摘要 | 第1-14页 |
ABSTRACT | 第14-18页 |
缩略语 | 第18-20页 |
前言 | 第20-22页 |
上篇 文献综述 | 第22-62页 |
第一章 T-2毒素的研究进展 | 第22-42页 |
1 T-2毒素概况 | 第22页 |
2 T-2毒素的化学结构及性质 | 第22-23页 |
3 T-2毒素的代谢 | 第23-24页 |
4 T-2毒素的毒性研究 | 第24-32页 |
·一般毒性 | 第25页 |
·生产性能降低 | 第25页 |
·消化系统损伤 | 第25-26页 |
·免疫系统毒性 | 第26-27页 |
·影响造血功能 | 第27-28页 |
·骨系统损伤 | 第28-29页 |
·被毛损伤 | 第29页 |
·遗传毒性 | 第29-30页 |
·神经毒性 | 第30-31页 |
·T-2毒素与其他物质的相互作用 | 第31-32页 |
5 T-2毒素的毒害机理 | 第32-34页 |
·影响细胞蛋白质的合成 | 第32-33页 |
·引起生物膜结构的改变,诱导氧化应激 | 第33页 |
·诱导细胞凋亡 | 第33页 |
·影响营养物质成分及其吸收 | 第33-34页 |
6 T-2毒素的毒性评价 | 第34页 |
7 展望 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-42页 |
第二章 生长板软骨的研究进展 | 第42-62页 |
1 软骨、软骨细胞及其基质 | 第42-43页 |
·软骨基质-胶原 | 第42页 |
·软骨基质-蛋白聚糖 | 第42-43页 |
2 软骨生长板的生理特点 | 第43-47页 |
·间充质细胞聚集期 | 第44页 |
·静止期 | 第44-45页 |
·增殖期 | 第45页 |
·肥大期 | 第45-46页 |
·钙化期 | 第46-47页 |
3 胫骨软骨发育不良 | 第47-52页 |
·发病原因 | 第47-49页 |
·临床症状及病理变化 | 第49-50页 |
·发病机理 | 第50-51页 |
·防治措施 | 第51-52页 |
4 软骨细胞的培养 | 第52-54页 |
·软骨细胞的取材 | 第52-53页 |
·软骨细胞培养条件的选择 | 第53页 |
·培养细胞形态与生物化学特征 | 第53-54页 |
5 展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
下篇 试验研究 | 第62-160页 |
第三章 鸡生长板软骨细胞的分离、培养与生物学特性研究 | 第62-88页 |
1 材料与方法 | 第63-68页 |
·试验动物 | 第63页 |
·主要试剂 | 第63页 |
·主要仪器 | 第63-64页 |
·生长板软骨细胞的分离与培养 | 第64页 |
·生长板软骨细胞形态的观察 | 第64-65页 |
·细胞生长曲线的绘制 | 第65页 |
·免疫组织化学染色 | 第65页 |
·甲苯胺蓝染色和阿力新蓝染色法测定蛋白聚糖含量 | 第65-66页 |
·总胶原含量的测定 | 第66页 |
·ALP染色及活性的测定 | 第66页 |
·矿化结节的观察和定量分析 | 第66-67页 |
·细胞分化相关基因的表达 | 第67-68页 |
·统计处理 | 第68页 |
2 结果 | 第68-80页 |
·生长板软骨细胞的分离、培养及细胞形态的观察 | 第68-74页 |
·细胞生长曲线的绘制 | 第74-75页 |
·Ⅱ型胶原及骨钙素免疫细胞化学检测的结果 | 第75-76页 |
·软骨细胞合成蛋白聚糖的测定结果 | 第76-77页 |
·总胶原蛋白含量的测定结果 | 第77-78页 |
·软骨细胞ALP表达的变化 | 第78-79页 |
·体外钙化的定量分析 | 第79-80页 |
·Ⅹ型胶原基因表达 | 第80页 |
3 讨论 | 第80-83页 |
4 结论 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-88页 |
第四章 无机磷诱导的生长板软骨细胞体外钙化体系的建立 | 第88-108页 |
1 材料与方法 | 第89-91页 |
·主要仪器与试剂 | 第89页 |
·细胞培养 | 第89-90页 |
·磷对软骨细胞活力的影响 | 第90页 |
·磷对软骨细胞形态的影响 | 第90页 |
·磷对软骨细胞ALP和蛋白聚糖的影响 | 第90页 |
·磷对细胞基质层钙含量的影响 | 第90页 |
·磷对软骨细胞钙化结节形成能力的影响 | 第90-91页 |
·磷对软骨细胞分化相关基因表达的影响 | 第91页 |
·统计处理 | 第91页 |
2 结果 | 第91-100页 |
·磷对软骨细胞活性影响 | 第91-92页 |
·磷对软骨细胞的形态的影响 | 第92-94页 |
·磷对软骨细胞ALP活性的影响 | 第94-95页 |
·磷对软骨细胞分泌蛋白聚糖的影响 | 第95-96页 |
·磷对软骨细胞基质层钙含量的影响 | 第96-97页 |
·磷对软骨细胞钙化结节形成的影响 | 第97-99页 |
·无机磷对软骨细胞X型胶原mRNA表达的影响 | 第99-100页 |
3 讨论 | 第100-102页 |
4 结论 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-108页 |
第五章 T-2毒素对生长板软骨细胞增殖、分化和钙化的影响 | 第108-126页 |
1 材料与方法 | 第109-111页 |
·细胞的分离与培养 | 第109页 |
·主要仪器和试剂 | 第109页 |
·试验方法 | 第109-111页 |
2 结果 | 第111-117页 |
·T-2毒素的细胞毒性 | 第111页 |
·T-2毒素对软骨细胞形态的影响 | 第111-113页 |
·LDH漏出率 | 第113-114页 |
·ALP活性的影响 | 第114页 |
·胶原蛋白和蛋白聚糖的影响 | 第114-115页 |
·茜素红染色及钙含量测定 | 第115-116页 |
·T-2毒素对软骨细胞mRNA的表达的影响 | 第116-117页 |
3 讨论 | 第117-120页 |
4 结论 | 第120-121页 |
参考文献 | 第121-126页 |
第六章 T-2毒素对生长板软骨细胞凋亡及Caspase-3基因表达的影响 | 第126-146页 |
1 材料与方法 | 第127-131页 |
·主要仪器 | 第127页 |
·主要试剂 | 第127页 |
·试验材料 | 第127页 |
·细胞处理及样品采集 | 第127-128页 |
·试验方法 | 第128-131页 |
2 结果 | 第131-138页 |
·细胞毒性 | 第131-132页 |
·细胞周期的测定 | 第132页 |
·双染法测定细胞凋亡 | 第132-133页 |
·荧光染色 | 第133-134页 |
·细胞内活性氧(ROS) | 第134-135页 |
·线粒体跨膜电位变化 | 第135页 |
·细胞内钙离子浓度 | 第135-136页 |
·细胞内GPx的活性 | 第136-137页 |
·Caspase-3基因表达及活性 | 第137-138页 |
3 讨论 | 第138-140页 |
4 结论 | 第140-141页 |
参考文献 | 第141-146页 |
第七章 T-2毒素引起的生长板软骨细胞氧化应激及NAC的保护作用 | 第146-160页 |
1 材料与方法 | 第147-148页 |
·实验仪器与试剂 | 第147页 |
·细胞培养与T-2毒素处理 | 第147页 |
·MTT试验 | 第147页 |
·ALP活性的测定 | 第147页 |
·ROS的测定 | 第147页 |
·细胞内MDA含量的测定 | 第147-148页 |
·GSH含量、CAT及SOD活性的测定 | 第148页 |
·数据分析 | 第148页 |
2 结果 | 第148-153页 |
·T-2毒素的细胞毒性 | 第148-150页 |
·ALP的活性 | 第150页 |
·ROS水平 | 第150-151页 |
·MDA含量 | 第151页 |
·细胞内GSH水平及CAT和SOD的活性 | 第151-153页 |
3 讨论 | 第153-155页 |
4 结论 | 第155-156页 |
参考文献 | 第156-160页 |
全文结论 | 第160-162页 |
本论文创新之处 | 第162-164页 |
附录 | 第164-168页 |
致谢 | 第168-170页 |
攻读博士学位期间发表论文 | 第170页 |