甘蓝型油菜隐性核不育基因Bnms1的精细定位和克隆
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-37页 |
| ·油菜雄性不育与杂种优势利用 | 第13-16页 |
| ·细胞质雄性不育 | 第14-15页 |
| ·细胞核雄性不育 | 第15-16页 |
| ·油菜细胞核雄性不育的研究 | 第16-22页 |
| ·油菜细胞核雄性不育的细胞学研究 | 第16-17页 |
| ·油菜细胞核雄性不育的遗传 | 第17-19页 |
| ·显性细胞核雄性不育 | 第17-18页 |
| ·隐性细胞核雄性不育 | 第18-19页 |
| ·油菜细胞核雄性不育基因的定位 | 第19-20页 |
| ·油菜细胞核雄性不育的分子机理 | 第20-22页 |
| ·油菜的遗传图谱及重要基因的定位 | 第22-26页 |
| ·甘蓝型油菜的遗传图谱 | 第22-23页 |
| ·甘蓝型油菜重要基因的定位 | 第23-26页 |
| ·品质性状相关基因的定位 | 第23-24页 |
| ·抗病性状相关基因的定位 | 第24-25页 |
| ·开花期性状相关基因的定位 | 第25页 |
| ·育性相关基因的定位 | 第25-26页 |
| ·芸薹属作物与拟南芥比较基因组研究 | 第26-30页 |
| ·共线性比较 | 第26-28页 |
| ·芸薹属和拟南芥的起源与进化关系 | 第28页 |
| ·芸薹属作物与拟南芥比较基因组研究的意义 | 第28-30页 |
| ·拟南芥花粉发育的研究 | 第30-35页 |
| ·拟南芥花粉发育时期的划分和主要形态变化 | 第30-31页 |
| ·花药绒毡层的发育和功能 | 第31-34页 |
| ·花粉外壁合成相关基因 | 第34-35页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第35-37页 |
| 2 材料和方法 | 第37-53页 |
| ·试验材料 | 第37页 |
| ·花药半薄切片的制作 | 第37-38页 |
| ·AFLP与BSA分析 | 第38-40页 |
| ·DNA提取及样品池的构建 | 第38页 |
| ·AFLP分析 | 第38-40页 |
| ·SCAR标记转化 | 第40-42页 |
| ·差异片段的回收与连接 | 第40页 |
| ·差异片段的克隆与测序 | 第40-41页 |
| ·PCR walking | 第41页 |
| ·SCAR引物设计、PCR扩增 | 第41-42页 |
| ·基因的遗传定位 | 第42-44页 |
| ·DH群体的分子标记分析 | 第42-43页 |
| ·SSR标记分析 | 第42页 |
| ·RFLP标记分析 | 第42页 |
| ·RAPD标记分析 | 第42-43页 |
| ·SRAP标记分析 | 第43页 |
| ·连锁遗传分析 | 第43-44页 |
| ·BAC文库的筛选及Shotgun测序 | 第44-50页 |
| ·BAC文库 | 第44-45页 |
| ·BAC文库的筛选和阳性克隆的PCR鉴定 | 第45-47页 |
| ·菌落杂交 | 第45-46页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第46-47页 |
| ·Shotgun测序 | 第47-49页 |
| ·Shotgun测序文库的构建 | 第47-48页 |
| ·序列分析 | 第48-49页 |
| ·新标记的开发 | 第49页 |
| ·候选基因的表达分析 | 第49页 |
| ·候选基因的比较测序 | 第49-50页 |
| ·DNA比较测序 | 第49页 |
| ·cDNA比较测序和RNA提取 | 第49-50页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第50-53页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·pBnG15表达载体的构建 | 第50页 |
| ·pAtG15RNAi干涉载体的构建 | 第50-51页 |
| ·油菜的遗传转化 | 第51-52页 |
| ·拟南芥的遗传转化 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-84页 |
| ·不育性状的遗传分析 | 第53-54页 |
| ·花药半薄切片观察 | 第54-57页 |
| ·与Bnms1连锁的AFLP标记 | 第57-59页 |
| ·SCAR标记转化 | 第59-61页 |
| ·差异片段的克隆测序 | 第59页 |
| ·AFLP侧翼序列的分离 | 第59-60页 |
| ·SCAR标记体系的建立 | 第60页 |
| ·标记位点序列的生物信息学分析 | 第60-61页 |
| ·Bnms1基因的遗传定位 | 第61-66页 |
| ·DH群体标记多态性筛选及标记群体分析 | 第61-62页 |
| ·DH群体遗传连锁图谱构建 | 第62-64页 |
| ·Bnms1基因的图谱定位 | 第64-66页 |
| ·Bnms1基因的物理定位 | 第66-77页 |
| ·Bnms1基因的BAC克隆定位 | 第66-67页 |
| ·Shotgun测序和新标记的开发 | 第67-71页 |
| ·候选基因的预测 | 第71-72页 |
| ·候选基因的表达分析 | 第72-73页 |
| ·候选基因的比较测序 | 第73-77页 |
| ·DNA序列比较 | 第73-75页 |
| ·cDNA序列比较 | 第75-77页 |
| ·候选基因的遗传转化 | 第77-83页 |
| ·甘蓝型油菜的遗传转化 | 第77-79页 |
| ·转基因载体的构建 | 第77-78页 |
| ·油菜转化单株的GUS检测 | 第78-79页 |
| ·拟南芥遗传转化 | 第79-83页 |
| ·RNAi载体的构建 | 第79-81页 |
| ·拟南芥转基因植株筛选和育性观察 | 第81-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-90页 |
| ·AFLP标记结合BSA分析是基因定位的有效方法 | 第84-85页 |
| ·油菜基因组多倍性对图位克隆的影响 | 第85-86页 |
| ·候选基因G15可能是S45A败育的关键基因 | 第86-88页 |
| ·显性基因BnMs1的应用 | 第88页 |
| ·进一步的工作 | 第88-90页 |
| 5 参考文献 | 第90-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 附录1:本研究所用的引物 | 第106-107页 |
| 附录2:油菜转基因所用的培养基 | 第107-108页 |
| 附录3:作者简介和在读期间发表论文 | 第108页 |
