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捻转血矛线虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因的克隆、表达与生物学特性研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-15页
前言第15-17页
第一篇 文献综述第17-68页
 第一章 捻转血矛线虫功能基因组研究进展第17-45页
  1. 捻转血矛线虫概述第17-18页
  2. 捻转血矛线虫基因组研究方法第18-26页
   ·RNA干扰技术第18-19页
   ·mRNA差异显示技术第19页
   ·代表性差异分析第19-20页
   ·抑制性消减杂交第20-22页
   ·微阵列技术第22页
   ·基因表达系列分析第22-23页
   ·限制性片段长度多态性第23-24页
   ·实时定量多聚酶链反应第24-25页
   ·其他方法第25-26页
  3. 几种重要的捻转血矛线虫基因研究进展第26-32页
   ·重要的抗药性基因第26-28页
   ·发育调控基因第28-30页
   ·疫苗候选基因第30-32页
  4. 展望第32页
  参考文献第32-45页
 第二章 丝氨酸蛋白酶抑制因子的研究进展第45-68页
  1. 丝氨酸蛋白酶抑制因子的分类第46-51页
   ·Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子家族第46-47页
   ·SERPIN型丝氨酸蛋白酶抑制因子第47-48页
   ·α2-巨球蛋白第48页
   ·Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制因子第48-49页
   ·OV型丝氨酸蛋白酶抑制因子第49-51页
  2. 丝氨酸蛋白酶抑制因子的生理功能与应用第51-56页
   ·激活Toll信号通路第51-52页
   ·性别与发育调节第52-53页
   ·血凝与血餐消化第53-54页
   ·参与免疫调节第54-56页
  3. 寄生虫SERPIN研究第56页
  4. 捻转血矛线虫SERPIN的研究现状第56页
  5. 展望第56-58页
  参考文献第58-68页
第二篇 实验研究第68-150页
 第三章 捻转血矛线虫serpin基因的克隆与序列分析第69-99页
  1 材料与方法第70-79页
   ·材料第70-71页
   ·方法第71-79页
  2. 结果第79-86页
   ·5'-RACE PCR和3'-RACE PCR第79-80页
   ·H.contortus serpin全基因序列拼接和ORF确定第80-81页
   ·H.contortus serpin序列比对第81-83页
   ·hcserpin序列的结构预测第83-85页
   ·hcserpin序列聚类分析第85-86页
  3 讨论第86-93页
  参考文献第93-96页
  附录第96-99页
 第四章 hcserpin的原核表达与重组蛋白纯化第99-120页
  1 材料与方法第100-108页
   ·材料第101-103页
   ·方法第103-108页
  2 结果第108-114页
   ·ORF基因克隆第108-109页
   ·重组质粒pET32a-hcserpin的构建与鉴定第109-111页
   ·rHCSERPIN蛋白的表达与纯化第111-112页
   ·抗血清制备与H.contortus体内天然HCSERPIN检测第112-113页
   ·Western blotting检测H.contortus天然HCSERPIN和感染山羊血清抗rHCSERPIN抗体第113-114页
  3 讨论第114-115页
  参考文献第115-119页
  附录第119-120页
 第五章 RHCSERPIN的抗胰蛋白酶作用及最适反应条件第120-130页
  1 材料与方法第121-122页
   ·材料第121页
   ·方法第121-122页
  2 结果第122-125页
   ·rHCSERPIN对Trypsin的抑制第122-123页
   ·rHCSERPIN的热稳定性第123-124页
   ·rHCSERPIN的pH稳定范围第124-125页
  3 讨论第125-127页
  参考文献第127-129页
  附录第129-130页
 第六章 RHCSERPIN的体外抗凝血活性第130-140页
  1 材料与方法第131-132页
   ·材料第131页
   ·方法第131-132页
  2 结果第132-134页
   ·兔血体外抗凝血时间第132-133页
   ·复钙时间第133-134页
  3 讨论第134-136页
  参考文献第136-138页
  附录第138-140页
 第七章 HCSERPIN在H.CONTORTUS体内的分布第140-150页
  1 材料与方法第141-143页
   ·材料第141-142页
   ·方法第142-143页
  2 结果第143-145页
  3 讨论第145-147页
  参考文献第147-149页
  附录第149-150页
全文总结第150-152页
本论文的创新之处第152-154页
攻读学位期间发表的论文第154-156页
致谢第156页

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