| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 前言 | 第10-22页 |
| 1 眼的发育 | 第10-12页 |
| 2 晶状体的诱导与发生 | 第12-13页 |
| 3 影响晶状体发育的主要转录调控因子 | 第13-19页 |
| ·Pax6 | 第14-16页 |
| ·Sox基因家族 | 第16-18页 |
| ·Large Mafs | 第18页 |
| ·Prox1 | 第18-19页 |
| ·其他转录因子 | 第19页 |
| 4 实验动物介绍 | 第19-21页 |
| 5 本实验的研究思路及意义 | 第21-22页 |
| 第一章 花背蟾蜍转录因子Pax6 variant基因克隆与序列分析 | 第22-47页 |
| 一 实验仪器与材料 | 第22-26页 |
| 1 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2 主要生物信息学软件及数据库 | 第22-23页 |
| 3 主要试剂 | 第23页 |
| 4 实验材料 | 第23-24页 |
| 5 引物 | 第24-25页 |
| 6 大肠杆菌DH5a | 第25页 |
| 7 pMD-18T载体 | 第25页 |
| 8 各种溶液及培养基的配制 | 第25-26页 |
| 二 实验方法 | 第26-32页 |
| 1 Pax6 variant部分片段的扩增与克隆 | 第26-29页 |
| 2 RACE | 第29-31页 |
| 3 生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 三 实验结果与分析 | 第32-45页 |
| 1 RNA提取电泳检测 | 第32页 |
| 2 Pax6中间部分序列扩增结果 | 第32-33页 |
| 3 RACE结果 | 第33-35页 |
| 4 生物信息学分析 | 第35-45页 |
| 四 讨论 | 第45-47页 |
| 1 RNA提取 | 第45页 |
| 2 克隆取材时期的选择 | 第45页 |
| 3 Pax6 variant的同源性分析 | 第45-47页 |
| 第二章 花背蟾蜍Pax6和Pax6 variant原核表达载体的构建和蛋白表达纯化 | 第47-57页 |
| 一 实验仪器与材料 | 第47-49页 |
| 1 主要实验仪器 | 第47页 |
| 2 引物 | 第47-48页 |
| 3 pGEX-4T-3质粒 | 第48页 |
| 4 大肠杆菌Rosetta(DE3) | 第48-49页 |
| 5 各种溶液及培养基的配制 | 第49页 |
| 二 实验方法 | 第49-52页 |
| 1 Pax6和Pax6 variant差异部分片段的扩增与克隆 | 第49-50页 |
| 2 Pax6和Pax6 variant原核表达载体构建 | 第50-51页 |
| 3 镍离子亲和层析蛋白纯化 | 第51-52页 |
| 三 结果与分析 | 第52-55页 |
| 1 Pax6和Pax6 variant基因扩增 | 第52-53页 |
| 2.重组质粒鉴定 | 第53-54页 |
| 3 重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第54-55页 |
| 4 融合蛋白的纯化 | 第55页 |
| 四 讨论 | 第55-57页 |
| 1 原核表达系统的选择 | 第55-56页 |
| 2 融合蛋白纯化 | 第56-57页 |
| 第三章 花背蟾蜍转录因子Pax6和Pax6 variant抗体制备及在晶状体发育中的表达 | 第57-64页 |
| 一 实验仪器与材料 | 第57页 |
| 1 实验动物 | 第57页 |
| 2 主要试剂材料 | 第57页 |
| 3 各种溶液试剂 | 第57页 |
| 二 实验方法 | 第57-60页 |
| 1 制备抗体 | 第57-58页 |
| 2 ELISA | 第58页 |
| 3 Western Blot | 第58-60页 |
| 三 结果与分析 | 第60页 |
| 1 ELISA检测抗体效价 | 第60页 |
| 2 Pax6和Pax6 variant在晶状体发育中的表达 | 第60页 |
| 四 讨论 | 第60-64页 |
| 1 多克隆抗体的制备 | 第60-61页 |
| 2 多克隆抗体的鉴定 | 第61页 |
| 3 Pax6在晶状体发育中的表达 | 第61-62页 |
| 4 Pax6 variant在晶状体发育中的表达 | 第62-64页 |
| 总结 | 第64-65页 |
| 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 附录1 花背蟾蜍Pax6 variant基因在Genebank的登录信息 | 第70-72页 |
| 附录2 缩略词表 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
