| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-17页 |
| 1. c-Abl 非受体酪氨酸激酶 | 第11-13页 |
| 2. HAX-1 的结构与功能 | 第13-16页 |
| 3. 本课题研究的科学问题 | 第16-17页 |
| 材料与方法 | 第17-27页 |
| 1. 菌株、细胞株及质粒 | 第17页 |
| 2. 分子生物学工具酶 | 第17页 |
| 3. HAX-1 全长基因的获得 | 第17页 |
| 4. 引物设计、载体构建及序列测定 | 第17-20页 |
| ·真核表达载体Flag-HAX-1 及其突变体所用引物 | 第17-18页 |
| ·真核表达载体Myc-HAX-1 及其突变体所用引物 | 第18-19页 |
| ·原核表达载体GST-HAX-1 所用引物 | 第19页 |
| ·pSR-GFP-HAX-1siRNA 载体构建 | 第19页 |
| ·扩增HAX-1 特异性引物 | 第19页 |
| ·扩增c-Abl 特异性引物 | 第19页 |
| ·扩增人β-actin 特异性引物 | 第19-20页 |
| 5. 转染质粒制备 | 第20页 |
| 6. 细胞培养、冻存与转染 | 第20-21页 |
| 7.谷胱甘肽 S 转移酶(Glutathion S-transferase, GST)融合蛋白制备 | 第21页 |
| 8.免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)与免疫印迹(Immunoblot,IB) | 第21-23页 |
| 9. 体外结合实验 | 第23页 |
| 10. 蛋白质浓度测定 | 第23页 |
| 11. Pulse-Chase 实验 | 第23-24页 |
| 12.细胞总 RNA 提取及 RT-PCR | 第24页 |
| 13. 细胞质、细胞核蛋白分离 | 第24-25页 |
| 14. 细胞免疫染色 | 第25页 |
| 15. 流式细胞技术检测细胞凋亡率 | 第25页 |
| 16. 细胞增殖实验 | 第25-26页 |
| 17.细胞内活性氧检测 | 第26页 |
| 18. 其它 | 第26-27页 |
| 结果 | 第27-49页 |
| 1. HAX-1 与c-Abl 形成复合物 | 第27-28页 |
| 2. c-Abl 通过SH3 和SH2 结构域与HAX-1 结合 | 第28-29页 |
| 3.HAX-1 与 c-Abl 相互作用不依赖于 PXXP 基序 | 第29-31页 |
| 4. c-Abl 通过SH3 结构域与HAX-1 C 端结合 | 第31-32页 |
| 5.建立 HAX-1siRNA 稳定细胞株 | 第32-33页 |
| 6. HAX-1 参与细胞内c-Abl 蛋白表达水平的调控 | 第33-37页 |
| ·HAX-1 下调细胞内c-Abl 蛋白表达水平 | 第33-34页 |
| ·HAX-1 依赖 C 端结构域下调 c-Abl 蛋白表达 | 第34-36页 |
| ·HAX-1 导致细胞质、细胞核内c-Abl 蛋白水平降低 | 第36-37页 |
| 7. HAX-1 增强c-Abl 酪氨酸磷酸化水平 | 第37-39页 |
| 8. HAX-1 调控细胞内 c-Abl 蛋白表达水平 | 第39-42页 |
| ·HAX-1 在转录后水平调节c-Abl 表达 | 第39页 |
| ·HAX-1 影响c-Abl 蛋白稳定性 | 第39-41页 |
| ·HAX-1 对c-Abl 蛋白水平的调节不依赖激酶活性 | 第41页 |
| ·HAX-1 通过蛋白酶体途径调节 c-Abl 蛋白水平 | 第41-42页 |
| 9. HAX-1 通过c-Abl 实现抗细胞凋亡 | 第42-44页 |
| 10. HAX-1、c-Abl 参与细胞氧化应激调节 | 第44-46页 |
| 11. HAX-1、c-Abl 影响细胞内ROS 水平、线粒体跨膜电位 | 第46-49页 |
| 讨论 | 第49-55页 |
| 1. HAX-1 与c-Abl 之间的相互作用 | 第49-50页 |
| 2. HAX-1 下调细胞内 c-Abl 蛋白表达 | 第50-52页 |
| 3. HAX-1 增强细胞内c-Abl 酪氨酸磷酸化水平 | 第52页 |
| 4. HAX-1 参与DNA 损伤诱导的细胞凋亡 | 第52页 |
| 5. HAX-1 与 c-Abl 共同参与细胞氧化应激反应 | 第52-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
