中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
1 引言 | 第10-25页 |
·叶绿体的起源学说 | 第10-12页 |
·内共生起源学说 | 第10-11页 |
·非共生起源学说 | 第11-12页 |
·拟南芥叶绿体基因组的结构和表达调控 | 第12-16页 |
·拟南芥叶绿体基因组结构 | 第12-14页 |
·叶绿体基因的转录 | 第14-15页 |
·叶绿体基因的转录后加工 | 第15-16页 |
·PPR 蛋白家族 | 第16-21页 |
·PPR 家族蛋白的特点 | 第17-18页 |
·拟南芥 PPR 家族蛋白的分类 | 第18-20页 |
·PPR 家族蛋白的功能 | 第20-21页 |
·拟南芥 PPR 蛋白 PDM1 的研究进展 | 第21-24页 |
·本实验室之前的研究结果 | 第21-24页 |
·PDM1 缺失突变体的表型及 PDM1 蛋白亚细胞定位 | 第21-23页 |
·PDM1 影响到了拟南芥叶绿体 rpoA 前体 mRNA 的加工 | 第23-24页 |
·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
2 材料和方法 | 第25-45页 |
·材料 | 第25-27页 |
·植物材料 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·菌株和质粒 | 第25-26页 |
·抗生素 | 第26页 |
·培养基配方 | 第26页 |
·其他 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-45页 |
·拟南芥种植,转染与转基因植株的筛选 | 第27-29页 |
·拟南芥无菌培养 | 第27-28页 |
·拟南芥土壤种植和拟南芥转染 | 第28页 |
·拟南芥转基因植株的筛选 | 第28-29页 |
·感受态的制备,转化与转化子的鉴定 | 第29-31页 |
·热击 E.coli 感受态的制备 | 第29-30页 |
·大肠杆菌的转化 | 第30页 |
·质粒的小量制备 | 第30页 |
·PCR 鉴定体系及酶切鉴定体系 | 第30-31页 |
·农杆菌感受态的制备,转化 | 第31-32页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
·农杆菌的遗传转化 | 第31-32页 |
·载体构建 | 第32页 |
·DNA 和 RNA 的抽取 | 第32-33页 |
·DNA 的抽取 | 第32-33页 |
·RNA 的抽取 | 第33页 |
·Northern blot | 第33-36页 |
·Dig 探针的制备: | 第33页 |
·RNA 甲醛变性凝胶电泳 | 第33-34页 |
·RNA 甲醛变性胶转膜 | 第34页 |
·预杂交和杂交 | 第34页 |
·洗膜,封闭与显影检测 | 第34-36页 |
·Western blot | 第36-39页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第37页 |
·样品的印迹(转膜) | 第37-38页 |
·免疫反应 | 第38-39页 |
·RNA 免疫共沉淀技术(RIP) | 第39-43页 |
·拟南芥幼苗的种植和固定 | 第39-40页 |
·特定的 RNA 蛋白复合物的免疫沉淀反应 | 第40-43页 |
·蛋白质免疫共沉淀技术(Co-IP) | 第43-45页 |
3 结果和讨论 | 第45-56页 |
·拟南芥 PDM1 基因编码一个 PLS 亚家族蛋白 | 第45-46页 |
·拟南芥 PDM1 蛋白的缺失影响 PEP 活性 | 第46-47页 |
·pdm1-1 突变体中 rpoA 前体 mRNA 的加工缺陷导致 RpoA 蛋白的积累减少 | 第47-49页 |
·PDM1-FLAG 转基因植株的筛选和互补鉴定 | 第49-50页 |
·PDM1 蛋白与 rpoA 多顺反子转录本相结合 | 第50-51页 |
·叶绿体内其他多顺反子转录模式的检测 | 第51-52页 |
·与 PDM1 相互作用的其他蛋白质的检测 | 第52页 |
·讨论 | 第52-55页 |
·拟南芥 PDM1 蛋白对叶绿体发育具有重要作用 | 第53-54页 |
·PDM1 参与了 rps11-rpoA 之间的核酸内切过程 | 第54-55页 |
·展望 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
已发表论文 | 第61页 |