| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 一 文献综述 | 第13-31页 |
| ·稻瘟病菌侵染循环 | 第14-15页 |
| ·稻瘟病菌株的多样性 | 第15-17页 |
| ·致病性变异的原因 | 第17页 |
| ·稻瘟病菌功能基因的研究 | 第17-18页 |
| ·稻瘟病菌的突变体研究途径 | 第18-20页 |
| ·物理诱变 | 第18页 |
| ·化学诱变 | 第18-19页 |
| ·外源DNA插入突变 | 第19-20页 |
| ·稻瘟病菌附着胞的穿透与扩展以及病斑形成 | 第20-23页 |
| ·附着胞的穿透 | 第20-22页 |
| ·侵入后生长及病斑形成 | 第22-23页 |
| ·根癌农杆菌介导的转化(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation, ATMT) | 第23-30页 |
| ·ATMT在丝状真菌上应用的研究现状 | 第23页 |
| ·根癌农杆菌介导真菌遗传转化的机理 | 第23-26页 |
| ·根癌农杆菌介导丝状真菌转化的一般方法 | 第26-27页 |
| ·根癌农杆菌介导的丝状真菌转化的特点 | 第27-30页 |
| ·本研究的实验目的和内容 | 第30-31页 |
| 二 材料与方法 | 第31-46页 |
| ·菌株、质粒、试剂及培养条件 | 第31-32页 |
| ·菌株 | 第31页 |
| ·质粒 | 第31页 |
| ·供试植物 | 第31页 |
| ·试剂及来源 | 第31-32页 |
| ·菌种保存及培养条件 | 第32页 |
| ·培养基的配制 | 第32-34页 |
| ·常规分子生物学实验技术 | 第34-38页 |
| ·PCR反应 | 第34-35页 |
| ·酶切反应 | 第35页 |
| ·DNA的琼脂糖电泳 | 第35页 |
| ·DNA片段的凝胶回收 | 第35-36页 |
| ·酶切片段的去磷酸化(CIAP) | 第36页 |
| ·连接反应 | 第36-37页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第37页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第37-38页 |
| ·提取质粒DNA | 第38页 |
| ·农杆菌的冻融法转化 | 第38-39页 |
| ·农杆菌的电击转化 | 第39-40页 |
| ·农杆菌的电击感受态制备 | 第39页 |
| ·农杆菌的电击转化 | 第39-40页 |
| ·稻瘟病菌的T-DNA转化 | 第40页 |
| ·转化子DNA提取与分析 | 第40-41页 |
| ·CTAB法提取基因组DNA | 第40-41页 |
| ·PCR验证 | 第41页 |
| ·突变体的表型分析 | 第41-42页 |
| ·生长速度与产孢量 | 第41-42页 |
| ·孢子萌发与附着孢形成观察 | 第42页 |
| ·致病性测定 | 第42页 |
| ·突变体A1-134的T-DNA侧翼基因组序列扩增 | 第42-45页 |
| ·高效TAIL-PCR引物 | 第42-43页 |
| ·高效TAIL-PCR反应条件 | 第43-45页 |
| ·T-DNA标记的基因分析 | 第45-46页 |
| 三 结果与分析 | 第46-61页 |
| ·稻瘟病菌的T-DNA转化 | 第46-47页 |
| ·诱导培养 | 第46页 |
| ·选择培养基中抗生素的选择 | 第46页 |
| ·转化效率 | 第46-47页 |
| ·突变体的生物学特性 | 第47-52页 |
| ·致病性测定 | 第47-48页 |
| ·突变体表型分析 | 第48-52页 |
| ·突变体A1-134的PCR检测 | 第52-53页 |
| ·突变体A1-134的T-DNA侧翼序列扩增及克隆 | 第53-59页 |
| ·高效TAIL-PCR扩增突变体A1-134的左翼序列 | 第53-54页 |
| ·突变体A1-134的插入基因库克隆 | 第54-56页 |
| ·A1-134突变体T-DNA标记基因信息生物学分析 | 第56-59页 |
| ·突变体A1-134互补载体构建 | 第59-61页 |
| 四、讨论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
