| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| ·抗菌肽简介 | 第11-12页 |
| ·抗菌肽的杀菌机理 | 第12-13页 |
| ·"桶板"模型 | 第12页 |
| ·"毡毯"模型 | 第12-13页 |
| ·抗菌肽的生物学功能 | 第13-14页 |
| ·抗菌肽对细菌的作用 | 第13页 |
| ·抗菌肽对原虫作用 | 第13页 |
| ·抗菌肽对真菌的作用 | 第13-14页 |
| ·抗病毒作用 | 第14页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第14页 |
| ·抗菌肽的生物技术 | 第14-15页 |
| ·用基因工程的方法生产抗菌肽 | 第14-15页 |
| ·抗菌肽分子的设计和改造 | 第15页 |
| ·抗菌肽应用前景展望 | 第15-16页 |
| ·医药领域 | 第15-16页 |
| ·食品和化妆品领域 | 第16页 |
| ·畜牧业领域 | 第16页 |
| ·农业领域 | 第16页 |
| ·乳腺炎及其防治 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-31页 |
| ·主要器材和试剂 | 第19-20页 |
| ·实验器材 | 第19页 |
| ·实验试剂 | 第19-20页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·引物 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-25页 |
| ·样品获取 | 第20页 |
| ·总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·RT-PCR扩增CecropinB基因 | 第21-22页 |
| ·PCR扩增产物连接T载体 | 第22-25页 |
| ·真核表达载体pECFP-B的构建 | 第25-27页 |
| ·材料和仪器 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·细胞培养 | 第27-29页 |
| ·主要器材和试剂 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-29页 |
| ·细胞转染及表达产物的检测 | 第29-30页 |
| ·材料和仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-30页 |
| ·抗菌肽B在奶山羊乳腺组织中的表达 | 第30-31页 |
| ·抗菌肽在正常奶山羊乳腺组织中的表达 | 第30页 |
| ·抗菌肽在患乳腺炎的奶山羊乳腺组织中的作用 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| ·蚕蛹总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·CecropinB基因的克隆、鉴定与序列测定 | 第32-34页 |
| ·CecropinB基因的PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·重组子pMDl8-B的PCR及双酶切鉴定 | 第33页 |
| ·蚕蛹CecropinB基因的序列测定 | 第33-34页 |
| ·真核表达重组子pECFP-B的PCR鉴定 | 第34页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞的分离培养及鉴定 | 第34-36页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞的分离培养 | 第34-35页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞的鉴定 | 第35-36页 |
| ·表达产物的检测 | 第36-39页 |
| ·报告基团荧光检测 | 第36页 |
| ·抗菌肽在转染细胞中mRNA水平上的检测 | 第36-37页 |
| ·平板扩散法检测生物活性 | 第37-38页 |
| ·CecropinB基因在奶山羊乳腺上皮细胞中的稳定表达 | 第38页 |
| ·转染后不同时期表达情况的检测 | 第38-39页 |
| ·抗菌肽B在奶山羊乳腺组织中的表达 | 第39-41页 |
| ·抗菌肽B在正常奶山羊乳腺组织中的表达 | 第39页 |
| ·抗菌肽在患乳腺炎的奶山羊乳腺组织中的作用 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-45页 |
| ·CecropinB基因的获得 | 第41-42页 |
| ·总RNA的提取 | 第41页 |
| ·RT-PCR | 第41-42页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞的分离培养和细胞转染 | 第43-44页 |
| ·转基因技术防治哺乳动物乳腺炎的前景展望 | 第44-45页 |
| ·CecropinB基因抗奶山羊乳腺炎的效果分析 | 第44页 |
| ·转基因技术防治哺乳动物乳腺炎的前景 | 第44-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第50页 |