用 | 第32页 |
| 4 HSA的结合性质 | 第32-34页 |
| ·脂肪酸结合位点 | 第32-33页 |
| ·药物结合位点 | 第33-34页 |
| ·甲状腺素结合位点 | 第34页 |
| ·金属离子结合位点 | 第34页 |
| 5 HSA的来源 | 第34-36页 |
| ·人血浆来源的HSA | 第34-35页 |
| ·重组人血清白蛋白 | 第35-36页 |
| 6 HSA的临床应用和存在的不足 | 第36-38页 |
| ·临床应用 | 第36页 |
| ·HSA在临床应用方面的局限性 | 第36-38页 |
| 7 HSA的结构改造 | 第38-39页 |
| ·半衰期延长的HSA变异体 | 第38页 |
| ·具有抗菌活性的HSA变异体 | 第38页 |
| ·具有抗氧化特性的HSA变异体 | 第38-39页 |
| ·携氧型HSA突变体 | 第39页 |
| 8 蛋白质和多肽的PEG修饰反应 | 第39-45页 |
| ·PEG随机修饰 | 第40页 |
| ·PEG定点修饰 | 第40-45页 |
| 9 PEG修饰产物的分离纯化 | 第45-47页 |
| ·分子排阻层析 | 第45-46页 |
| ·疏水作用层析 | 第46页 |
| ·离子交换层析 | 第46-47页 |
| ·超滤 | 第47页 |
| 10 PEG修饰剂和PEG化蛋白的分析鉴定 | 第47-49页 |
| ·PEG修饰剂的分析鉴定 | 第47-49页 |
| ·PEG-蛋白结合物的的分析鉴定 | 第49页 |
| 11 本课题拟解决的问题 | 第49-50页 |
| 第二章 人血清白蛋白的分离纯化及其聚乙二醇修饰产物的制备 | 第50-87页 |
| 第一节 人血白蛋白的分离纯化 | 第50-56页 |
| 1 材料 | 第50-52页 |
| ·试剂 | 第50-51页 |
| ·仪器 | 第51页 |
| ·溶液配制 | 第51-52页 |
| 2 方法 | 第52-53页 |
| ·Sephacryl S-200凝胶柱层析对HSA的分离纯化 | 第52页 |
| ·超滤 | 第52页 |
| ·SDS-PAGE检测纯度 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-55页 |
| ·Sephacryl S-200凝胶柱层析对HSA的分离纯化 | 第53页 |
| ·纯度检测 | 第53-55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 第二节 人血清白蛋白Cys34定点PEG修饰反应及修饰产物的分离纯化 | 第56-64页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| ·试剂 | 第56页 |
| ·仪器 | 第56页 |
| ·溶液配制 | 第56-57页 |
| 2 方法 | 第57-59页 |
| ·Cys34定点PEG修饰反应条件的优化 | 第57-58页 |
| ·PEG-cys34HSA的分离纯化 | 第58-59页 |
| 3 结果 | 第59-62页 |
| ·最佳修饰条件的确定 | 第59-60页 |
| ·PEG-cys34HSA的分离纯化 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 第三节 人血清白蛋白N-末端氨基的PEG定点修饰及修饰产物的分离纯化 | 第64-79页 |
| 1 材料 | 第64-65页 |
| ·试剂 | 第64页 |
| ·仪器 | 第64页 |
| ·溶液配制 | 第64-65页 |
| 2 方法 | 第65-67页 |
| ·N-末端氨基的PEG定点修饰反应条件的优化 | 第65-67页 |
| ·N-末端氨基的PEG定点修饰产物的分离纯化 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-77页 |
| ·N-末端氨基的PEG定点修饰反应条件优化 | 第67-76页 |
| ·N-末端氨基PEG定点修饰产物的分离纯化 | 第76-77页 |
| 4 讨论 | 第77-78页 |
| 5 结论 | 第78-79页 |
| 第四节 人血清白蛋白的随机修饰及修饰产物的分离纯化 | 第79-87页 |
| 1 材料 | 第79页 |
| ·试剂 | 第79页 |
| ·仪器 | 第79页 |
| 2 方法 | 第79-81页 |
| ·PEG-6000的活化 | 第79页 |
| ·人血清白蛋白的随机修饰反应 | 第79-80页 |
| ·不同修饰率的随机修饰产物的分离纯化 | 第80-81页 |
| ·自由氨基修饰率测定 | 第81页 |
| 3 结果 | 第81-86页 |
| ·PEG-6000的活化 | 第81页 |
| ·人血清白蛋白的随机修饰反应 | 第81-84页 |
| ·不同修饰率的随机修饰产物的分离纯化 | 第84-85页 |
| ·自由氨基修饰率测定 | 第85-86页 |
| 4 讨论及结论 | 第86-87页 |
| 第三章 人血清白蛋白及其修饰产物的性质测定 | 第87-96页 |
| 1 材料 | 第87页 |
| ·试剂 | 第87页 |
| ·仪器 | 第87页 |
| ·溶液配制 | 第87页 |
| 2 方法 | 第87-89页 |
| ·HSA及其修饰产物的二级结构 | 第87-88页 |
| ·HSA及其修饰产物的流体力学半径 | 第88页 |
| ·PEG-cys34HSA修饰位点确定 | 第88页 |
| ·N-terminal PEG-HSA的分子量测定 | 第88-89页 |
| 3 结果 | 第89-94页 |
| ·HSA及其修饰产物的二级结构 | 第89-90页 |
| ·HSA及其修饰产物的流体力学半径 | 第90-91页 |
| ·PEG-cys34HSA的修饰位点鉴定 | 第91-92页 |
| ·N-terminal PEG-HSA的相对分子量的确定 | 第92-94页 |
| 4 讨论及结论 | 第94-96页 |
| 第四章 人血清白蛋白及其修饰产物的药物结合性质研究 | 第96-118页 |
| 1 材料 | 第96-98页 |
| ·试剂 | 第96页 |
| ·仪器 | 第96-97页 |
| ·溶液配制 | 第97-98页 |
| 2 方法 | 第98-102页 |
| ·HSA及其PEG修饰产物与CM5芯片的偶联 | 第98-99页 |
| ·HSA及其PEG修饰产物与小分子药物的亲和力测试 | 第99-102页 |
| 3 结果 | 第102-116页 |
| ·蛋白质的浓度测定 | 第102-103页 |
| ·HSA与药物的稳态亲和测试 | 第103-108页 |
| ·PEG-cys34HSA与药物的稳态亲和测试 | 第108-111页 |
| ·N-terminal PEG-HSA与药物的稳态亲和测试 | 第111-113页 |
| ·Random PEG-HSA与药物的稳态亲和测试 | 第113-116页 |
| 4 讨论及结论 | 第116-118页 |
| 第五章 人血清白蛋白及其修饰产物在小鼠体内的药代动力学和组织分布研究 | 第118-130页 |
| 1 材料 | 第118-119页 |
| ·试剂 | 第118页 |
| ·仪器 | 第118页 |
| ·动物 | 第118-119页 |
| 2 方法 | 第119-120页 |
| ·HSA及其修饰产物的~(125)I放射性标记 | 第119-120页 |
| ·供试液的配制与给药 | 第120页 |
| ·HSA及其修饰物在小鼠体内药代动力学和组织分布研究 | 第120页 |
| ·结果统计学分析 | 第120页 |
| 3 结果 | 第120-127页 |
| ·HSA及其修饰产物的标记结果 | 第120-122页 |
| ·HSA及其修饰产物在小鼠体内的药代动力学和组织分布研究 | 第122-127页 |
| 4 讨论 | 第127-129页 |
| 5 总结 | 第129-130页 |
| 第六章 人血清白蛋白及其聚乙二醇修饰产物在急性肺损伤模型中的毛细血管透过率和对脓毒症的药效学研究 | 第130-143页 |
| 1 材料 | 第130-131页 |
| ·试剂 | 第130-131页 |
| ·仪器 | 第131页 |
| ·动物 | 第131页 |
| 2 方法 | 第131-134页 |
| ·HSA及其PEG修饰产物在急性肺损伤模型中的毛细血管透过率研究 | 第131-133页 |
| ·HSA和定点修饰产物PEG-cys34HSA对脓毒血症的药效学研究 | 第133-134页 |
| 3 结果 | 第134-139页 |
| ·HSA及其PEG修饰产物在急性肺损伤模型中的毛细血管透过率研究 | 第134-136页 |
| ·HSA和定点修饰产物PEG-cys34HSA对脓毒症的药效学研究 | 第136-139页 |
| 4 讨论 | 第139-142页 |
| 5 结论 | 第142-143页 |
| 总结与展望 | 第143-145页 |
| 1 本研究的主要结论 | 第143-144页 |
| 2 展望 | 第144-145页 |
| 参考文献 | 第145-161页 |
| Article 1 | 第161-170页 |
| Artical 2 | 第170-178页 |
| 致谢 | 第178-180页 |
| 博士期间发表的论文及申请的专利 | 第180-181页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第181页 |
