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T-2毒素对鸡胫骨生长板软骨细胞的毒害及其机理研究

摘要第1-14页
ABSTRACT第14-18页
缩略语第18-20页
前言第20-22页
上篇 文献综述第22-62页
 第一章 T-2毒素的研究进展第22-42页
  1 T-2毒素概况第22页
  2 T-2毒素的化学结构及性质第22-23页
  3 T-2毒素的代谢第23-24页
  4 T-2毒素的毒性研究第24-32页
   ·一般毒性第25页
   ·生产性能降低第25页
   ·消化系统损伤第25-26页
   ·免疫系统毒性第26-27页
   ·影响造血功能第27-28页
   ·骨系统损伤第28-29页
   ·被毛损伤第29页
   ·遗传毒性第29-30页
   ·神经毒性第30-31页
   ·T-2毒素与其他物质的相互作用第31-32页
  5 T-2毒素的毒害机理第32-34页
   ·影响细胞蛋白质的合成第32-33页
   ·引起生物膜结构的改变,诱导氧化应激第33页
   ·诱导细胞凋亡第33页
   ·影响营养物质成分及其吸收第33-34页
  6 T-2毒素的毒性评价第34页
  7 展望第34-35页
  参考文献第35-42页
 第二章 生长板软骨的研究进展第42-62页
  1 软骨、软骨细胞及其基质第42-43页
   ·软骨基质-胶原第42页
   ·软骨基质-蛋白聚糖第42-43页
  2 软骨生长板的生理特点第43-47页
   ·间充质细胞聚集期第44页
   ·静止期第44-45页
   ·增殖期第45页
   ·肥大期第45-46页
   ·钙化期第46-47页
  3 胫骨软骨发育不良第47-52页
   ·发病原因第47-49页
   ·临床症状及病理变化第49-50页
   ·发病机理第50-51页
   ·防治措施第51-52页
  4 软骨细胞的培养第52-54页
   ·软骨细胞的取材第52-53页
   ·软骨细胞培养条件的选择第53页
   ·培养细胞形态与生物化学特征第53-54页
  5 展望第54-55页
  参考文献第55-62页
下篇 试验研究第62-160页
 第三章 鸡生长板软骨细胞的分离、培养与生物学特性研究第62-88页
  1 材料与方法第63-68页
   ·试验动物第63页
   ·主要试剂第63页
   ·主要仪器第63-64页
   ·生长板软骨细胞的分离与培养第64页
   ·生长板软骨细胞形态的观察第64-65页
   ·细胞生长曲线的绘制第65页
   ·免疫组织化学染色第65页
   ·甲苯胺蓝染色和阿力新蓝染色法测定蛋白聚糖含量第65-66页
   ·总胶原含量的测定第66页
   ·ALP染色及活性的测定第66页
   ·矿化结节的观察和定量分析第66-67页
   ·细胞分化相关基因的表达第67-68页
   ·统计处理第68页
  2 结果第68-80页
   ·生长板软骨细胞的分离、培养及细胞形态的观察第68-74页
   ·细胞生长曲线的绘制第74-75页
   ·Ⅱ型胶原及骨钙素免疫细胞化学检测的结果第75-76页
   ·软骨细胞合成蛋白聚糖的测定结果第76-77页
   ·总胶原蛋白含量的测定结果第77-78页
   ·软骨细胞ALP表达的变化第78-79页
   ·体外钙化的定量分析第79-80页
   ·Ⅹ型胶原基因表达第80页
  3 讨论第80-83页
  4 结论第83-84页
  参考文献第84-88页
 第四章 无机磷诱导的生长板软骨细胞体外钙化体系的建立第88-108页
  1 材料与方法第89-91页
   ·主要仪器与试剂第89页
   ·细胞培养第89-90页
   ·磷对软骨细胞活力的影响第90页
   ·磷对软骨细胞形态的影响第90页
   ·磷对软骨细胞ALP和蛋白聚糖的影响第90页
   ·磷对细胞基质层钙含量的影响第90页
   ·磷对软骨细胞钙化结节形成能力的影响第90-91页
   ·磷对软骨细胞分化相关基因表达的影响第91页
   ·统计处理第91页
  2 结果第91-100页
   ·磷对软骨细胞活性影响第91-92页
   ·磷对软骨细胞的形态的影响第92-94页
   ·磷对软骨细胞ALP活性的影响第94-95页
   ·磷对软骨细胞分泌蛋白聚糖的影响第95-96页
   ·磷对软骨细胞基质层钙含量的影响第96-97页
   ·磷对软骨细胞钙化结节形成的影响第97-99页
   ·无机磷对软骨细胞X型胶原mRNA表达的影响第99-100页
  3 讨论第100-102页
  4 结论第102-103页
  参考文献第103-108页
 第五章 T-2毒素对生长板软骨细胞增殖、分化和钙化的影响第108-126页
  1 材料与方法第109-111页
   ·细胞的分离与培养第109页
   ·主要仪器和试剂第109页
   ·试验方法第109-111页
  2 结果第111-117页
   ·T-2毒素的细胞毒性第111页
   ·T-2毒素对软骨细胞形态的影响第111-113页
   ·LDH漏出率第113-114页
   ·ALP活性的影响第114页
   ·胶原蛋白和蛋白聚糖的影响第114-115页
   ·茜素红染色及钙含量测定第115-116页
   ·T-2毒素对软骨细胞mRNA的表达的影响第116-117页
  3 讨论第117-120页
  4 结论第120-121页
  参考文献第121-126页
 第六章 T-2毒素对生长板软骨细胞凋亡及Caspase-3基因表达的影响第126-146页
  1 材料与方法第127-131页
   ·主要仪器第127页
   ·主要试剂第127页
   ·试验材料第127页
   ·细胞处理及样品采集第127-128页
   ·试验方法第128-131页
  2 结果第131-138页
   ·细胞毒性第131-132页
   ·细胞周期的测定第132页
   ·双染法测定细胞凋亡第132-133页
   ·荧光染色第133-134页
   ·细胞内活性氧(ROS)第134-135页
   ·线粒体跨膜电位变化第135页
   ·细胞内钙离子浓度第135-136页
   ·细胞内GPx的活性第136-137页
   ·Caspase-3基因表达及活性第137-138页
  3 讨论第138-140页
  4 结论第140-141页
  参考文献第141-146页
 第七章 T-2毒素引起的生长板软骨细胞氧化应激及NAC的保护作用第146-160页
  1 材料与方法第147-148页
   ·实验仪器与试剂第147页
   ·细胞培养与T-2毒素处理第147页
   ·MTT试验第147页
   ·ALP活性的测定第147页
   ·ROS的测定第147页
   ·细胞内MDA含量的测定第147-148页
   ·GSH含量、CAT及SOD活性的测定第148页
   ·数据分析第148页
  2 结果第148-153页
   ·T-2毒素的细胞毒性第148-150页
   ·ALP的活性第150页
   ·ROS水平第150-151页
   ·MDA含量第151页
   ·细胞内GSH水平及CAT和SOD的活性第151-153页
  3 讨论第153-155页
  4 结论第155-156页
  参考文献第156-160页
全文结论第160-162页
本论文创新之处第162-164页
附录第164-168页
致谢第168-170页
攻读博士学位期间发表论文第170页

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