摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-39页 |
·猪细小病毒的研究进展 | 第13-27页 |
·PPV 病原学研究 | 第13-16页 |
·发病机理 | 第16页 |
·分子生物学 | 第16-20页 |
·流行病学及流行状况 | 第20-22页 |
·PPV 的诊断 | 第22页 |
·防制 | 第22-27页 |
·猪圆环病毒的研究进展 | 第27-39页 |
·病原学 | 第27-28页 |
·流行病学 | 第28-29页 |
·致病机理 | 第29-31页 |
·分子生物学特征 | 第31-35页 |
·PCV-2 检测方法的研究 | 第35-36页 |
·PCV-2 疫苗研究进展 | 第36-39页 |
2 材料与方法 | 第39-59页 |
·材料 | 第39页 |
·试剂和仪器 | 第39-40页 |
·试剂 | 第39页 |
·主要仪器 | 第39-40页 |
·试剂的配制 | 第40-42页 |
·LB 液体培养基的配制 | 第40页 |
·LB 固体培养基的配制 | 第40页 |
·DMEM 培养液的配制 | 第40页 |
·细胞生长液的配制 | 第40-41页 |
·细胞维持液的配制 | 第41页 |
·细胞消化液的配制 | 第41页 |
·Lysis Buffer 的配制 | 第41页 |
·1.2%SDS 的配制 | 第41页 |
·20mM EDTA 的配制 | 第41页 |
·20mg/ml 蛋白酶 K 的配制 | 第41页 |
·5MNaCl 的配制 | 第41页 |
·2.5M NaAC 3H2O 的配制 | 第41页 |
·阿氏液的配制 | 第41页 |
·1%豚鼠红细胞的配制 | 第41-42页 |
·0.1M CaCl2贮存液的配制 | 第42页 |
·试验方法 | 第42-59页 |
·PPV-JT 复制型 DNA(RF-DNA)的获得 | 第42-44页 |
·pPPV-JT 感染性克隆的构建及鉴定 | 第44-50页 |
·pPPV-JT 转染 PK-15 细胞及检测 | 第50-54页 |
·表达 PCV-2 Cap 蛋白主要抗原位点重组 PPV 的构建 | 第54-55页 |
·pPPV-Cap 转染 PK-15 细胞及检测 | 第55-57页 |
·PPV-Cap 的免疫原性研究 | 第57-59页 |
3 结果与分析 | 第59-68页 |
·RF-DNA 的提取 | 第59-60页 |
·pPPV-H 重组质粒的酶切鉴定结果 | 第60页 |
·pPPV-E 重组质粒的酶切鉴定结果 | 第60页 |
·pPPV-JT 重组质粒的酶切鉴定结果 | 第60页 |
·PPV-JT 株序列分析结果 | 第60-64页 |
·pPPV-JT 转染 PK-15 细胞检测结果 | 第64-65页 |
·PPV-RF VP2 基因的 PCR 扩增及鉴定结果 | 第64-65页 |
·PPV-RF 理化性质的鉴定结果 | 第65页 |
·特异性试验结果 | 第65页 |
·PCV-2 Cap 蛋白主要抗原位点片段的克隆与序列分析结果 | 第65页 |
·pPPV-Cap 的 PCR 扩增及酶切鉴定结果 | 第65-66页 |
·PPV-Cap 转染 PK-15 细胞的检测结果 | 第66-67页 |
·PPV-Cap 理化特征鉴定结果 | 第66页 |
·PPV-Cap 接种细胞的 RT-PCR 检测结果 | 第66页 |
·PPV-Cap 接种细胞 IFA 检测结果 | 第66-67页 |
·PPV-Cap 的免疫原性研究 | 第67-68页 |
·PPV 抗体水平检测结果 | 第67页 |
·PCV-2 抗体水平检测结果 | 第67-68页 |
4. 讨论 | 第68-74页 |
·RF-DNA 的提取 | 第68-69页 |
·PPV 基因组分析 | 第69-71页 |
·细小病毒载体 | 第71-72页 |
·目的基因的选择 | 第72-73页 |
·重组质粒的转染 | 第73-74页 |
·免疫途径及免疫程序 | 第74页 |
·PPV-Cap 的免疫原性研究 | 第74页 |
5 结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第91页 |