摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-15页 |
前言 | 第15-17页 |
第一篇 文献综述 | 第17-68页 |
第一章 捻转血矛线虫功能基因组研究进展 | 第17-45页 |
1. 捻转血矛线虫概述 | 第17-18页 |
2. 捻转血矛线虫基因组研究方法 | 第18-26页 |
·RNA干扰技术 | 第18-19页 |
·mRNA差异显示技术 | 第19页 |
·代表性差异分析 | 第19-20页 |
·抑制性消减杂交 | 第20-22页 |
·微阵列技术 | 第22页 |
·基因表达系列分析 | 第22-23页 |
·限制性片段长度多态性 | 第23-24页 |
·实时定量多聚酶链反应 | 第24-25页 |
·其他方法 | 第25-26页 |
3. 几种重要的捻转血矛线虫基因研究进展 | 第26-32页 |
·重要的抗药性基因 | 第26-28页 |
·发育调控基因 | 第28-30页 |
·疫苗候选基因 | 第30-32页 |
4. 展望 | 第32页 |
参考文献 | 第32-45页 |
第二章 丝氨酸蛋白酶抑制因子的研究进展 | 第45-68页 |
1. 丝氨酸蛋白酶抑制因子的分类 | 第46-51页 |
·Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子家族 | 第46-47页 |
·SERPIN型丝氨酸蛋白酶抑制因子 | 第47-48页 |
·α2-巨球蛋白 | 第48页 |
·Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制因子 | 第48-49页 |
·OV型丝氨酸蛋白酶抑制因子 | 第49-51页 |
2. 丝氨酸蛋白酶抑制因子的生理功能与应用 | 第51-56页 |
·激活Toll信号通路 | 第51-52页 |
·性别与发育调节 | 第52-53页 |
·血凝与血餐消化 | 第53-54页 |
·参与免疫调节 | 第54-56页 |
3. 寄生虫SERPIN研究 | 第56页 |
4. 捻转血矛线虫SERPIN的研究现状 | 第56页 |
5. 展望 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
第二篇 实验研究 | 第68-150页 |
第三章 捻转血矛线虫serpin基因的克隆与序列分析 | 第69-99页 |
1 材料与方法 | 第70-79页 |
·材料 | 第70-71页 |
·方法 | 第71-79页 |
2. 结果 | 第79-86页 |
·5'-RACE PCR和3'-RACE PCR | 第79-80页 |
·H.contortus serpin全基因序列拼接和ORF确定 | 第80-81页 |
·H.contortus serpin序列比对 | 第81-83页 |
·hcserpin序列的结构预测 | 第83-85页 |
·hcserpin序列聚类分析 | 第85-86页 |
3 讨论 | 第86-93页 |
参考文献 | 第93-96页 |
附录 | 第96-99页 |
第四章 hcserpin的原核表达与重组蛋白纯化 | 第99-120页 |
1 材料与方法 | 第100-108页 |
·材料 | 第101-103页 |
·方法 | 第103-108页 |
2 结果 | 第108-114页 |
·ORF基因克隆 | 第108-109页 |
·重组质粒pET32a-hcserpin的构建与鉴定 | 第109-111页 |
·rHCSERPIN蛋白的表达与纯化 | 第111-112页 |
·抗血清制备与H.contortus体内天然HCSERPIN检测 | 第112-113页 |
·Western blotting检测H.contortus天然HCSERPIN和感染山羊血清抗rHCSERPIN抗体 | 第113-114页 |
3 讨论 | 第114-115页 |
参考文献 | 第115-119页 |
附录 | 第119-120页 |
第五章 RHCSERPIN的抗胰蛋白酶作用及最适反应条件 | 第120-130页 |
1 材料与方法 | 第121-122页 |
·材料 | 第121页 |
·方法 | 第121-122页 |
2 结果 | 第122-125页 |
·rHCSERPIN对Trypsin的抑制 | 第122-123页 |
·rHCSERPIN的热稳定性 | 第123-124页 |
·rHCSERPIN的pH稳定范围 | 第124-125页 |
3 讨论 | 第125-127页 |
参考文献 | 第127-129页 |
附录 | 第129-130页 |
第六章 RHCSERPIN的体外抗凝血活性 | 第130-140页 |
1 材料与方法 | 第131-132页 |
·材料 | 第131页 |
·方法 | 第131-132页 |
2 结果 | 第132-134页 |
·兔血体外抗凝血时间 | 第132-133页 |
·复钙时间 | 第133-134页 |
3 讨论 | 第134-136页 |
参考文献 | 第136-138页 |
附录 | 第138-140页 |
第七章 HCSERPIN在H.CONTORTUS体内的分布 | 第140-150页 |
1 材料与方法 | 第141-143页 |
·材料 | 第141-142页 |
·方法 | 第142-143页 |
2 结果 | 第143-145页 |
3 讨论 | 第145-147页 |
参考文献 | 第147-149页 |
附录 | 第149-150页 |
全文总结 | 第150-152页 |
本论文的创新之处 | 第152-154页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第154-156页 |
致谢 | 第156页 |