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结核分枝杆菌lhp基因的原核表达及其产物的单克隆抗体研制

中文摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-9页
符号说明第9-11页
第一章 结核病流行与诊断研究进展第11-25页
 1 结核病的流行状况第11-13页
 2 结核分枝杆菌致病机制第13-14页
 3 结核分枝杆菌引发的T细胞免疫反应第14-15页
 4 结核病诊断技术第15-19页
 5 CFP-10蛋白在诊断中的意义第19-20页
 参考文献第20-25页
第二章 结核分枝杆菌lhp基因的原核表达第25-34页
 1 材料和方法第25-27页
   ·材料第25-26页
     ·菌株、质粒第25页
     ·试剂第25-26页
   ·方法第26-27页
     ·PCR扩增lhp基因第26页
     ·PCR扩增lhp-linker-esat-6片段第26页
     ·原核表达质粒pGEX-6p-1-lhp、pET-30a(+)-lhp-linker-esat-6的构建与鉴定第26页
     ·lhp基因在重组菌的原核表达及融合蛋白纯化第26-27页
       ·重组菌BL21(DE3)-pET-30a(+)-lhp的表达及融合蛋白纯化第26-27页
       ·重组菌BL21-pGEX-6p-1-lhp的表达及融合蛋白纯化第27页
       ·重组菌BL21(DE3)-pET-30a(+)-lhp-linker-esat-6的原核表达第27页
 2 结果第27-30页
   ·lhp基因的PCR扩增及表达载体构建第27页
   ·lhp-linker-esat-6片段扩增及表达载体构建第27-28页
   ·重组菌表达产物的SDS-PAGE分析第28-30页
     ·重组菌的BL21(DE3)-pET-30a(+)-lhp的SDS-PAGE分析第28-29页
     ·重组菌BL21-pGEX-6p-1-lhp的SDS-PAGE分析第29页
     ·重组菌BL21(DE3)-pET-30a(+)-lhp-linker-esat-6的SDS-PAGE分析第29-30页
 3 讨论第30-31页
 参考文献第31-34页
第三章 结核分枝杆菌CFP-10蛋白单克隆抗体的制备及鉴定第34-44页
 1 材料和方法第35-38页
   ·菌株和试剂第35页
     ·菌株第35页
     ·试剂第35页
     ·主要仪器设备第35页
     ·实验动物和细胞系第35页
   ·方法第35-38页
     ·免疫原的制备第35页
     ·检测抗原的制备第35页
     ·动物免疫第35-36页
     ·细胞融合第36页
     ·阳性克隆的筛选第36-37页
       ·间接ELISA检测方法的建立第36页
       ·筛选阳性细胞克隆第36-37页
       ·阳性杂交瘤细胞的克隆化第37页
     ·腹水制备第37页
     ·单抗生物学特性鉴定第37-38页
       ·单抗亚类的鉴定第37页
       ·腹水效价的测定第37页
       ·单抗特异性的鉴定第37-38页
         ·Dot-ELISA实验第37页
         ·Western-blot实验第37-38页
 2 结果第38-40页
   ·杂交瘤细胞株的建立第38页
   ·单抗生物学特性鉴定第38-39页
   ·单抗特异性鉴定第39-40页
     ·单抗反应谱的测定第39-40页
     ·Western-blot分析结果第40页
 3 讨论第40-41页
 参考文献第41-44页
致谢第44-45页

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