| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-27页 |
| ·禽呼肠孤病概述 | 第10-11页 |
| ·禽呼肠孤病流行病学 | 第11页 |
| ·禽呼肠孤病毒病原学 | 第11-12页 |
| ·禽呼肠孤病毒诊断技术 | 第12-13页 |
| ·病原学诊断方法 | 第12页 |
| ·血清学诊断方法 | 第12-13页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第13页 |
| ·预防与控制 | 第13-14页 |
| ·禽传染性支气管炎综述 | 第14-17页 |
| ·传染性支气管炎病原学 | 第15页 |
| ·传染性支气管炎的培养特性 | 第15-16页 |
| ·传染性支气管炎的生物特性 | 第16页 |
| ·鸡传染性支气管炎的诊断 | 第16-17页 |
| ·病毒分离 | 第16页 |
| ·新城疫干扰实验 | 第16-17页 |
| ·血清学实验 | 第17页 |
| ·分子生物学技术 | 第17页 |
| ·环介导等温扩增法（LAMP）概述 | 第17-27页 |
| ·LAMP 引物设计 | 第17-19页 |
| ·LAMP 反应体系 | 第19页 |
| ·LAMP 反应过程 | 第19-21页 |
| ·LAMP 哑铃状模板合成阶段 | 第19-21页 |
| ·循环扩增阶段、延伸和再循环阶段 | 第21页 |
| ·LAMP 检测结果判定 | 第21-22页 |
| ·LAMP 的优势 | 第22-23页 |
| ·LAMP 检测技术的应用 | 第23-25页 |
| ·细菌的检测 | 第23-24页 |
| ·病毒的检测 | 第24-25页 |
| ·寄生虫的检测 | 第25页 |
| ·LAMP 的发展前景 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-42页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·试验用菌株与材料 | 第27页 |
| ·主要试剂以及试剂盒 | 第27页 |
| ·琼脂糖电泳所用溶液 | 第27页 |
| ·转化所需试剂 | 第27-28页 |
| ·LAMP 反应所必需的溶液试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-42页 |
| ·引物的设计与合成 | 第29-32页 |
| ·病毒 RNA 提取 | 第32页 |
| ·阳性质粒的构建 | 第32-36页 |
| ·禽呼肠孤病毒 p10 基因质粒 PCR 引物设计 | 第32-33页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第33-34页 |
| ·载体的连接 | 第34页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第34页 |
| ·连接产物的 PCR 鉴定 | 第34页 |
| ·重组质粒测序鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的提取 | 第35页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·IBV 的阳性质粒构建 | 第36页 |
| ·LAMP 反应的建立 | 第36-38页 |
| ·LAMP 引物溶解 | 第36-37页 |
| ·LAMP 检测 Bst DNA 聚合酶最佳浓度的确定 | 第37页 |
| ·LAMP 检测甜菜碱 Betaine 最佳浓度的确定 | 第37页 |
| ·LAMP 检测 Mg2+工作浓度和工作时间的确定 | 第37-38页 |
| ·LAMP 检测反应温度的确定 | 第38页 |
| ·LAMP 检测 IBV 反应体系的确定 | 第38页 |
| ·特异性试验 | 第38页 |
| ·敏感性试验 | 第38-39页 |
| ·应用荧光显色剂判定结果 | 第39-40页 |
| ·ARV-LAMP（SYBR Green I,钙黄绿素）检测 | 第39页 |
| ·IBV-LAMP（HNB）检测 | 第39-40页 |
| ·临床样本的检测 | 第40-42页 |
| 3 结果 | 第42-50页 |
| ·ARVp10 和 IBV 阳性质粒的构建 | 第42页 |
| ·LAMP 检测方法建立 | 第42-50页 |
| ·LAMP 检测 ARV 和 IBV 方法工作温度的确定 | 第42-43页 |
| ·LAMP 检测 ARV 和 IBV Mg2+最佳反应浓度和时间的确定 | 第43页 |
| ·LAMP 检测 ARV 和 IBV 甜菜碱工作浓度的确定 | 第43-45页 |
| ·特异性试验 | 第45-46页 |
| ·敏感性试验 | 第46-47页 |
| ·LAMP 扩增产物的荧光染料检测 | 第47-49页 |
| ·SYBR Green I 染料显色结果 | 第47-48页 |
| ·钙黄绿素染料显色结果 | 第48-49页 |
| ·IBV-LAMP 扩增产物的荧光染料（HNB）检测 | 第49页 |
| ·样品检测 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第60页 |
